不同月龄巴杜公猪精液品质分析

王 洋，曾智杰，葛长利，邱 阳，朱先利，唐 政，张泽楠，周 荣，李 奎，陈其美*

（1.山东蓝思种业有限公司，山东日照 276800；2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193）

在实际生产活动中，种公猪的精液品质对母猪配种效率、母猪妊娠率、产仔数、仔猪断奶成活率、断奶体重和生产性能均有不同程度的影响，高品质的公猪精液往往决定着人工授精母猪的受精率和产仔数[1-3]。我国猪人工授精技术在生产实践中经过多年的不断发展改进，在精液采集、保存、检测等方面形成了一套规范的操作程序，并被广泛应用[4-5]，在这个过程中种公猪精液品质的检测必不可少。

以巴克夏猪为父本，杜洛克猪为母本培育的杂交F1代，即巴杜猪，有生长速度快、肉质好、饲料利用率高等优点，具备良好的发展前景和经济效益。本研究选择30 头8～36 月龄巴杜种公猪，分析采精量、精子密度、精子活率和畸形率等指标随月龄的变化趋势，确定生产效果最佳的精子所对应的种猪月龄，为今后猪场人工授精工作提供参考，同时有助于提高种公猪精液利用率，进而提高猪场的繁殖效率和经济效益。

1 材料与方法

1.1 实验动物 种猪来源于山东蓝思种业股份有限公司，按月龄分组，分别为8～12、13～18、19～24、25～30、31～36 月龄巴杜种公猪各6 头，全部为生产中正常利用的繁殖群种公猪，饲养管理条件相同，实验公猪全部单栏饲养，自由饮水，每天人工喂料 2 次，按照猪场常规程序进行保健，并定期消毒。

1.2 实验仪器与试剂 RCZ-200G 精子分析仪（上海精密仪器仪表有限公司）、XSP-8CA 显微镜（上海光学仪器六厂）、XMTX2112 数显恒温电热板（常州奥华仪器有限公司）、电子秤（精度1%）、电热恒温培养箱（青岛海康畜牧器械有限公司）、水浴锅、SZ-93A自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）、温度计（30 cm）、采精杯、全能建Z 精液稀释粉（中牧南京动物药业有限公司）、精液稀释瓶、塑料烧杯（1 L）、量筒（500 mL）、盖玻片、载玻片、输精瓶、瓶盖、一次性输精管、PE 手套、滤纸、卫生纸、橡皮筋。

1.3 精液采集及检测

1.3.1 采精 种公猪每隔3 d 采精1 次，每天上午采精，用集精杯采精，对采集的精液用 4～6 层消毒纱布进行过滤，去除胶状物。

1.3.2 精液品质检查 采精结束后立即进行精液品质检查，检查项目主要包括精液量、颜色、气味、精子密度、精子活率和畸形率，整个检查过程要迅速、准确，10 min 内完成，最后详细填写《公猪采精登记表》。

用精确度0.1 g 天平称称取原精液重量，并用重量表示采精量。

精子活率运用光学显微镜，人工评级。用移液器取50 μL 稀释好的精液滴于预热的载玻片上，加盖20 mm×20 mm 的盖玻片，在400 倍光学显微镜视野下，分别对2 个视野中精子的运动状态进行观测，并采用10 级评分标准打分，直线前进运动的精子为100%者评为10级，90%者为9 级，以此类推，2 次计算平均值。

用上海精密仪器仪表有限公司开发的RCZ-200G型彩色精子质量分析仪进行精液及精子质量分析，检验精子密度和精子畸形率。

1.4 统计分析 采用Excel 软件整理所有数据指标，在SPSS 19.0 统计软件中用单因素方差分析进行数据统计，用平均值± 标准表示结果，Graphpad prism 6.0 作图。P＜0.05 表示差异显著，P>0.05 表示差异不显著。

2 结果

2.1 月龄对巴杜公猪采精量的影响 如图1 所示，巴杜种公猪在8～12 月龄采精量较少，平均每次采精量约为187.10 g，低于其他各月龄（P＜0.05）。13～24 月龄种公猪采精量有明显上升趋势，其中19～24 月龄种公猪的采精量最高，高于其他各月龄（P＜0.05），平均每次采精量约为256.73 g，处于采精量高峰期。24 月龄之后采精量开始有所下降，但仍然保持较高水平。

