高效液相色谱法同时测定黄瓜中吡虫啉和多菌灵残留量

张斌

【摘   要】 高效液相色谱法同时对黄瓜中吡虫啉、多菌灵两种农药进行残留分析。用乙腈提取， 1：25～1：10之间4种体积比的甲醇：二氯甲烷淋洗，氨基柱净化，紫外检测器分析。试验结果吡虫啉回收率为78.1%～93.5%;多菌灵回收率为72.1%～92.3%。该方法准确度达到定量分析要求。

【关键词】高效液相色谱法;黄瓜;吡虫啉;多菌灵

吡虫啉英文通用名为imidacloprid，化学名称是l-（6-氯吡啶-3-基甲基） -N-硝基亚咪唑烷-2-基胺。吡虫啉属烟碱类杀虫剂，杀虫谱广，高效低毒，对刺吸式口器害虫有很好的防治效果[1-2]。

多菌灵英文通用名为 carbendazim，化学名称是苯并咪唑-2-基氨基甲酸甲酯。多菌灵属苯并咪唑类杀菌剂 [3]，杀菌谱广，对多种作物由真菌引起的病害有很好的防治效果 [4-5] 。吡虫啉、多菌灵是黄瓜种植中常用农药。

1  材料与方法

1.1  材料

吡虫啉、多菌灵标准品，农业部环境保护科研监测所、100μg/mL;乙腈、甲醇：DIKMA HPLC Grade;丙酮：TEDIA、HPLC/Spectro;二氯甲烷、氯化钠：国药集团化学试剂公司、AR;固相萃取柱：Agilent Technologies、NH2、6CC;针式滤器：天津津腾、有机相、0.22μm;水：娃哈哈饮用纯净水。本地黄瓜。

1.2  仪器与装置

高效液相色谱仪： SHIMADZU 、LC-20AD;检测器：紫外、SPD-20A;电子天平 ：METTLER TOLEDO 、PL203;恒温水浴锅：金坛医疗仪器厂、HH-S4;搅拌机：飞利浦、HR2096;真空泵：Thermo scientific  AIR CADET;漩涡混合器：vortex-5;高速分散机：IKA 、T18BS25;瓶口分液器：BRAND、dispensette;氮吹仪：TTL-DCⅡ;固相萃取装置：Agilent Technologies、6×2。

1.3  方法

1.3.1  添加农药标准品    黄瓜样品切碎混匀，搅拌机粉碎，制成待测样。称取待测样35.0g于300mL三角瓶中，添加吡虫啉、多菌灵标准品4℃过夜。

1.3.2  提取    三角瓶中加入70.0mL乙腈，高速匀浆1min后过滤纸抽滤，滤液倒入100mL具塞量筒中，加入5～10g氯化钠，盖上盖子，剧烈震荡1min，静置20min分层。吸取10mL上层溶液于100mL烧杯中，60℃水浴蒸发近干。

1.3.3  净化    配制体积比为1：30的甲醇：二氯甲烷淋洗液，吸取3.0mL于上步近干烧杯中，备用。

将氨基柱用3.0mL淋洗液活化后加入备用液，10mL塑料离心管收集，再在烧杯中加入3mL淋洗液过柱，并重复一次。收集三次溶液，氮吹近干，甲醇定容至5.0mL，漩涡混合器混合后，过0.22μm针式滤器装进样瓶，待测。

再配制4种体积比淋洗液，重复1.3.3中前两段步骤，结果如表1。

1.3.4  仪器条件    色谱柱：SGE C18 ENDURO 250mm×4.6mm 5μm;柱温：40℃;检测波长：270 nm;进样量：10μL;流速：0.8mL/min;流动相：甲醇+水，梯度洗脱;外标法定量。

1.3.5  标准曲线绘制    甲醇分别稀释吡虫啉、多菌灵标准品，得浓度为 0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL的标准溶液，作标准曲线。回归方程及相关系数见图1。

2  讨论

根据农业部公告2386号，添加水平在0.1mg/kg ～1 mg/kg时，回收率要求范围为70℅～110℅。由表1可知，体积比为1：25、1：20、1：15、1：10的甲醇：二氯甲烷溶液淋洗，吡虫啉在三个添加浓度下回收率为78.1%～93.5%，多菌灵为72.1%～92.3%，且检测结果没有显著差异。可推知用体积比1：25～1：10的甲醇：二氯甲烷溶液淋洗，回收率、准确度符合要求。本方法适用于黄瓜中吡虫啉、多菌灵的残留分析。

参考文献：

[1] 董国政，杨俊诚，姜慧敏，等.吡虫啉和多菌灵单施及同时施用对番茄生长的影响[J].农业环境科学学报，2012，31（4）：645-653.

[2] 王明明，龚艳，陈浩，等.吡虫啉在番茄中的残留动态及残留去除方法[J].食品科学，2010，31（19）：133-136.

[3] 郑志琴，魏朝俊 ， 张志勇，等.多菌灵在草莓与土壤中的残留动态研究[J].农业环境科学学报，2010，29（10）：1948-1952.

[4] 刘丽英 ， 李桂荣 ， 刘丽华，等.高效液相色谱测定甘蓝中多菌灵残留分析方法[J].农药科学与管理 2006，27（7）：15-17.

[5] 王玉健，黃惠玲，禤开智，等.超高效液相色谱-串联质谱测定多种食品中抑霉唑、嘧霉胺、克百威、三唑磷、多菌灵的残留量[J].分析试验室，2011，30（5）：77-80.