西京医院性病门诊7 712例尖锐湿疣患者疣体组织HPV型别回顾性分析 *

冯 婷，李海英，曾成龙，闫 丹，赵小东，王胜春

(空军军医大学西京医院皮肤科，西安 710032)

尖锐湿疣(condyloma acuminate，CA)，也称生殖器疣，是目前常见的性传播疾病之一，发病率呈逐年递增趋势，好发于生殖器及肛周部位[1]，最显著的临床特点是容易复发。人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是引起该疾病的病原体，它是一种对人的皮肤和黏膜具有高度亲嗜性的小分子双链DNA病毒，人们根据编码衣壳蛋白L1的基因序列不同来定义HPV亚型，目前已明确200余种型别[2]。资料研究显示不同型别的HPV可以导致不同的临床病变[3]，其中42种基因型与生殖道疾病有关，也有文献报道CA患者的HPV流行型别具有人群和地区差异性[4]。本文拟通过回顾大样本CA患者的临床资料和实验室检测数据，掌握其HPV基因型的类型、数量和高低危险型的分布情况，以此丰富CA流行病学资料，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2010年9月～2018年9月就诊于西京医院性病门诊临床诊断CA患者7 712例，年龄是8个月～84岁，平均年龄32.68±10.97岁。入选标准：有典型的CA临床症状，进行过HPV基因分型检测；排除标准：临床资料缺失、其它HPV相关感染疾病和自身免疫性疾病患者。

1.2 试剂和仪器 HPV基因分型检测试剂盒由亚能生物技术有限公司提供，可检测包括18种高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73和82，83)及5种低危型(HPV6，11，42，43，81)共23种HPV基因型。TL988实时荧光定量PCR仪由西安天隆科技有限公司提供，FYY-3型分子杂交仪由江苏兴化市分析仪器厂提供。

1.3 方法 充分暴露患者的疣体部位，先用生理盐水清洗，然后于患者皮损处消毒，再用消毒活检钳夹取疣体组织置于标本保存液，立即检测或置于-20℃冰箱内保存待检。HPV基因分型检测原理采用的是PCR反向分子杂交法，实验步骤均严格按照试剂盒说明书进行操作，实验全部过程也在质量控制范围内，另本检测中心每年的室间质量控制评价活动成绩也均合格。

1.4 统计学分析 应用SPSS19.0软件进行数据汇总与统计学分析，若P<0.05则差异有统计学意义。

2 结果

2.1 性别分布情况 7 712例中男性4 935例，女性2 777例，性别比例为1.78∶1。

2.2 年龄分布情况 患者年龄分布情况见表1。多为青壮年，以20～29岁最多， 0～9岁及50岁以上患者664例(8.61%)。

2.3 HPV基因型别检出情况 见表2。7 712例中有50例未检测出任何型别，有7 662例检测出23种HPV基因型别，检出频次排名前十位的型别依次为HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型。

表1 7 712例CA患者的年龄分布情况

表2 7 712例CA患者的HPV基因型检出频次情况

2.4 混合感染情况和危险度分布情况 7 662例患者中单一基因型感染占58.98%(4 519/7 662)，多种基因型感染占41.02%(3 143/7 662)，其中二重感染最多占60.77%(1 910/3 143)，最多可见同时感染14个基因型；低危型占60.66%(4 648/7 662)；低高混合型占32.17%(2 465/7 662)，高危型占7.17%(549/7 662)。

3 讨论

HPV是一种无包膜二十面体核衣壳结构的DNA病毒，可引起众多的疾病，包括扁平疣、寻常疣、疣状表皮发育不良、鲍温样丘疹病、CA，宫颈癌和阴茎癌等，这些疾病也都由不同的HPV亚型引起，例如扁平疣主要是由3，10，27和28型等引起，寻常疣则为1，2，4和7型等，而CA感染HPV基因型较多，主要为本研究组中的23个类型，也有研究表明HPV16，18，33，45和31型是宫颈癌中最常见的类型[5]，HPV16和18对浸润性宫颈癌的影响为69.7%[6]。根据HPV致癌力的大小，还将HPV基因型分为高危型和低危型，前者包括HPV16，18，31，33，45，52，56和58等，其持续性感染可能会导致女性各部位上皮内瘤变和男性阴茎及肛周癌变；后者包括HPV6，11，42，43和81型等，与肛门和外生殖器疣等良性病变有关[7]。

本研究CA患者中男性患者多于女性患者，这可能与男性荷尔蒙激素偏高，性生活相对频繁，性伴较多有关。HPV感染情况与年龄也有一定关系[8]，本研究显示CA患者多为青壮年，以20～29岁例数最多，这些与大多数文献均一致[9]，同时儿童及50岁以上患者约占8.61%，临床上应重视此人群的防治。本研究HPV基因型检出频次依次为HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型，此与BAO等[10]研究结果不一致(亚洲最常见的HPV亚型为16，58，33，52，18型)，与现在的HPV九价疫苗(6，11，16，18，31，33，45，52，58)类型也不全相同，说明了CA患者的HPV流行型别有地区差异性[11]，也有利于西北地区CA患者的流行病学和HPV疫苗发展研究。本研究7 712例中有50例未检测出任何型别，与目前临床上约70%的CA患者可检测出HPV感染[3]的观点一致， 其中原因可能是这些患者感染的HPV型别不在本研究检测范围之内，是不是存在新的HPV型别？这还有待于进一步研究，并希望最终能有符合HPV感染流行谱的检测试剂。

CA患者HPV感染的基因型复杂多样，不同CA患者感染HPV的情况也可能不同，某位患者感染的基因型可以是一种，也可以是混合感染两种或两种以上，可以是低危型感染、也可以是高危型或高低危混合感染。从本研究结果来看，单一感染和低危型感染为HPV感染主要形式，这与其他地区的结果类似[12]。掌握临床CA的HPV感染情况和基因型分布不仅仅是流行病学调查的需要，而且对于尖锐湿疣的监测和控制有重要的临床意义。临床中我们要优化单一感染和低危型感染患者治疗方案，提倡个体化治疗，力求降低患者复发频率，同时也要注意多重感染和高危型患者的综合治疗，重视长期进行定期随访观察工作，并完善女性患者的宫颈癌前病变筛查[13]，以防止HPV相关肿瘤的发生。此外，要继续加强CA相关知识宣教工作，真正做好CA患者的全面检查、治疗和定期随访。

目前国内进行HPV检测的方法很多，包括质谱、基因分型和PCR定量等，临床采用更多的是基因分型和PCR定量检测[14]，HPV基因分型检测技术是一种灵敏度高、特异度好、采样方便、能正确区分高危型和低危型感染的诊断方法，是临床诊断HPV感染和相关研究的有效辅助手段。