5-羟色胺、c-Fos蛋白及慢性心理应激对少数民族地区人群不良情绪的影响▲

曾 烜 付培培 林秀金 张盛洁 潘玉立 陈凤兰 吴俊端

(1 广西医科大学公共卫生学院，南宁市 530021，电子邮箱：614659314@qq.com；2 广西柳州市妇幼保健院儿童群体保健科，柳州市 545001；3 河南省漯河市中心医院心理卫生科，漯河市 462000)

应激是指机体对各种内外环境因素刺激做出的非特异性反应[1]。应激过强或者长时间处于应激状态，会对身心造成不良影响。目前多项研究表明，慢性心理应激可增加心血管疾病、癌症、抑郁症、焦虑症、创伤后应激障碍等疾病的发生风险[2-5]。慢性心理应激还会导致下丘脑-垂体-肾上腺轴、自主神经系统和5-羟色胺系统功能紊乱[6]。5-羟色胺系统参与情绪、食欲、睡眠、认知等的调节，血清5-羟色胺含量与抑郁、焦虑有关[7-9]。c-Fos是一种即刻早期基因，c-Fos蛋白被广泛应用于标记应激条件下激活的神经元群[10]。动物实验研究表明，心理应激会导致不同脑区的c-Fos表达增强[11]。由于特殊的文化和社会背景，少数民族地区居民的应激水平和情绪状态通常不同于一般人群[12]。目前，有关5-羟色胺与c-Fos蛋白对少数民族地区人群慢性心理应激和情绪影响的研究较少。故本研究选择广西少数民族地区人群为研究对象，探讨血清中5-羟色胺、c-Fos蛋白及慢性心理应激对其不良情绪的影响，并研究两种血清学指标在慢性心理应激与不良情绪之间的作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究采取随机整群抽样方法，在广西南丹县的少数民族聚集地里湖乡、八圩乡，采用随机数表法分别抽取其中一个村落，选择留守家中的共426名村民作为研究对象。研究对象纳入标准：(1)年龄≥18岁；(2)户籍为广西南丹县；(3)自愿参加本研究。排除标准：(1)有严重精神疾病史；(2)有严重慢性病史；(3)未签署知情同意书；(4)存在残疾或其他无法配合调查的疾病。本研究共发放问卷426份，回收有效问卷366份，有效率85.9%，最终纳入研究对象366名。本研究获广西医科大学医学伦理委员会批准，所有研究对象均在调查前签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 调查工具：(1)一般情况调查表，调查项目包括性别、年龄、民族、文化程度、经济状况、婚姻状况等一般情况。(2)生活事件量表(Life Event Scale，LES)[13]，用于评估心理应激的程度。该量表共50个条目，包括家庭生活、工作学习和社交等方面，另设有两条空白项目用于填写补充以上未涉及的事件。量表总得分越高代表个体所承受的心理应激越大。(3)简化症状自评量表[14]，该量表由唐峥华在90项症状自评量表基础上进行的改编，量表的 Cronbach α系数为 0.917，具有良好的信效度。量表包括焦虑、躯体化、抑郁和敌对4个因子，均采用5级记分法进行评分，选项从“无”到“严重”，分别记1～5分，得分越高说明心理症状越严重。根据研究目的，本研究只选取其中的焦虑和抑郁两个因子来分析研究对象的不良情绪。

1.2.2 质量控制：调查员为心理学相关专业的研究生和老师，并聘请当地卫生院工作人员协助调查。所有工作人员在调查前均经过课题组的统一培训。在调查对象签署知情同意书后，由调查员进行一对一的调查。回收问卷时由调查人员进行检查，排除无效问卷，其中无应答率>5%为无效问卷。

