不同厂家独活饮片中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯的含量比较

王卫钢，黄丽杰，崔燕贞，岳 磊，刘娜娜，辛易霖

(1.周口市食品药品检验所，河南 周口 466000；2.郑州市食品药品检验所，河南 郑州 450000)

独活为伞形科植物重齿毛当归AngelicapubescensMaxim.f.biserrataShan et Yuan的干燥根[1]。性味辛、苦，微温，归肾、膀胱经。具有祛风，除湿，散寒，止痛之功效，是治疗风寒湿痹，腰膝酸痛，风湿性关节炎，风寒头痛等症的传统用药[2]。独活的来源主要为栽培品，在重庆、湖北、陕西等地广泛种植[3]。2015年版药典中以蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯作为独活质量控制的主要指标[4]。蛇床子素具有抗肿瘤活性[5]。现代研究表明二氢欧山芹醇具有抑制血小板聚集、抗脂质过氧化等作用[6]。本实验拟比较不同饮片厂家的独活饮片中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯两种成分的含量，为评价和合理应用独活饮片提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1260高效液相色谱仪，DVD检测器(美国安捷伦科技有限公司)；XS205电子分析天平(METTLER)；RT-01型粉碎机(浙江温岭市大海药材器械厂)；KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试剂与试药

乙腈、甲醇(Merck公司，色谱纯)；哇哈哈纯净水。阿莫西林对照品(批号：130409-201512，含量以86.9%计，中国食品药品检定研究院)；蛇床子素对照品(批号：110822-201710，含量以99.5%计，中国食品药品检定研究院)、二氢欧山芹醇当归酸酯对照品(批号：111583-201605，含量以98.6%计，中国食品药品检定研究院)；独活饮片见表1。

2 实验方法

2.1 色谱条件

色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl Analytical(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为乙腈-水(49∶51)；检测波长为330 nm。

2.2 供试品溶液的制备[1]

取各批次的独活饮片适量，粉碎并过三号筛，取约0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入20 mL甲醇，密塞，再次称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，并用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液3 mL，置20 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取蛇床子素对照品15 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。精密称取二氢欧山芹醇当归酸酯对照品10 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置20 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

3 实验结果

分别精密吸取两种对照品溶液和供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，按外标法计算含量。色谱及结果如图1-图4及表1所示。

图1 蛇床子素对照品色谱

图2 二氢欧山芹醇当归酸酯对照品色谱

图3 编号01样品色谱

图4 10批样品总色谱

表1 饮片来源及含量测定结果

4 讨论

现商品独活种类比较混乱，其原植物有15种以上[7]。独活在我国分布较广，药材因产地分布、性状差异而形成不同的商品独活，其药材质量差异较大[8]。且可能由于种植技术、采收时间以及初加工方法等因素的差异[9]，致使不同批次独活饮片中化学成分在含量上存在差异。独活中主要含有香豆素类、挥发油类，以及少量甾醇和糖类等成分[10]。独活中香豆素类化合物达十余种[11]，主要有蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯、欧前胡素、异欧前胡素等。且香豆素类成分是评价独活质量的重要指标之一。

2015年版药典收载独活含量测定项下有蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯两个指标成分，由本实验可知，两个化合物含量均较高，且本实验中10批次饮片中所测得的两种化合物含量均高于药典规定的限度，编号07和09中的饮片中二氢欧山芹醇当归酸酯含量较高，编号02和03中的则较低，但均高于药典规定限度。编号02和03中的蛇床子素含量较高，编号07中的则相对较低，但均高于药典规定限度。结果表明，不同厂家独活饮片中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯含量均符合药典药用标准，且两种成分含量存在差异，含量的高低与厂家无关，蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯两种成分之间的含量高低无相关性。中药材由于产地分布、温湿度等条件的影响而在质量上存在差异，规范化种植，建立独活GAP种植基地，确定统一的种植和采收时间、加工方法，使独活饮片的生产更加标准化，更能为独活饮片的科学、合理、安全使用提供保障。