关于三年桐、千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应分析

李启祥

摘   要：针对三年桐、千年桐感染枯萎病病原菌后的生理反应，采取资料调查法和实践经验总结法，作了简单论述，提出了相应的防治策略。明确了油桐感染枯萎病病原菌后的生理反应，能够为病害防范和治理的开展提供有力的依据。基于此，深度分析此课题具有现实意义。

关键词：三年桐;千年桐;枯萎病;病原菌;生理反应

从贵州区域经济发展实际来说，油桐种植历史悠久，品种资源丰富而且良种多，被广泛种植，成为部分地区的重要产业。以贵州独山县为例，其已建成三年桐嫁接育苗基地13.3 hm2，全省种植面积超过1.33万hm2，带动了区域经济的发展。当前油桐产业的发展面临着病害的威胁，影响种植效益，因此有必要加强相关研究，提出有效的防治策略，推动油桐产业的发展。

1   油桐感染枯萎病病原菌的研究

油桐枯萎病首次于1939年发生在广西壮族自治区与贵州交界位置，当时确定枯萎病病原菌是尖孢镰刀菌，此病在后期长达20多年里给油桐产业发展造成了严重为害。一直以来，油桐枯萎病的机理问题和防治难题始终没有得到解决。现有的研究很少，尤其是1991—2011年间发表的文献很少涉及到油桐枯萎病。油桐枯萎病属于维管束病害，其病原菌主要从根部入侵，沿着木质部导管向上不断蔓延，使得油桐出现半株或者整株枯萎，以三年桐为主，最高危害率达到了90%。当油桐感染枯萎病以后，会出现根部腐烂以及枝干黑褐色等情况。目前，由于致病机理还没有明确，多采取嫁接的方式进行防治。

2   油桐感染枯萎病病原菌的生理反应

2.1   材料和方法

2.1.1   样品采集

以某县油桐主产区选择试验材料，采集发病植株茎干部部位。采集的样品放置在封口袋内部，送到实验室开展病原物分离以及鉴定。

2.1.2   病原物分离和纯化

使用自来水对感染病原叶片进行清理，放置在75%乙醇（V/V）条件中浸泡，大约浸泡40 s;再使用1%中次氯酸钠溶液进行表面消毒，消毒4 min;经过75%乙醇进行30 s漂洗;使用无菌蒸馏水进行清洗，至少清洗3次，同时使用无菌滤纸吸收水分。使用无菌手术刀片，选择在茎秆病健交界位置切取组织块，切大约0.5 cm2，转移到麦芽粉琼脂培养基平板下，营造26 ℃黑暗条件进行培养。需要注意的是，培养基要预先加入硫酸链霉素以及盐酸四环素，加入量分别为50 mg/L、20 mg/L，避免细菌污染。经过4 d的培养，对生出的菌丝进行转接，转入到新鲜马铃薯葡萄糖琼脂培养基，开展纯化试验。

2.1.3   病原物形态学以及分子鉴定

将病原物接种在PDA内，进行培养形状以及特性的观察。植株生理指标的测量，选择相应的油桐植株根部，进行剪碎处理，分别称取0.5 g，使用锡箔纸进行包裹，并且快速放置到液氮条件下冷冻，同时放到-70 ℃冰箱条件下保存。当开展生理指标测定时再取出来，进行相应处理。运用NBT光化还原法，进行SOD活性相应的测定;使用愈伤木酚显色法，开展POD活性的测定;运用过氧化氢分解法，开展CAT活性测定;运用TBA比色法，开展MDA含量的测定。

2.2   生理指标的变化

2.2.1   对SOD活性的影响

从SOD的特性来说，其为超氧化物歧化酶，被作为氧清除剂，发挥着清除活性氧等物质的作用。一般来说，植物体内部的活性氧物质，其产生与清除多处平衡状态下。受到逆境的影响，植物呼吸会快速增加，细胞渗透势出现大幅度降低的变化，体内产生很多的活性氧，使得平衡被打破。当感染了尖孢镰刀菌后，油桐活性的变化为先升高再减小的特征，同时在侵染前期达到最高峰[1]。