1.2.3 血清5-羟色胺、c-Fos蛋白水平的测定：调查当天早晨，由卫生院工作人员采用非抗凝管现场抽取调查对象空腹静脉血5 mL，低温冷藏保存。当天调查结束后，实验人员将血样带回当地实验室，3 000 r/min离心5 min，取血清，置于-20℃冰箱保存待测，所有样本均在1个月内完成检测。采用酶联免疫吸附测定5-羟色胺、c-Fos蛋白含量，试剂盒均购自武汉华美生物工程有限公司(批号：CSB-E08363h、CSB-E09261h)，操作过程均严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学分析 采用EpiData 3.1软件对调查结果进行双录入并建立数据库。采用SPSS 21.0进行统计分析。计量资料以(x±s)表示，计数资料以例数或百分比表示；连续变量的关联性分析采用Pearson相关和多元线性回归分析，采用PROCESS插件中的Bootstrap方法检验中介效应[15]。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 调查对象的人口社会学特征 366名研究对象年龄(50.03±15.35)岁；汉族111名(30.3%)，壮族124名(33.9%)，白裤瑶族131名(35.8%)；男性138名(37.7%)，女性228名(62.3%)；未婚14名(3.8%)，已婚322名(88.0%)，离婚或丧偶30名(8.2%)；文盲/半文盲108名(29.5%)，小学文化程度158名(43.2%)，初中文化程度84名(22.9%)，高中及以上文化程度16名(4.4%)；家庭人均月收入0～499元225名(61.5%) ，500～999元79名(21.6%)，1 000元及以上62名(16.9%)。

2.2 c-Fos蛋白、5-羟色胺和LES总分与不良情绪的相关性366名研究对象的5-羟色胺水平为(281.57±18.15)pg/mL，c-Fos蛋白水平为(223.34±31.47)pg/mL，LES总分为(25.23±9.56)分，抑郁因子得分为(1.43±0.57)分，焦虑因子得分为(1.45±0.56)分。5-羟色胺水平与LES总分、抑郁因子得分和焦虑因子得分均呈负相关(均P<0.05)，血清中c-Fos蛋白水平与焦虑因子得分和抑郁因子得分呈正相关(均P<0.05)，LES总分与焦虑因子得分和抑郁因子得分呈正相关(P<0.05)。见表1。

表1 5-羟色胺、c-Fos蛋白和LES总分与不良情绪的相关性

2.3 LES总分、5-羟色胺水平和c-Fos蛋白水平对不良情绪的影响 基于相关分析的结果和研究目的，以LES总分、5-羟色胺水平、c-Fos蛋白水平为自变量，以抑郁因子得分和焦虑因子得分为因变量，分别进行多元线性回归分析(回归方法采用“进入”法，默认进入模型的概率为0.05，剔除的概率为0.1)。结果显示，抑郁因子得分的回归方程模型为Y=4.513-0.013×5-羟色胺+0.002×c-Fos+0.007×LES(F=76.876、R2=0.389、P<0.001)；焦虑因子得分的回归方程模型为Y=5.509-0.014×5-羟色胺+0.006×LES(F=76.390、R2=0.388、P<0.001)。5-羟色胺对抑郁具有负向预测作用，c-Fos蛋白水平与LES总分对抑郁具有正向预测作用，且三者共同解释抑郁情绪变异的38.9%；5-羟色胺对焦虑具有负向预测作用，LES总分对焦虑具有正向预测作用，且两者共同解释焦虑情绪变异的38.8%。见表2。

表2 LES总分、5-羟色胺和c-Fos蛋白对不良情绪的多元线性回归分析结果

变量焦虑因子得分偏回归系数标准误标准偏回归系数t值 P值R2值5-羟色胺水平-0.014 0.001-0.464 -10.000 <0.0010.296c-Fos水平0.0010.0010.0751.829 0.0680.296LES总分0.0060.0010.3047.152<0.0010.388

2.4 5-羟色胺水平和c-Fos蛋白水平在心理应激与不良情绪之间的中介效应检验 根据相关分析结果和多元线性回归分析结果，结合现有的理论知识，我们假设5-羟色胺和c-Fos蛋白水平在心理应激与不良情绪间起中介效应。运用Bootstrap法检验中介效应[15]。结果显示，5-羟色胺中介模型的直接效应和间接效应的95%CI均不与0相交，说明5-羟色胺在心理应激与不良情绪之间存在中介效应，其中5-羟色胺与抑郁和焦虑情绪的中介效应分别为0.002 0、0.002 2；而关于c-Fos蛋白中介模型的间接效应的95%CI包括0，说明c-Fos蛋白在心理应激与不良情绪之间不存在中介效应。见表3。

