魏宁 丁小明 卓国荣 张步彩 李巨银 胡新岗
摘要:为研究中药制对鸡胚人工感染犬传染性肝炎病毒的防治效果,试验用鸡胚成活率作为评价药物预防效果指数。结果表明,中药制剂具有防治鸡胚感染犬传染性肝炎病毒效果。
关键词:中药制剂;犬传染性肝炎;防治效果;研究
中图分类号:S858.292 文献标识码:B doi:10.3969/j.issn.2096-3637.2019.20.002
0 引言
犬传染性肝炎是由犬腺病毒引起的一种急性、败血性传染病。该病以循环障碍、肝小叶中心坏死、肝实质细胞和内皮细胞核内出现包涵体为特征。主要症状有精神沉郁,食欲不振,喜欢饮水。在急性症状消失后7~10d,约有60%的康复犬一侧或双侧眼发生暂时性淡蓝色角膜浑浊(眼色素层炎),俗称“蓝眼病”。我国中药资源丰富,临床上使用已有数千年的历史,而且中药治疗可以起到标本兼治的作用,因此开发能有效治疗犬传染性肝炎的中药组合物是解决该病的有效途径之一。试验拟用由旱莲花等四味中草药组成的复方制剂进行体外试验效果研究,以期为今后中药复合物防治犬传染性肝炎临床试验提供选择和参考。
1 材料
1.1 试验药物
旱莲花、槐栓菌、路边青、青刺尖,购自泰州宏泰卫生物资公司。
1.2 试验动物
10日龄SPF鸡胚,36枚,分2批购自南京药械所。其中12枚用于中药复合物毒性试验,24枚用于分组测定试验。犬肝炎病毒毒株由军事兽医研究所提供。
2 方法
2.1 中药制剂制备
将旱莲花17~20重量份,槐栓菌8~10重量份,路边青9~11重量份,青刺尖11~13重量份混合加水浸泡,煮沸,过滤,滤渣再加水煮沸,过滤,两次滤液合并后浓缩至稠状,加乙醇调至乙醇浓度60%~70%,充分搅匀冷藏沉淀,过滤,滤液回收乙醇,回收乙醇后的药液再加乙醇至乙醇75%~80%,搅匀,冷藏沉淀,过滤,滤液回收乙醇,再浓缩至无醇味,药液加水冷藏沉淀,过滤,滤液浓缩得浓度为每mL含1.5g生药量的药液,调pH7.0,制成中药制剂口服液,经流通蒸气灭菌备用。
2.2 犬肝炎最小致死量测定
经病毒液稀释并接种鸡胚致死测定,犬肝炎病毒按1:10倍稀释即达到最小致死量。
2.3 分组
2.3.1 中药制剂毒性试验
将中药制剂口服液原液与生理盐水按1:1、1:2、1:4进行稀释,并分别接种于3只10日龄鸡胚的尿囊腔中,每只0.2mL,置37.8℃温箱孵育72h,每天观察存活情况,鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式实验起始浓度。
2.3.2药物作用试验
试验分组见表1。
3 结果与分析
3.1 中药制剂毒性试验结果
中药制剂稀释液及原液在72h内对所有鸡胚不具有致死性,鸡胚全部存活。见表2。
3.2 药物作用结果
中药制剂在72h内具有作用显著保护犬感染犬传染性肝炎病毒的作用;在保护鸡胚成活率方面,中药制剂组能显著提高鸡胚感染犬传染性肝炎病毒成活率。见表3。
4 讨论
治疗方面,临床上常采用注射犬传染性肝炎高免血清或免疫血浆或使用干扰素、阿昔洛韦、三氮唑核苷、聚肌胞等抗病毒药物对犬傳染性肝炎进行治疗,同时需辅以保肝利胆等对症治疗的方法。科研人员一直在研究安全、有效的防治犬传染性肝炎药物。中药的耐药性低,不良反应小,药物残留低等特点被广泛应用于动物疫病防控。聂玉梅[1]用龙胆泻肝汤,即炙甘草、桅子、黄芩、车前、柴胡等加水煎煮给病犬灌服治疗。卢劲哗[2]等用大黄、茵陈、桅子、穿心莲等混合均匀制成药粉灌服。秦泽武[3]等用普济消毒饮,即板蓝根、黄芩、黄连、陈皮、甘草等煎汁灌服治疗等。
试验选择旱莲花、槐栓菌、路边青、青刺尖作为复方,主要是依据中药配伍“君-臣-佐-使”原则。旱莲花,为君药,槐栓菌为臣药,路边青为佐药,青刺尖为使药;其中旱莲花,性辛、凉,具有清热解毒,凉血止血,主治口赤肿痛,疮疖,吐血,咯血;槐栓菌,性辛、平,具有止血,止痢,抗癌,主治便血,痢疾,肝癌,肝炎,还有提高机体免疫功能的作用;路边青,性苦、辛,微寒,具有健脾利湿,解毒止血,主治小儿疳积,腹泻,痢疾,蛇咬伤,外伤出血;青刺尖,性微寒,味苦,具有清热解毒,活血散瘀,主治乳痈,贫血,痄腮,瘰疬,跌打损伤。4种药物配伍,达到标本兼治的效果。
5 结论
中药制剂与阿德福韦酯都具有防治犬传染性肝炎效果。其中中药制剂组防治犬传染性肝炎效果率高于阿德福韦酯组,并可作为今后药物预防犬传染性肝炎病试验的选择和参考。
参考文献
[1]聂玉梅.犬传染性肝炎的临床诊断和中西医防治[J].现代畜牧科技,2016(7):132.
[2]卢劲晔,王玉倩,顾蓓蓓.犬传染性肝炎的诊断与防治[J].兽医导刊,2017(21):44-45.
[3]秦泽武,周会梅,蒲大章.中西结合治疗犬传染性肝炎的体会[J].中兽医学杂志,2015(8):37.
基金项目:江苏农牧科技职业学院教育教学研究课题(JYYJ201901)
作者简介:魏宁(1978-),男,汉族,副教授,本科,从事兽医教学、畜禽疫病防治研究工作。