ACE及AGT基因多态性与糖尿病肾病发病风险的关系

冉隆梅 王宇琴 赖红辉 刘敏华 孙艳宇

【摘要】 目的 探究血管緊张素转换酶（ACE）基因和血管紧张素原（AGT）基因多态性与糖尿病肾病发病风险的关联。方法 选取37糖尿病肾病患者作为实验组， 另选同期37例符合对照标准的健康者作为对照组。对比两组研究对象的ACE基因I/D多态性检测与AGT基因M235T多态性检测分析结果。结果 实验组DD基因分布频率21.6%（8/37）高于对照组的5.4%（2/37）， 差异具有统计学意义（P<0.05）。实验组患者ACE基因中的D等位基因频率、I等位基因频率分别为48.6%（36/74）、51.4%（38/74）， 对照组患者分别为27.0%（20/74）、73.0%（54/74）， 对比差异有统计学意义（P<0.05）。实验组TT基因分布频率为43.2%（16/37）， 对照组为48.6%（18/37）， 对比差异无统计学意义（P>0.05）。实验组患者AGT基因中的

T等位基因频率、M等位基因频率分别为63.5%（47/74）、36.5%（27/74）， 对照组患者分别为68.9%（51/74）、31.1%（23/74）， 对比差异无统计学意义（P>0.05）。结论 糖尿病肾病可受到多基因的影响， 单个基因变异也能够对糖尿病肾病产生影响， ACE-DD基因型与高糖尿病肾病存在明显联系， AGT-TT 基因型与糖尿病肾病无明显联系。

【关键词】 血管紧张素转换酶基因;血管紧张素原基因;基因多态性;糖尿病肾病;发病风险

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.27.114

Association of ACE and AGT gene polymorphisms with the risk of diabetic nephropathy   RAN Long-mei， WANG Yu-qin， LAI Hong-hui， et al. Department of Geriatrics， Guangzhou First Peoples Hospital， Guangzhou 510180， China

【Abstract】 Objective   To investigate the correlation between angiotensin converting enzyme （ACE） gene and angiotensinogen （AGT） gene polymorphisms and the risk of diabetic nephropathy. Methods   37 patients with diabetic nephropathy served as the experimental group and concurrent 37 healthy persons who met the control criteria served as the control group. The results of ACE gene I/D polymorphism and AGT gene M235T polymorphism were compared between the two groups. Results   The DD gene distribution frequency 21.6%（8/37） in the experimental group was higher than 5.4%（2/37） in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The D allele frequency and I allele frequency in ACE gene were 48.6%（36/74） and 51.4%（38/74） respectively， which were 27.0%（20/74） and 73.0%（54/74） in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The TT gene distribution frequency was 43.2%（16/37） in the experimental group， which was 48.6%（18/37） in the control group， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. The T allele frequency and M allele frequency in AGT gene were 63.5%（47/74） and 36.5%（27/74） respectively， which were 68.9%（51/74） and 31.1%（23/74） in the control group， and their difference was not statistically significant （P>0.05）.Conclusion   Diabetic nephropathy can be affected by multiple genes. Single gene mutation can also affect diabetic nephropathy. ACE-DD genotype is significantly associated with high diabetic nephropathy. AGT-TT genotype is not significantly associated with diabetic nephropathy.

【Key words】 Angiotensin converting enzyme gene; Angiotensinogen gene; Gene polymorphisms; Diabetic nephropathy; Incidence risk

糖尿病属于内分泌系统疾病， 主要对人体的糖代谢功能产生影响， 若未得到有效治疗， 可对患者的身体健康产生严重影响， 并引起全身性并发症的发生， 其中糖尿病肾病最为常见[1]。糖尿病肾病是导致肾功能衰竭的第二大因素， 就当下的医疗手段而言， 尚未明确糖尿病肾病的发病机制[2]。大部分学者认为[3， 4]， 肾素血管紧张素系统能够参与到患者的体液调节中， 维持血压平衡和组织液平衡， 而糖尿病肾病

患者体内肾素血管紧张素系统处于激活异常状态中， 并且血管紧张素转换酶中的ACE基因中第16内含子， 可能会出现缺失或增多等异常形态[5]。因此， 本文主要对ACE及AGT基因多态性与糖尿病肾病发病风险的关系进行探究， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2018年1月～2019年1月在本院就诊的糖尿病患者37例作为实验组， 其中男18例， 女19例， 年龄34～78岁， 平均年龄（56.91±8.01）岁。另选取同期于本院体检中心就诊的符合对照组标准的健康者37例作为对照组， 其中男20例， 女17例， 年龄33～79岁， 平均年龄（55.91±8.09）岁。

两组研究对象一般资料对比差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 两组研究对象均采取DNA进行检测， DNA样本来源于检测对象外周静脉血液3 ml， 并使用常规肝素进行抗凝处理， DNA提取方法主要采用酚/氯仿法。

