基层医院感染病原菌分布及耐药性分析

潘三妹 刘万能 张 林 张发苏

细菌的耐药性是指致病微生物对于抗菌药物作用的耐受性和对抗性。它是抗菌药物、细菌本身及环境共同作用的结果。近年来，随着抗菌药物的大量不合理的使用，使细菌的耐药情况愈加严峻。MRSA、ESBLs、CRE的检出率一直在增加，细菌的多重耐药检出率也在不断增加，耐药菌的分布及对抗生素耐药情况在不同地区呈现不同特征，为了解基层医院感染病原菌的临床分布及耐药情况，提高基层社区医疗机构临床治疗水平，2017年3 月-2018 年9 月对芜湖广济医院及社区医疗机构临床送检标本的分离菌进行分布及其耐药性统计分析。现报告如下：

1 材料与方法

1.1 材料 ①菌株来源：收集芜湖广济医院及社区医疗机构2017 年3 月-2018 年9 月临床各类送检标本分离菌株共171 株（剔除同一患者同一部位的重复菌株）。②试剂与仪器：培养使用培养基购自法国科玛嘉，细菌鉴定板条购自法国梅里埃公司，药敏纸片购自英国OXOID公司，药敏实验用的MH琼脂购自杭州滨河微生物试剂有限公司。

1.2 方法

1.2.1 菌株鉴定及药敏实验 临床分离菌株的鉴定均使用梅里埃公司的API鉴定板条，药敏均采用纸片扩散法（Kirby-Bauer）,质控菌：大肠埃希菌ACTT 25922，铜绿假单胞ATCC 27853，金黄色葡萄球菌ACTT 25923。药敏试验结果按CLSI2017 年版判断标准[1]。

1.2.2 耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌（CRE） 对亚胺培南、美罗培南或厄他培南中任一种药物耐药者。药敏试验结果按CLSI2017 年版判断标准[1]。

1.2.3 MRSA的检测 采用头孢西丁扩散法，挑选来自孵育过夜的琼脂平板培养物，制备被检菌株悬液，调整至0.5 号麦氏浊度，后密集划线，贴头孢西丁（30μg/片），空气中33 ℃～35 ℃孵育16～18 h后读取抑菌圈直径。药敏试验结果按CLSI2017 年版判断标准[1]。

1.2.4 产ESBLs菌株的检测 ①筛选方法：头孢他啶抑菌圈≤22 mm，头孢噻污抑菌圈≤27 mm。②表型确证试验：两个组合中任何一组加克拉维酸比不加克拉维酸的抑菌圈直径增大值≥5 mm即为产ESBLs。药敏试验结果按CLSI2017 年版判断标准[1]。

1.3 统计学分析 人工使用Excel表格进行统计分析。

2 结 果

2.1 细菌分布 2017年3月-2018年9月共分离非重复菌株171株，其中革兰阳性菌54株（31.6%），革兰阴性菌117 株（68.4%）。菌株主要来源于痰液（59.9%），尿液（30.6%）和分泌物（6.8%），其中，痰液中的主要分离菌为铜绿假单胞菌24株（27.3%），鲍曼不动杆菌17 株（19.3%）大肠埃希菌15 株（17.0%）。尿液中的主要分离菌为大肠埃希菌28 株（55.6%），粪肠球菌4 株（8.9%），金黄色葡萄球菌3 株（6.7%），屎肠球菌3 株（6.7%）。分泌物中的主要分离菌主要为金黄色葡萄球菌4 株（40.0%），奇异变形杆菌2株（20.0%）。主要菌株分布见表1。

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药性

2.2.1 葡萄球菌属 葡萄球菌属中的MRSA和MRCNS的检出率分别59%和100%（仅1株）。MSRA对其余抗菌药物的耐药率明显高于MSSA，葡萄球菌属对替考拉宁全敏感。具体药敏结果见表2。

表1 2017-2018年临床分离菌株的分布

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率(%)

2.2.2 肠球菌属 肠球菌属中粪肠球菌共5 株（62.5%），屎肠球菌3 株（37.5%）。肠球菌属中屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。屎肠球菌对呋喃妥因、利奈唑胺、庆大霉素全敏感。粪肠球菌对氨苄西林、利奈唑胺和呋喃妥因全敏感。具体药敏结果见表3。

表3 肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率(%)

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

2.3.1 肠杆菌科细菌 大肠埃细菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯和产酸克雷伯）和奇异变形杆菌产ESBL的菌株检出率分别为44.4%、36.4%和50%。产ESBL的菌株对其余检测药物的耐药率明显高于非产ESBL株。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属对氨苄西林的耐药率为100%。大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的敏感性为91%，即CRE的检出率为9%。克雷伯菌属的CRE检出率为38%。变形杆菌属对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为100%。具体药敏结果见表4。

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率(%)

2.3.2 不发酵糖的革兰阴性杆菌 铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为24%。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均为82%，鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类，青霉素类和酶抑制剂类药物的耐药性全部大于75%。见表5。

表5 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率（%）

2.3.3 沙门菌属 分离出1 株乙型副伤寒沙门菌，此株沙门菌对氨苄西林、复方磺胺和头孢曲松耐药。

3 讨 论

本研究2017 年3 月-2018 年9 月共分离出非重复菌株171 株，占前五位的分别是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和克雷伯菌属。与2017 年中国CHINET细菌耐药性监测的数据略有所不同（CHINET的前五位分别是大肠埃希菌、克雷伯菌属、不动杆菌属、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌）[2]。

本次监测结果显示，MRSA的检出率为59%，高于2017 年中国CHINET细菌耐药性监测的结果[2]。MSRA对其余抗菌药物的耐药率明显高于MSSA。因凝固酶阴性的葡萄球菌只分离出来一株，且为MRCNS，不足以说明问题。肠球菌属中屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。与2017 年中国CHINET细菌耐药性监测数据一致[2]。且粪肠球菌和屎肠球菌对呋喃妥因和利奈唑胺全敏感。

在肠杆菌科细菌中，克雷伯菌属的检出率为21.3%，明显低于2017 年中国CHINET细菌耐药性监测的数据[2]。大肠埃细菌、克雷伯菌属（肺炎克雷伯和产酸克雷伯）和奇异变形杆菌产ESBL的菌株检出率分别为44.4%、36.4%和50.0%。产ESBL的肠杆菌科细菌对体外敏感实验头孢噻污的耐药率高于对头孢他啶的耐药率。大肠埃希菌的CRE的检出率分别为9%，显示大肠埃希菌对碳青霉烯类的抗菌药物仍有较高的敏感性，基本与徐添天等[3]报道保持一致。克雷伯菌属CRE的检出率为38%，高于王健等[4]耐药监测结果，CRE的检出率有所上升，需要引起我们的关注。

总之，必须加强对细菌耐药性的监测及防控，协助基层社区医疗机构提高诊疗水平，促进抗菌药物的合理使用。