婴幼儿哮喘血清维生素D及T 细胞亚群变化研究

沙影丽，姜慧轶，闫雯雯

（吉林大学第一医院二部儿科，长春 130031）

全球医学界所进行的动物实验已经证明，活性维生素D能够对T细胞的分化产生作用[1]，与肿瘤、骨关节炎、心血管疾病、抑郁症、哮喘等的发生、发展都有一定的关联[2]。本研究拟观察哮喘患儿血清维生素D水平、T细胞亚群的变化并探讨其相互关系，为哮喘的诊断及治疗提供一定的理论和实践依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年11月－2018年05月某三甲医院门诊随诊哮喘（临床缓解期）并伴有维生素D缺乏的患儿，哮喘常规加VD治疗组（A组）予以补充维生素D及予以常规平喘治疗的70例，男42例，女28例，年龄12～36个月，平均（21.96±4.59）个月；哮喘常规治疗组（B组）未予补充维生素D治疗，仅予以常规平喘治疗的患儿70例，男39例，女31例，年龄12～36个月（22.21±4.62）个月；对照组为同期儿科门诊健康体检儿童55例，男32例，女23例，年龄12～36个月，平均（22.20±4.87）个月。

1.2 研究方法

1.2.1 血清维生素D的测定 采用安捷伦1260高效液相色谱仪、安捷伦6460串联质谱仪。VD主要的来源为外源性和阳光（紫外线）照射[3]，整个变化过程受到的影响因素很多[4]，它可调节肾脏和肠道部位的钙和磷两种元素的代谢[5-7]。胡雁等[8]研究发现VD表现出较强的选择性的免疫调节药物，经过代谢后会产生很多产物，其中25（OH）D在血浆中的含量是最高的，因此被当做是检测VD含量的关键性指标[9]。

1.2.2 T细胞亚群的测定 利用FACSCalibur流式细胞仪（美国BD公司生产）检测T细胞亚群水平变化。

1.3 治疗方法

1.3.1 常规治疗 包括雾化吸入（普米克令舒、沙丁胺醇）、扣背排痰、口服顺尔宁（2 mg/d，睡前服用）、口服美普清（15～20 μg/d，睡前服用）。

1.3.2 维生素D治疗 对于维生素D缺乏及不足患儿，如无低钙抽搐表现，予先期口服迪巧颗粒1周（1袋/d）后，再1次性肌肉注射维生素D3，15万U，30 d后复查。

1.4 统计学处理 利用SPSS 21.0对数据进行统计与分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，计数资料采用构成比和率，组间比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，多组间均数比较采用单因素ANOVA检验，采用Pearson进行相关分析。

2 结果

2.1 2组年龄、体质量、身高情况比较 见表1。

表1 2组年龄、体质量、身高情况比较

2.2 2组治疗前后血清维生素D比较 见表2。

表2 2组治疗前后血清维生素D比较（ ，n = 70） ng/mL

表2 2组治疗前后血清维生素D比较（ ，n = 70） ng/mL

注：与治疗前比较，# P＜0.05，△P＞0.05

组 别 时 间 25（OH）D2 25（OH）D3 25（OH）D A 组 治疗前 3.51±0.85 14.89±3.73 18.41±3.93治疗后 3.25±0.89# 25.14±4.49# 28.12±4.58#B 组 治疗前 3.79±1.11 15.16±3.24 19.00±3.54治疗后 3.61±1.04△ 15.28±3.65△ 18.89±3.84△

2.3 2组治疗前后T细胞亚群水平比较 见表3。

表3 2组治疗前后T细胞亚群水平比较（， n =70）

表3 2组治疗前后T细胞亚群水平比较（， n =70）

注：与治疗前比较，# P＜0.05，△P＞0.05

组 别 时 间 CD3+/% CD4+/% CD8+/% CD4+/CD8+A 组 治疗前 57.47±5.92 40.02±4.17 21.32±2.84 1.89±0.19治疗后 70.54±2.34# 26.04±2.89# 22.43±1.87# 1.17±0.14#B 组 治疗前 59.05±7.29 39.64±5.54 21.26±3.77 1.90±0.32治疗后 61.59±7.76△ 37.27±6.95△ 21.55±3.14△ 1.77±0.39△