1. 2. 1 ACE基因多态性检测 采用I/D多态性检测及分析方法：①获得DNA样本;②进行DNA基因扩增， 主要探究为ACE基因的第16内含子， 均使用P1、P2引物。获得反应总体系为25 μl。PCR扩增条件为：应在高温下进行， 设置温度为94℃， 需要在5 min进入循环， 预变性的时间应控制在5 min， 循环时需要在94℃变形1 min进行， 并且需要逐渐退火， 退火的时间应控制在1 min， 温度为58℃， 72℃下进行延伸， 延伸时间应控制为2 min， 共进行30个循环;③采集扩增后的产物进行琼脂糖凝胶中电泳分析， 采集剂量为

10 μl， 使用溴乙锭进行染色处理， 染色完成后， 使用标准分析量表进行对照。

1. 2. 2 AGT基因多态性检测 采用M235T多态性检测及分析：①采集DNA;②扩增AGT基因第2外显子;③采用与ACE基因I/D多态性检测相同方法， 进行检验及分析， 取扩增产物后6 μl， 并放置于聚丙烯酰氨凝胶中进行电泳分析， 与标准量表进行对照。

1. 3 观察指标 对比两组研究对象的ACE基因与AGT基因多态性检测结果。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组ACE基因多态性检测结果对比 实验组DD基因分布频率21.6%（8/37）高于对照组的5.4%（2/37）， 差异具有统计学意义（P<0.05）。两组患者ACE基因中的D等位基因频率、I等位基因频率对比， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 两组AGT基因多态性检测结果对比 实验组TT基因分布频率为43.2%（16/37）， 对照组为48.6%（18/37）， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。实验组患者AGT基因中的T等位基因频率、M等位基因频率对比， 差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

3 讨论

研究发现， 糖尿病肾病的发生与多种因素有关， 并不是单一的基因就能够导致糖尿病肾病的发生， 而是多基因遗传因素以及环境因素共同作用导致患者发生糖尿病肾病。糖尿病肾病发病早期患者肾脏的血流动力学会发生明显改变。血管紧张素转换酶是肾素-血管紧张素中的关键性因素， 在血管紧张素失去活性的状态下， C-末端水解会将2个氨基酸残基去除掉， 在ACE基因的指导下进行可产生血管紧张素Ⅱ， 对激动血管紧张素受体1产生刺激， 最终可引起患者出现血压升高、静脉收缩等现象， 同时可对醛固酮的合成和释放产生刺激作用， 利于钠离子的重吸收。同时由此可以判断出ACE基因的多态性与糖尿病肾病患者之间存在明显联系。

部分国外学者[6， 7]对ACE以及AGT基因多态性与糖尿病肾病之间的关系进行了更加深入的研究， 部分学者认为糖尿病肾病的发生与种族之间存在一定联系， 研究报告显示， 欧洲白种人ACE基因中I/D多态性与血浆ACE水平具有关联性， 是糖尿病肾病的危险因素， 而亚洲黄种人ACE基因I/D

多态性与糖尿病肾病之间亦存在诸多可能。

综上所述， ACE基因多态性与糖尿病肾病发病风险存在一定联系， ACE-DD 基因型为导致糖尿病肾病的危险因素。而 AGT-TT 基因型与糖尿病肾病无明显关系。可通过基因检测筛查， 判断具有相关高风险因素者， 可对其将来进行长期随访及健康管理干预， 从而降低发病率会有重要的指导意义。

参考文献

[1] 张倩， 田风胜. 糖尿病肾病凝血功能变化与心脑血管疾病关系的研究进展. 微循环学杂志， 2016（1）：69-71.

[2] 王强. 糖尿病肾病患者血清Cys C、Hcy和尿mindin、NAG含量检测及对疾病早期诊断的价值. 海南医学院学报， 2016， 22（10）：

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[3] 鄒汶兵. 前列地尔联合福辛普利治疗糖尿病肾病蛋白尿的临床疗效及安全性评价. 中国临床药理学杂志， 2016， 32（1）：18-20.

[4] 梁虹， 高海娥， 李飞， 等. 糖尿病肾病尿毒症患者尿路感染危险因素分析与预防. 中华医院感染学杂志， 2016， 26（5）：1056-1058.

[5] 杨雅芸， 高国生. 2型糖尿病肾病患者血清血管紧张素转换酶活性检测及其意义. 中国卫生检验杂志， 2016（12）：1717-1719.

[6] Qiao YC， Wang M， Pan YH， et al. The relationship between ACE/AGT gene polymorphisms and the risk of diabetic retinopathy in Chinese patients with type 2 diabetes. Journal of the renin-angiotensin-aldosterone system： JRAAS， 2018， 19（1）：147032031775295.

[7] Aggarwal N， Kare PK， Varshney P， et al. Role of angiotensin converting enzyme and angiotensinogen gene polymorphisms in angiotensin converting enzyme inhibitor-mediated antiproteinuric action in type 2 diabetic nephropathy patients. World Journal of Diabetes， 2017， 8（3）：112-119.

[收稿日期：2019-04-25]