表3 中介效应显著性检验结果

3 讨 论

当心理应激超过个体承受能力时，会对身心造成负面影响。研究表明，心理应激与抑郁症和焦虑症相关[2，4]。LES总分可反映慢性心理应激的大小，本研究中，LES总分与抑郁和焦虑因子得分均呈正相关，且多元线性回归分析结果显示LES总分可正向预测抑郁和焦虑情绪(均P<0.05)。这提示慢性心理应激与焦虑、抑郁等不良情绪密切相关，慢性心理应激越强，负面情绪可能越严重。因此减少不良生活事件的发生有利于个体心理健康，减少抑郁和焦虑情绪。

有学者利用慢性不可预计温和应激法建立大鼠抑郁动物模型组，在刺激大鼠8周后，大鼠的大脑和血浆 5-羟色胺含量显著下降[16]。还有学者发现，在慢性足底电刺激构建的焦虑模型小鼠中，血清多巴胺、去甲肾上腺素和5-羟色胺的水平均下降[11]。本研究结果显示，5-羟色胺水平与LES总分、抑郁因子得分和焦虑因子得分均呈负相关，且对抑郁和焦虑具有负向预测作用(均P<0.05)。这与上述研究结果相似，表明慢性心理应激可能会影响5-羟色胺系统，且抑郁和焦虑情绪可能与5-羟色胺水平的下降有关。由此推测，5-羟色胺在生活事件与抑郁和焦虑情绪之间可能起到中介作用。本研究的中介效应检验结果亦显示，5-羟色胺在慢性心理应激与抑郁及焦虑情绪之间起中介效应(P<0.05)，证实了上述推测，这提示少数民族地区人群5-羟色胺水平受慢性心理应激的影响，其5-羟色胺水平通常情况下处于稳态平衡，但当应激过强或者持续时间过长时，5-羟色胺系统功能紊乱，水平下降。其机制可能为：心理应激可激活机体的免疫系统，从而释放出大量的细胞因子，外周的细胞因子信号到达中枢，影响5-羟色胺的合成、释放和重摄取[17]；应激还会导致下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进，神经内分泌系统紊乱，影响机体的5-羟色胺水平[18]；5-羟色胺系统能调节认知和情绪[7]，故当机体5-羟色胺不足时，认知和情绪都会受到影响，认知功能下降可能会进一步加重抑郁和焦虑的情绪。同时这也提示5-羟色胺可能是慢性心理应激引起不良情绪的保护因素，根据机体血清5-羟色胺水平的下降程度可以判断机体的应激程度，这对减轻不良情绪有重要意义。

此外，应激可诱导c-Fos蛋白的表达[10]。本研究结果亦显示，血清c-Fos蛋白水平与焦虑因子得分和抑郁因子得分呈正相关，且回归分析结果显示其对抑郁具有正向预测作用(均P<0.05)。有动物实验表明，慢性应激抑郁模型大鼠的额叶皮质神经源性一氧化氮合酶和c-Fos阳性神经元表达较正常大鼠增加[19]。还有学者发现，电针可通过降低缰核中c-Fos的表达而改善抑郁模型大鼠的行为异常[20]。这些均提示c-Fos蛋白可能参与抑郁情绪的调控。然而目前关于这方面的证据主要来源于动物实验，尚缺乏外周血c-Fos蛋白水平与抑郁关系的研究。为进一步验证本研究的结果，后续我们需要进一步扩大研究样本量。

综上所述，血清5-羟色胺、c-Fos蛋白水平及慢性心理应激与少数民族地区人群抑郁焦虑情绪之间紧密关联，其中5-羟色胺和c-Fos蛋白表达可能参与了少数民族地区居民的慢性心理应激调控，其水平变化可以作为预测抑郁和焦虑情绪的生物学指标，而5-羟色胺在少数民族地区人群慢性应激与不良情绪间起中介效应。但本研究样本量相对较少，未纳入足够的不良情绪影响因素进行分析。今后仍需增加样本量，并纳入遗传、应对方式、性格特质等更多的影响因素以进一步验证本研究结论。