图1 不同月龄巴杜公猪采精量的变化

2.2 月龄对巴杜公猪精子密度的影响 如图2 所示，8～12 月龄种公猪平均每毫升精液中约有476.03×106个精子，低于其他各月龄（P＜0.05）。13～24 月龄巴杜种公猪精子密度有明显上升，19～24 月龄平均每毫升精液中约有565.95×106个精子，精子密度达到最大，显著高于其他各月龄（P＜0.05）。24 月龄后精子密度开始下降（P＜0.05），31～36 月龄种公猪平均每毫升精液中约有513.80×106个精子，下降到13～18 月龄水平。

图2 不同月龄巴杜公猪精子密度的变化

2.3 月龄对巴杜公猪精子活率的影响 如图3 所示，8～12 月龄种公猪平均精子活率约为86.22%，低于其他各月龄（P＜0.05）。13～24 月龄巴杜种公猪精子活率明显上升，其中19～24 月龄平均精子活率达到92.20 %，高于其他各月龄（P＜0.05），此阶段精子受精能力最强。随着公猪年龄的增长，精子活率逐渐下降，25～30月龄种公猪精子活率与19～24 月龄相比下降2.05 %（P＜0.05），31～36 月龄种公猪精子活率与19～24 月龄相比下降2.98 %（P＜0.05）。

图3 不同月龄巴杜公猪精子活率的变化

2.4 月龄对巴杜公猪精子畸形率的影响 如图4 所示，8～12 月龄种公猪平均精子畸形率约为9.87 %，高于其他各月龄（P＜0.05）。13～24 月龄巴杜种公猪精子畸形率有明显下降。19～24 月龄精子畸形率降至 7.00 %，低于其他各月龄（P＜0.05）。24 月龄后精子畸形率逐渐上升，25～30 月龄种公猪精子畸形率与19～24 月龄相比上升0.47 % (P＜0.05），31～36 月龄种公猪精子畸形率与19～24 月龄相比上升1.80 % (P＜0.05 ）。

3 讨 论

图4 不同月龄巴杜公猪精子畸形率的变化

公猪精液品质是衡量公猪繁殖力和公畜效应的代表性指标，在猪遗传改良中起着决定性作用，公猪精液品质的好坏直接影响到后代的数量、质量以及猪场的生产效益[6]。种公猪精液品质受多种因素共同影响，其中与初配年龄及公猪使用年限有很大关系。如果青年公猪过早参与配种，不仅会影响自身的生长发育，导致产仔数减少，所产仔猪体质较弱，还会使公猪使用年限缩短。王黎等[7]研究发现，13～18、25～30 月龄的巴杜种公猪精液品质相对较好，种公猪的精液品质会随着公猪月龄的增加呈现规律性变化，公猪性成熟之后，射精量、精子密度和精子活率会逐渐增加，畸形率会逐渐减少，壮年之后，射精量、精子密度和精子活率会逐渐减少，畸形率会逐渐增加。这与玉荣等[1]的研究结果不一致，其对杜洛克、大白和长白3 个品种猪不同月龄种公猪精液品质研究发现，3 个品种猪精子活率均在8～12 月龄最强。而Leman 等[8]研究表明，种公猪从发情期开始，采精量和精子数会随着年龄的增加而增加，18 月龄左右达到最高，之后一直维持在较高水平。

本研究发现，19～24 月龄巴杜种公猪精液品质最佳，在采精量、精子密度、精子活率方面均显著高于其他各月龄，且精子畸形率显著低于其他月龄，在这一时间段内进行配种或用这一月龄段的种猪精液进行人工授精，母猪的受胎率相比其他阶段而言明显增加，返情率也大大减少。因此建议用于核心育种的巴杜公猪月龄不低于一岁半，不超过两年，除个别生产性能特别优秀的个体外，在实际生产活动中人工授精公猪月龄超过3年可考虑淘汰。此外，8～12 月龄精子品质各项指标均优于最低使用标准，例如精子活率高达86.22%（高于70%），畸形率为9.87%（远远小于17%），因此8 月龄巴杜公猪可开始尝试初配，最初几次精液品质可能不太稳定，但一段时间后将趋于正常。本实验结果对种公猪人工授精工作有一定的参考作用，有益于猪人工授精技术的顺利推广。