2.4 A组治疗后25（OH）D3与T细胞亚群的相关性比较 见表4。

表4 A组治疗后25（OH）D3与T细胞亚群的相关性比较

2.5 B组治疗后25（OH）D3与T细胞亚群的相关性比较 见表5。

表5 B组治疗后25（OH）D3与T细胞亚群的相关性比较

3 讨论

3.1 维生素D缺乏与婴幼儿哮喘 Brehm[10]以北美地区1024例表现出长期性轻微和中等程度哮喘的儿童为例展开研究，研究结果表明他们中有35%存在VD含量低于常人的现象，且这种现象能够使得哮喘病情变得更加严重。该研究小组还对616例来自哥斯达黎加的哮喘儿童进行了研究，结果表明VD对乙酰胆碱产生作用，从而有效地减轻了哮喘病情[11]。Bener[12-17]等及其小组等各研究均发现发现血清中VD的含量与患儿哮喘之间的相关性。本研究统计结果显示，治疗前哮喘患儿的25（OH）D3和总D的含量均显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），说明哮喘患儿确实存在维生素D缺乏的现象，其中以25（OH）D3缺乏占主导地位。国内学者麦远长等[19-21]的研究显示，毛细支气管炎患儿较健康儿童血清维生素D水平低，缺乏维生素D的儿童更易患毛细支气管炎；马秀丽、甄艳芬[20]的研究显示，缺乏25（OH）D3可能是导致儿童哮喘发作的诱因。本研究与以上学者的研究一致。如果婴幼儿体内维生素D含量比较低的话，就会出现肋骨硬度不够、肌肉无力、呼吸功能减退的症状，肺部受到感染的可能性大幅超过体内维生素D3相对充足的儿童。任春锋、杜开先[21]的研究证实在RSV急性感染期存在T细胞亚群紊乱，这与本研究的结论相同。

3.2 T细胞亚群变化与婴幼儿哮喘 本研究A、B组与健康体检儿童的T细胞亚群比较发现：治疗前，A组与对照组比较CD3+处于较低水平，CD4+处于较高水平，CD8+处于较低水平，CD4+/CD8+比值处于较高水平，均有统计学意义（P＜0.05）；而B组与对照组比较CD3+处于较低水平，CD4+处于较高水平，CD8+处于较低水平，CD4+/CD8+比值处于较高水平，同样具有统计学意义（P＜0.05）。2组T细胞亚群的各项指标均低于对照组即健康体检的儿童，说明哮喘患儿确实存在T细胞免疫功能的紊乱。

3.3 维生素D缺乏与T细胞亚群变化 周妍等[22]研究显示，经25（OH）D3治疗后能够抑制炎症反应，从而达到调节免疫反应的作用。本研究发现，A组经维生素D治疗后，其CD3+水平与治疗前相比明显升高，CD4+明显下降、CD8+明显升高、CD4+/CD8+明显下降，提示补充维生素D确实可以纠正T细胞功能的异常；而B组经过常规的治疗后，其各项水平基本维持于原水平，仍处在一种紊乱的状态下，进一步说明维生素D对哮喘患儿T细胞免疫紊乱有治疗作用。2组T细胞亚群的上述改变，提示哮喘患儿在疾病的一定阶段确实存在T细胞免疫功能的紊乱，并且维生素D在该类患儿T细胞免疫紊乱的发生中可能具有治疗或免疫调节的作用。

4 结论

本文证实哮喘患儿存在T细胞功能紊乱及维生素D的缺乏，其中以25（OH）D3缺乏占主导地位，故在常规治疗的同时予以补充维生素D治疗，可以有效纠正T细胞功能的紊乱。予以补充维生素D治疗后，CD3+明显升高，CD4+明显下降，CD8+有所升高，CD4+/CD8+明显降低，与健康体检儿童相比较为接近。说明常规治疗下同时注意补充维生素D对于哮喘患儿T细胞功能的紊乱有着良好的治疗效果。维生素D3缺乏如何导致哮喘患儿T细胞免疫紊乱的发生，有待将来进一步的深入研究来阐明。