高效液相色谱在中药研究中的应用

莫愁

摘要：高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是在本世纪60年代末期，在经典液相色谱法和气相色谱法的基础上发展起来的新型分离分析技术，它具有快速、高效、灵敏、准确等优点，在医药卫生、食品、环保等各个领域已得到了广泛的应用。本文主要分析探讨了高效液相色谱在中药研究中的应用情况，以供参阅。

关键词：高效液相色谱;中药;应用

引言

高效液相色谱技术是一种重要的分离分析方法，于20世纪60年代末在经典液相柱色谱的基础上引进气相色谱的理论与技术，采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度的检测器并加以改进而发展形成。HPLC可分析高沸点、难挥发和对热不稳定的化合物，离子型化合物和高聚物乃至生物大分子等物质。HPLC具有分离效能高、分析速度快、灵敏度高、色柱可反复使用、流动相可选择范围宽、流出组易收集、操作自动化、适用范围广和安全的优点。

1高效液相色谱在中药研究中的应用

1.1在中药含量测定方面的应用

中药材及中成药的成分十分复杂，其有效成分不一，对不同药物，其活性成分可能是单一的，也可能有多种成分共同作用，这就对控制药品质量提出了较高的要求。传统的薄层色谱分析方法在精密度，准确度和重现性方面都不能满足中药现代化的需求。高效液相色谱法以其建立含量测定方法简便易行、结果准确可靠、重现性好、便于对各类药物进行质量控制等众多优点，逐渐成为中药材及各类制剂含量测定的首选方法。段启等采用高效液相色谱法测定不同产地栀子中藏红花素的含量所建立的方法，为中药栀子的质量评价提供了科学依据。在中成药制剂方面，黄权芳等建立的壮药清热颗粒中木犀草素的含量测定方法，加样回收率较高，重现性好，为其质量控制标准化提供了参考资料。阮桂平等建立的HPLC可同时测定珠黄吹喉散中两种有效成分儿茶素和盐酸小檗碱的含量，可用于该制剂的质量控制。

1.2在中药指纹图谱中的应用

利用I-WLe技术进行中药的标准化，建立药材或中成药特征的色谱或光谱的图谱是一种有效的方法。如在对中药山茱萸药材的括紋图谱的研究中，采用相关系数法计算不同样品指纹图谱之问相似度，结果表明指纹图谱相似度大小与药材品质有关。

1.3在中药炮制中的应用

用化学分析方法来研究中药炮制机理是中药炮制研究的主要手段。近几年来，HPLC法在中药炮制研究中的应用也有很大发展。贾天柱等采用高效液相法对肉豆蔻及其炮制品挥发油中肉豆蔻醚、黄樟醚进行了测定。此法快速、准确地证明肉豆蔻醚在炮制后有不同程度的降低，从而使毒性降低，阐明了炮制机理。赵淑杰等用HPLC法测定栀子产地加工炮制品酶解前后栀子甙含量，证明栀子经蒸气或沸水烫后，基本上起到了杀酶保甙的作用。王静竹等，用HPLC法测定黄芪炮制品中黄芪甲甙含量，结果发现，炮制对黄芪中黄芪甲甙含量的影响较大，从0.272mg/g～0.842mg/g不等，但总体上炮制品均比生品中黄芪甲甙的含量低。中医认为黄芪不同炮制品种，主治有所不同，可能的黄芪不同炮制过程中不同成分之间的消长及新成分的生成有关，这些还有待于进一步研究。傅梅红等用HPLC法测定关白附生品及不同炮制品中次乌头碱含量，结果表明姜矾煮、豆腐煮后次乌头碱下降率为98%，而蒸4h后次乌头碱下降率为100%，说明了炮制解毒的机理是使主要毒性成分含量下降，此测定也给炮制工艺改进工作打下了基础。此外，杨江丰等采用柱切换高效液相色谱法测定了五加皮酒中橙皮甙及齐墩果酸的含量，该方法通过对不同性能的色谱柱或不同流动相的选择，能有效地把复杂制剂中的有效成分得到良好的分离，也可用前柱的富集作用测定中药中微量活性物质或选择性地测定某个有效成分，为中药研究提供了一个很好的实验方法。

1.4在中药药物动力学中的应用

赵淑红等采用HPLC测定血浆药物浓度，采用SHIM-PACKVPODS色谱柱，流动相为甲醇乙腈水（5：10：85），检测波长为271nm，流速1.0Ml/min，用DAS软件计算药物动力学参数。通过此方法，研究了秦艽中龙胆苦苷在家兔体内的药代动力学规律并建立了家兔血浆中龙胆苦苷的HPLC检测方法。贾巍等用HPLC测大鼠血浆中红景天苷的浓度，色谱柱AlltimaC18柱（150mm×4.6mm，5m），流动相为甲醇水（20：80），柱温室温，流速1.0mL/min，检测波长275nm，应用WinNolin药物动力学软件处理实验数据，并探讨在大鼠体内红景天苷的药物动力学过程，研究为红景天的新药设计、剂型评价及临床应用提供了科学的依据。

2高效液相色谱在中药分析中的应用前景

中药研究的大趋势是全成分分析，通过对从单味药到复方的不同配伍、煎煮时间等的研究，才能发现中药中化学成分的变化规律，找到中药机理之间的有机联系。中药成分繁多，且各种成分的性质遍布所有极性段、酸碱范围。实现多成分分析的最简单途径即在一根足够长的色谱柱上，采用温和的流动相，在足够久的时间内洗脱。但这与现代分析要求的简便快速相违。通过大量的应用研究表明，高效毛细管电泳在分析中药成分，尤其在分析高极性化学成分方面有较大优势，在分析大量的复方制剂方面显示了较高的能力。由于毛细管几乎不会出现高效液相色谱分析中常出现的柱床污染现象，而且用过的毛细管柱只需很短的时间进行冲洗后，即可以进行第二个样品的分析，快速高效且分辨率很高。新兴的毛细管电色谱是集高效液相色谱和毛细管电泳优势于一身的一种新型电分离微柱液相色谱技术，它是将高效液相色谱的多种填料微粒移到毛细管中，以样品与固定相间的相互作用作为分离机制，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程。最近，一些先进的检测仪器成功的用在了高效液相色谱分析法上，使得高效液相色谱的应用更广泛，并充分利用高效快速、选择性好、灵敏度高等优点，建立更加系统的成分分析方法。通过与质谱联用、梯度洗脱、柱切换技术、配合先进的检测技术，以及与分子生物学、现代分子药理学相结合，必将在中药分析中发挥很大作用。

结束语

总而言之，HPLC是一种新兴的技术手段，与许多传统分析方法相比具有多方面的优势。目前，很多学者正致力于其在天然药物方面更为广泛的应用研究。相信随着科学技术的不断发展，HPLC必将药物研究领域展现更好的应用前景，日后也会有更多先进、快捷的分析方法不断涌现及更新。