microRNA表达与缺血性脑卒中所致抑郁相关性研究

史方堃

【摘 要】目的：研究microRNA表达与缺血性脑卒中所致抑郁相关性。方法：随机选择2018年1月到2019年1月至我院进行脑梗死治疗的80例患者进行临床研究。所有患者均在发病后30d给予抑郁自评量表（SDS）评价以及MiR-146a、MiR-34a检测。患者发病30d后给予抑郁自评量表（SDS）评价，按照评分<53分和≥53分分为正常组和抑郁组，比较两组患者表达水平差异。使用Spearman等级相关分析观察MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分的相关性。结果：正常组患者MiR-146a、MiR-34a表达水平均高于抑郁组，且具有统计学差异（p<0.05），使用Spearman等级相关分析观察MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分的相关性，结果发现MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分具有负相关（p<0.05），其中MiR-34a的相关度最高（r=-0.842，p=0.027）。结论：MiR-146a、MiR-34a水平表达与缺血性脑卒中所致抑郁成负相关，因此上述指标可以成为对缺血性脑卒中后是否会发生抑郁的预测依据。

【关键词】microRNA;缺血性脑卒中;抑郁

卒中后抑郁是脑卒中后最常见的并发症之一，患者以情绪低落、兴趣缺失、认知功能障碍为主要临床特征[1]，MiRs是小分子非编码RNA，通过转录后的水平对基因进行调控，进而参与细胞的生长、分化、凋亡等过程，被认为在神经元和脑源性神经营养因子生成等方面扮演重要的作用[2]。MiR-146a、MiR-34a是MiRs中的重要成员，为观察其表达与缺血性脑卒中所致抑郁的相关性，我院进行了本次研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 患者选择

随机选择2018年1月到2019年1月至我院进行脑梗死治疗的80例患者进行临床研究。所有患者均符合全国第4届脑血管病学术会议制定的诊断标准，并经头CT和颈部超声确定诊断。其中男性患者47例，女性患者33例，年龄58-79岁，平均年龄（64.33±5.14）岁。

纳入标准：

（1）确诊为缺血性脑卒中。

（2）患者发病30d后神志清楚，无交流障碍。

（3）既往无脑卒中病史。

（4）患者或者患者家属对本次研究知情同意。

排除标准：

（1）合并其他大脑疾病的患者。

（2）既往有脑出血或者脑梗死病史的患者。

（3）既往有Alzheimer病等认知功能障碍疾病的患者。

（4）既往有抑郁、狂躁等精神系统疾病的患者。

（5）不同意参与本次研究的患者。

1.2 方法

1.2.1 研究方法

所有患者均在发病后30d给予抑郁自评量表（SDS）评价以及MiR-146a、MiR-34a检测。

抑郁自评量表（SDS）：该量表共计20分，4级评分，得分越高，抑郁程度越严重。原始分乘以1.25后取整数为标准分。在53分以下为无抑郁，53-62分为轻度抑郁，63-72分为中度抑郁，73分以上为重度抑郁。

MiR-146a、MiR-34a检测：取患者晨起空腹肘正中静脉血2ml，EDTA-K2抗凝管在4℃条件下保存。在样本采集后6h内使用RNAiso Blood提取总RNA，分别使用超微量分光光度计和琼脂糖凝胶电泳对RNA的纯度和完整性进行测试，测试结果合格后，在-80℃条件下保存。使用逆转录试剂盒对基因组DNA消化，并完成逆转录反应，将RNA逆转录成cDNA，使用实时荧光定量PCR反应对得到的cDNA进行定量检测，内参为U6，最终得到25μg的反应体系，反应条件：预变性经历1个循环，95℃、30s;PCR反应：40循环、95℃、30s、60℃、34s。反应结束后通过循环阈值计算表达量。每个样本重复3次实验，取平均值为最终结果。

1.2.2 分析指标

患者发病30d后给予抑郁自评量表（SDS）评价，按照评分<53分和≥53分分为正常组和抑郁组，比较两组患者表达水平差异。使用Spearman等级相关分析观察MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分的相关性。

1.3 数据处理

用SPSS19.0统计学数据处理软件处理研究中所有相关数据，计量资料用均数±标准差（）表示，并采用 t 检验，计数资料采用（n，%）表示，采用X2检验，以 p<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者基线资料比较

两组患者性别、年龄、梗死面积、基础疾病以及NIHSS評分均无统计学异（p>0.05），详见表1。

2.2 两组患者MiR-146a、MiR-34a表达水平比较

正常组患者MiR-146a、MiR-34a表达水平均高于抑郁组，且具有统计学差异（p<0.05），详见表2。

2.3 MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分的相关性比较

MiR-146a、MiR-34a表达水平与SDS评分具有负相关（p<0.05），其中MiR-34a的相关度最高（r=-0.842，p=0.027），详见表3。

3 讨论

脑卒中所致抑郁的发病率在脑卒中发病后30d内达到17-52%。缺血性脑卒中在全部脑卒中的发病率占60-80%，这部分患者的卒中后抑郁发病率更高，严重的影响了患者的身体和心理健康，同时也不利于疾病的恢复[3]。

MiRS被认识为与抑郁症发生具有相关性的RNA，其异常表达会引起相应的调控网络发生紊乱，从而引起疾病的发生[4]。因为MiRS在血清中含量较高，且表达稳定，因此随着研究的深入，部分成员已经成为疾病的诊断标志。近年来的研究发现，MiR-146a可以作为亚洲人口的中风预后的诊断标志物，而MiR-34a能够作为预测缺血性脑卒中的发病风险。但是在实际研究中，MiR-146a、MiR-34a表达水平在阿尔兹海默患者中也会出现异常改变，考虑上述RNA与大脑的中枢神经病变相关。在本次研究中，正常组患者MiR-146a、MiR-34a表达水平均高于抑郁组，说明发生抑郁的患者，MiR-146a、MiR-34a表达水平出现降低，且其水平与SDS评分负相关，这可能与MiR-146a所调节的通路具有缓解炎症的作用，MiR-34a所具有的调节细胞质代谢的功能相关。

综上所述，MiR-146a、MiR-34a水平表达与缺血性脑卒中所致抑郁成负相关，因此上述指标可以成为对缺血性脑卒中后是否会发生抑郁的预测依据。

参考文献

[1]吴江，贾建平，等.神经病学（第2版）[M].人民卫生出版社，2010：150-153.

[2]TaylorWD，AizensteinHJ，AlexopoulosGS.The vasculardepression hypothesis： mechanisms linki ng vascular disease with depression[J].Mol Psychiatry，2013， 18：963-974.

[3]杨琼，杨侃，李安莹，等.MicroRNA-21 在缺血再灌注损伤早期大鼠心肌的表达及抗细胞凋亡作用[J].中南大学学报，2013，38（5）.

[4]姚珊，沈霞，岳炫烨.SLC6A4基因rs2020939多态性与卒中后抑郁相关性的研究[J].徐州医学院学报，2014，34：689.