胶体金法在检测肠道病毒71型IgM和柯萨奇病毒A16型IgM中的应用

韦冬明，罗园生，彭心华

吉安市妇幼保健院检验科 (江西吉安 343000)

手足口病是由于肠道病毒感染导致的常见传染性疾病，可致病的肠道病毒种类有20多种，主要是由被污染过的食物通过口腔进入到消化道，并进行大量增殖，多发于婴幼儿，表现为口痛、厌食、低热、手足口多部位出现小疱疹或溃疡等。虽然多数患儿在患病后可以自行康复，但也有小部分患儿出现心肌炎、肺水肿和无菌性脑膜炎等并发症，严重甚至死亡。肠道病毒71型IgM(EV71-IgM)和柯萨奇病毒A16型IgM(CA16-IgM)是引起手足口病最为常见的两种病毒，多存在于感染急性期。对这两个指标的检测有利于对手足口病的及时诊断和有效治疗。研究表明，胶体金法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法对EV71和CA16的检测均较为有效，但哪种方法效果更好尚无定论[1]。本研究旨在探讨胶体金法在检测EV71-IgM和CA16-IgM中的应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2017-2018年收治的400例手足口病患儿作为研究对象，男253例，女147例；年龄7个月至6岁，平均(4.49±2.46)岁；发病时间均在48 h内。患儿均符合卫生部发布的《手足口病诊疗指南(2010年版)》[2]的相关诊断标准；排除合并其他严重疾病的患儿。

1.2 方法

采集患儿的静脉血2 ml，放在含有分离胶的促凝管中进行离心操作，分离血清进行胶体金法检测，然后存放在4 ℃的冰箱中，在第2天进行ELISA法检测。

检测试剂及仪器：胶体金法采用北京万泰生物药业有限公司生产的抗EV71-IgM抗体检测板、抗CA16-IgM抗体检测板；ELISA法采用北京万泰生物药业有限公司生产的抗EV71-IgM抗体试剂、抗CA16-IgM抗体试剂；采用北京拓普DEM-3型洗扳机和郑州安图PHOMO型酶标仪，有关试剂购自北京贝尔生物公司。

检测方法：标本在检测器中即分离出血清，胶体金法严格按照实际说明书进行操作，在规定的时间内进行目测判读，不管色带颜色的深浅，均视为阳性记录；ELISA法严格按照试剂说明书操作，在450 nm的主波长和630 nm的次波长下测定吸光度(A)值，以0.1+A阴性对照均值为Cut off值，A阴性对照<0.05按照0.05计算。

1.3 临床评价

以最终确诊结果为参照，比较胶体金法与ELISA法对于CA16-IgM抗体、EV71-IgM抗体的检测结果和符合率。

1.4 统计学处理

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种方法对于CA16-IgM抗体的检测结果和符合率比较

胶体金法检出CA16-IgM抗体的符合率低于ELISA法，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两种方法对于CA16-IgM的抗体的检测结果和符合率比较[例(%)]

2.2 两种方法对于EV71-IgM抗体的检测结果和符合率比较

胶体金法检出EV71-IgM抗体的符合率低于ELISA法，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两种方法对于EV71-IgM抗体的检测结果和符合率比较[例(%)]

3 讨论

手足口病是由多种肠道病毒引起的临床上的常见疾病，好发于婴幼儿，严重时可导致死亡。此病最早在1957年由新西兰初次报道，并于1958年成功分离了柯萨奇病毒，在1959年首次提出将此种疾病命名为“手足口病”。其一直都是社会的关注点，并已被列入全球性传染病，在世界绝大部分区域均有对此类疾病的报道。临床研究表明，人类是肠道病毒唯一的传染源，主要经过消化道和呼吸道进行传播，甚至接触患儿皮肤水泡液体都能被感染，需要引起家长的注意[3-4]。在患病初期，患儿喉咙部位和粪便中均可以发现病毒，可以进行传染，因此，一旦患儿疑似感染手足口病必须立即就医，及时诊断和治疗。由于在人群中较易出现密切接触，患儿的飞沫疱疹液、粪便中的病毒以及被病毒所污染后的水源若经口感染，均会导致手足口病的广泛性流行，即使治愈后也不能终身免疫。因此，早期诊断及鉴别引起手足口病的病毒十分必要。

EV71-IgM和CA16-IgM是引起手足口病最为常见的两种病毒，临床上通过对这两种病毒的检测基本可以确诊，常用的检测方法包括胶体金法和ELISA法两种[5]。本研究进一步探究了这两种方法对于手足口病EV71-IgM抗体、CA16-IgM抗体检测的效果，结果显示，胶体金法检出CA16-IgM、EV71-IgM抗体的符合率低于ELISA法，但差异无统计学意义(P>0.05)，提示，胶体金法对两种病毒的检测灵敏度较好。胶体金法检测CA16-IgM抗体、EV71-IgM抗体，操作简便，快速及时，检测范围广，利于早期发现，对于操作技术人员的要求也不高，在县级医院、基层医院的推广性较强。但需指出，利用胶体金法进行检测时可能出现假阳性较高的情况，使临床对患儿产生过度医疗，同时在临床上若患儿手足口病症状明显，但胶体金法检测呈阴性时，仍然需结合临床症状进行进一步的检测，以确保患儿可以得到有效的救治，以免漏诊。值得一提的是，本研究也存在一定的不足之处，如未邀请其他的医疗机构开展协同性的研究，可能对结果产生一定的偏倚，今后可尝试邀请其他医疗机构共同进行课题研究，从而获得更具代表性的研究结论[6]。

综上所述，胶体金法检测CA16-IgM抗体、EV71-IgM抗体的符合率与ELISA法相近，可为临床患儿提供早期诊断的依据。