常见肉制品中瘦肉精含量的快速检测

摘要：本次实验主要以克伦特罗为研究对象，用胶体金免疫层析法对市场上比较常见的肉制品进行克伦特罗含量的快速检测，根据检测结果互相对比来评估市售胶体金检测卡的性能质量，对它们的重复性、稳定性、假阳性率、假阴性率等进行评价。

关键词：克伦特罗;胶体金免疫层析法;快速检测;质量评估

克伦特罗于1964年在美国初次面世，而是一种人工合成的β2肾上腺素受体激动剂，作为一种呼吸系统药物临床用于治疗哮喘。在20世纪80年代初，美国一家公司无意间发现当家禽摄取克伦特罗高出临床5-10倍的用量时，能促进动物生长，强健肌肉，可显著提高瘦肉率，于是盛行一时，被大量用作畜禽的促生长剂和饲料添加剂。但是人们很快发现，克伦特罗对人体有害。当人类大量或长期食用克伦特罗残留超标的肉制品后，会出现头发晕、心慌、四肢出现发麻、肌肉出现震颤等中毒症状，严重的会出现心脏骤停、昏迷甚至死亡。

目前，“瘦肉精”类药物国家标准检测方法主要包括气相色谱-质谱法（GC-MS）、高效液相色谱法（HPLC）、毛细管区带电泳法（CE）和免疫分析法等。其中GC-MS法能够在多种残留物同时存在的情况下对某一种特定的残留物进行定量检测，且检测灵敏度高、假阳性率低，被国家认定为检测克伦特罗的确证性方法。但是这种方法也有一定的局限性，需要花费大量的时间处理样品、检测过程比较繁琐且需要专业技术人员操作实验仪器，不利于现场快速检测。毛细管区带电泳法（CE）重复性好、上样量极少、操作简单，能够快速批量分离和分析離子化样品，但该方法检测时间长，仪器复杂，需要配套的仪器才可以检测，现阶段使用范围不广。胶体金免疫试纸条技术应用于检测克伦特罗残留量方面，耗时短，操作简单，产品价廉，可以快速的检测样品。

1 材料与方法

1.1实验材料

1.2克伦特罗含量的检测

用电子天平准确称取1g猪肝，用洁净的剪刀将猪肝剪成碎块，放入手动玻璃匀浆器中，加入2mL提取液，充分匀浆后，13000rmp离心4min，取上清;再加入2mL提取液，二次提取，13000rmp离心4min，合并两次上清，用NaOH溶液调节PH至7.0，13000rmp离心4min，取上清液待检。

待检样品准备好后，将胶体金检测卡从包装袋中取出，用记号笔分别为检测卡编号。将检测卡编号后，摆放于实验台面上，用微量移液枪吸取待检上清液80uL加入益穗环保检测卡S孔内，5分钟读取实验结果。用微量移液枪吸取待检上清液100uL加入浩谱尔检测卡和艾维德检测卡S孔内，10分钟读取实验结果。

1.3 试纸条稳定性测试

提前6个小时将三个公司的胶体金检测卡分别在美的冰箱和数显鼓风干燥箱各放入四张，并将数显鼓风干燥箱温度设置为37℃。待检样品准备好后也分别放入冰箱和烘箱内一段时间，等待测样品升温至环境温度时，将检测卡取出，迅速编号，编号见表2.2。编号后，摆放于实验台面上，用微量移液枪吸取待检上清液80uL加入益穗环保检测卡S孔内，5分钟读取实验结果。用微量移液枪吸取待检上清液100uL加入浩谱尔检测卡和艾维德检测卡S孔内，10分钟读取实验结果。

2 结果

通过实验结果显示武汉市大花岭菜市场购买的猪肉、猪肝不含有克伦特罗;双汇集团生产的双汇肉花肠中也不曾检测出克伦特罗。三种检测卡的灵敏度都为3ug/kg（ppb），且都不曾检测出阳性样品，但也不能保证此次检测的样品中绝对不含克伦特罗，因为胶体金检测卡只能定性分析，作为初次筛选的凭证，可能会存在假阴性样品，对有疑问的样品还需用气相色谱-质谱法进行确证。

益穗环保、浩谱尔、艾维德这三家生产克伦特罗胶体金检测卡的公司生产的产品品质稳定，且抗逆性比较不错，能在较为恶劣的环境温度下正常使用。不同公司生产的胶体金检测卡质量参差不齐，在检测时，检测线和质控线显色的先后顺序不同，益穗环保公司生产的胶体金检测卡先显C线再显T线，而浩谱尔公司和艾维德公司生产的胶体金检测卡先显T线再显C线。根据竞争抑制法原理，应是检测线T线先显色，然后质控线C线才显色。

参考文献：

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[2]范瑞环，罗英娇，周森松，黄柳明，钟蕴珠.浅谈基层如何进行猪“瘦肉精”残留检测[J].广东畜牧兽医科技，2014，01：23+27.

[3]卢明艳，何雷堂，马瑞林，郑丽敏，刘海琴.“瘦肉精”检测卡（试纸条）质量验证试验[J].饲料工业，2011，21：46-48.

作者简介：

韩端丹（1980-）女，研究方向：生物技术与生物制药