2.2.2   对POD活性的影响

POD即过氧化物酶，其以铁卟啉作为辅基，能够催化过氧化氢氧化酚类以及胺类化合物，不仅能够消除过氧化氢，还能够消除酚类以及胺类毒性。经过试验研究能够发现，千年桐POD的活性很高，活性变化特点为先增加再降低，在侵染中期活性达到最高;三年桐接种之后POD活性变化特点为先降低后增加，在侵染中期活性达到最低。根据POD活性的测定结果，整个侵染期间，千年桐POD活性相对于三年桐来说要高。

2.2.3   对CAT活性的影响

过氧化氢酶作为催化过氧化氢分解成为氧气和水的酶。经过试验，千年桐树的CAT保持了很高活性，接种之后，酶活性快速上升，同时在侵染全过程都保持较高活性[2]。三年桐接种之前的活性和千年桐树的活性相差不大，但在接种后其活性发生了变化，出现了先降低、再升高、又降低的特点，侵染前期活性值最小，在侵染的中期活性值最高。从CAT活性的测定结果来说，经过接种处理后，千年桐树CAT活性全部高于三年桐。

2.2.4   对MDA含量的影响

从植物器官衰老或者处于逆境情况下受到伤害来说，通常会产生膜脂过氧化作用，最终分解产物为MDA。一般来说，MDA的含量能够反映植物遭受逆境伤害的水平。经过试验分析，千年桐树接种后的MDA含量变化特点为缓慢上升，变化不够明显，同时小于三年桐MDA含量多少[3]。

3   油桐感染枯萎病病原菌的防治策略

3.1   采取嫁接繁殖手段

目前，防治油桐感染枯萎病一般采取嫁接繁殖手段。在具体实施环节，选择千年桐树为砧木，选择三年桐作为接穗开展嫁接，实现对此病的防治。选择春季或者秋季，若在春季选择3—4月嫁接，若在秋季选择9—10月嫁接。需要注意的是，为了保证嫁接的成效，要合理选择树木。开展嫁接作业时，必须要熟练操作，能够快速嫁接，切口光滑且平整。运用方块芽接，实际操作的过程中嚴格按照嫁接流程进行，做好严格把控，保证接芽能够正常生长，同时注意整形[4]。

3.2   因地制宜，合理栽植

种植油桐时，要结合区域地质情况，合理选择品种。对于枯萎病较为严重的种植区，建议发展以千年桐树嫁接的三年桐，或者采取种植混交林的方式，减少病根接触健硕树根。除此之外，要做好林地的抚育管理，施加磷钾肥，增强植株的抗病能力。选择3—5月，也就是病菌侵染期，开展免耕作业，避免伤根，以此减少侵染。

3.3   采取其他措施

当油桐感染枯萎病时，应及时挖除同时烧毁病树木，做好病原的清除。对病土使用石灰进行相应处理，减少病害扩展以及蔓延。结合油桐感染枯萎病的实际情况，使用相应的药物，比如抗菌剂401，对病株进行处理[5]。

综上所述，通过分析油桐感染枯萎病后的生理反应，明确了千年桐和三年桐染病的特点，为种植工作的开展提供了依据。在油桐的种植和养护管理实践中，采取以下措施：选用嫁接繁殖手段，因地制宜，合理栽植。通过采取一系列措施，做好相应的防治工作，减少病害损失。

参考文献：

[ 1 ] 李清娟.油桐枯萎病的发生与防治[J].现代农村科技，2018（2）：37.

[ 2 ] 杨再华，吴跃开，许杰，等.贵州不同油桐品系对枯萎病的抗性评价[J].贵州农业科学，2018，46（2）：53-55.

[ 3 ] 杨再华，刘童童，李晓龙，等.油桐枯萎病的研究进展[J].贵州农业科学，2018，46（1）：51-53.

[ 4 ] 岳继贞，胥文锋.油桐枯萎病的发生与防治[J].现代农村科技，2017（5）：31.

[ 5 ] 徐红梅，曾祥福，邓先珍，等.油桐枯萎病病原鉴定及其生物学特性研究[J].湖北林业科技，2016，45（5）：42-45.

（收稿日期：2019-06-10）