乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测

李涓 魏世杰

【摘 要】目的：探讨对乙型病毒性肝炎（以下简称“乙肝”）行外周血T淋巴细胞亚群检测的意义。方法：选取140例乙肝患者及61例体检志愿者为研究对象，采取流式细胞仪对研究对象外周血T淋巴细胞亚群进行检测，分析检测结果。结果：急性乙肝患者在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+上同体检志愿者无显著差异（P>0.05），而慢性乙肝、肝炎肝硬化及慢性重症肝炎在各项指标上均较体检志愿者低，其中以肝炎肝硬化指标降低明显。结论：对乙肝患者，行外周血T淋巴细胞亚群检测可为乙肝病型判断提供有利参考。

【关键词】乙型病毒性肝炎;外周血T淋巴细胞亚群;检测

【中图分类号】R512.6【文献标识码】B【文章编号】1005-0019（2019）23-0-02

乙肝是常见的疾病，该病的主要特征为多种免疫反应异常，患者的预后常比较差[1]。针对乙肝疾病，多项研究表明疾病同宿主免疫应答、病毒变异存在密切联系，尤其是外周血T淋巴细胞亚群同疾病发生及发展关联紧密，为此针对乙肝患者，检测外周血T淋巴细胞亚群对疾病诊断有很大帮助[2]。在本研究中，具体探讨了对乙肝患者，使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群对疾病判断的价值，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年2月-2019年5月本院收治的106例乙肝患者及同期到本院进行健康体检的61例志愿者为研究对象。纳入标准：（1）所有患者均符合《病毒性肝炎防治指南》[3]中关于乙肝的诊断标准。（2）患者具有良好的交流沟通能力。（3）患者临床资料完整并均签署知情同意书。排除标准：（1）合并恶性肿瘤疾病的患者。（2）患血液系统疾病及免疫系统疾病的患者。106例乙肝患者中，包括男性60例，女性46例;年龄22～71岁，平均（48.2±2.3）岁;疾病类型：急性乙肝21例，慢性乙肝46例，肝炎肝硬化30例，慢性重症肝炎9例。健康体检志愿者中男38例，女23例;年龄23～72岁，平均（47.9±2.2）岁。

1.2 方法 对所有研究对象均行外周血T淋巴细胞亚群检测，主要是应用BD流式细胞仪检测，方法如下。

1.2.1 试剂与仪器 三色标记单抗CD3+、CD4+、CD8+分别同FITC、PE、PerCP荧光素结合;含beads的TrueCount管;10×FACS溶血素;CaliBRITE beads;FACS Calibur流式细胞仪。

1.2.2 检测方法 （1）标本处理。采取规范的方式，抽取患者2ml的肘静脉血液，将血液置入装有抗凝剂的试管中，标本采集后在6h内完成检测。选取含beads的TrueCount管，其中分别加入100μl的抗体、50μl抗凝全血，振荡3s后避光静置15min。向管中加入450μl浓度为1×9的溶血素，同样振荡3s后在避光环境下静置15min，之后分析数据。（2）数据分析及处理。借助CaliBRITE beads、FACS Calibur流失细胞仪分析处理后的标本，进行CD3+、CD4+、CD8+绝对值计算。

1.3 统计学方法 使用SPSS20.0软件做统计学结果分析，计量资料用表示，使用t检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

急性乙肝在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+各指标上同体检志愿者并无显著差异（P>0.05），慢性乙肝、肝炎肝硬化及慢性重症肝炎在CD3+、CD4+、CD8+上均较体检志愿者低，其中肝炎肝硬化患者各指标降低最明显，详见表1。

3 讨论

乙肝是一种由乙型肝炎病毒所致传染病，患者的临床表现通常为食欲减退、恶心呕吐、腹部不适等，随着疾病的进展，部分患者可进展成肝硬化，甚至还可能进展为肝癌，为此及时的检出乙肝疾病非常关键[4]。

研究结果显示，在乙肝发生及发展中，外周血T淋巴细胞亚群同乙肝存在很大联系。CD3+细胞代表总T淋巴细胞;CD4+在机体免疫应答上起到辅助及诱导作用，启动超敏反应及诱导巨噬细胞活化，在乙肝患者中，患者CD3+、CD4+指标水平明显降低[5]。CD8+是一种具有清除感染肝细胞作用的细胞，正常人群中CD8+的存在可用于清除病毒感染，因此该项指标一般比较高，而乙肝患者中该指标则会降低。根据外周血T淋巴细胞亚群变化，提示临床中可以通过检测这一指标作为诊断及鉴别乙肝严重程度的重要手段。本研究中，选取了乙肝患者及体检志愿者作为研究对象，均行外周血T淋巴细胞亚群检测，结果显示在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+各指标上急性乙肝同体检志愿者无显著差异，其他乙肝患者各指标降低，其中以肝炎肝硬化降低明显，这提示行外周血T淋巴细胞亚群检测对乙肝诊断及鉴别有重要帮助，但关于急性肝炎行该项检测效果并不理想，因此需采取更有效的方法进行检测。

參考文献

黄国初， 黄古叶， 顾桥， 等.健肝颗粒Ⅱ方联合恩替卡韦对HBeAg阳性慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的影响[J].湖南中医杂志， 2017，26（8）：226.

林春明， 梁逸仙， 叶锦俊，等.慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化情况及其针对性治疗措施分析[J].心电图杂志（电子版）， 2018，7（01）：31-32.

宋春洁.乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化分析[J].临床医药文献电子杂志， 2018， 5（81）：49+51.

杜炜， 崔海燕， 张永乐， 等.慢性乙型肝炎患者外周血CD45～+T淋巴细胞亚群检测的临床意义[J].肝脏， 2018，25（9）：102.

王琛， 张永乐， 潘克女， 等.慢性乙型肝炎患者外周血TRECs与CD45+T淋巴细胞亚群检测的临床意义[J].中国现代医生， 2018，36（2）：8-11.