不同产地福鼎大白茶制绿茶的茶氨酸含量对比分析

严学芬 刘燕 刘志刚 赵志燊 余磊 娄杰

摘 要：检测不同产地福鼎大白茶制绿茶的茶氨酸含量，为不同地区福鼎大白茶制绿茶的品质鉴定提供依据。采用高效液相色谱法进行测定，色谱柱为RP-18（粒径5 μm，250 mm×4.0 mm）;流速为1.0 mL·min-1;柱温为（35±0.5）℃，检测波长为λ=210 nm;进样量为10 uL;流动相为A相用100%超纯水，采用0.45 μm水相滤膜过滤，B相用100%乙腈，采用0.45 μm有机相滤膜过滤备用。结果表明：7个产地福鼎大白茶制绿茶中茶氨酸浓度在0.10～0.20 mg·mL-1范围内线性关系良好，回收率为88.80%～97.35%，RSD为0.57%，说明该方法精密度良好、准确度高，可用于检测绿茶茶氨酸含量;7个产地福鼎大白茶制绿茶中茶氨酸含量为7.00～26.60 mg·g-1，除广州海丰和江苏常州2个产地绿茶茶氨酸含量差异不显著外，其他产地绿茶茶氨酸含量均存在极显著差异，说明茶氨酸含量与茶叶种植地区有一定关系。

关键词：不同产地;福鼎大白;绿茶;茶氨酸;高效液相色谱法

中图分类号：TS272 文献标志码：A 文章编号：0253-2301（2019）09-012

Abstract： The contents of theanine in the green tea made from Fuding Dabaicha in different origins were detected， which provided the basis for the quality identification of green tea made from Fuding Dabaicha in different origins. HPLC was used for the determination： the chromatographic column was RP-18 （particle size of 5 μm， 250 mm×4.0 mm）， the flow velocity was 1.0 mL·min-1， the column temperature was （35±0.5） ℃， the determine wavelength was λ=210 nm， the sample size was 10 uL， and the mobile phase was 100% ultrapure water in phase A， being filtered by 0.45 μm aqueous phase membrane， and 100% acetonitrile in phase B， being filtered by 0.45 μm organic phase membrane. The results showed that the content of theanine in the green tea made from Fuding Dabaicha in 7 regions had a good linear relationship within the range of 0.10-0.20 mg· mL-1， with the recovery rate of 88.80%-97.35% and RSD of 0.57%， indicating that the method had good precision and high accuracy， and could be used to detect the content of theanine in green tea. The content of theanine in green tea made from Fuding Dabaicha in 7 regions ranged from 7.00 to 26.60 mg·g-1. And there were significant differences in the content of theanine in green tea in other origins except for Haifeng， Guangzhou and Changzhou， Jiangsu， indicating that the content of theanine was related to the tea growing regions.

Key words： Different origins; Fuding Dabaicha; Green tea; Theanine content; HPLC of theanine

茶氨酸是茶葉中特有的一种氨基酸，它是茶叶中主要的化学成分之一。茶叶中的茶氨酸是组成蛋白质的基本单位，也是活性炭、酶和其他一些生物活性分子的组成成分。同时茶叶中茶氨酸的组成、含量以及他们的降解产物直接影响着茶叶的品质，是组成绿茶品质极为重要的成分之一[1]。茶叶中茶氨酸组成特性直接影响到茶叶的鲜爽醇度，且茶氨酸具有降压、抗疲劳、抗肿瘤、镇静等多种生理功能，在医疗卫生等领域应用广泛。茶叶中茶氨酸占茶叶中氨基酸总含量的50%～60%，占干茶总量的1%～2%[2-3]。本研究采用高效液相色法检测不同产地福鼎大白茶制绿茶的茶氨酸含量，并对其含量进行对比与分析，旨在为不同地区福鼎大白茶制绿茶的品质鉴定提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与药品

乙腈为色谱纯（美国TEDIA公司），超纯水（密理博明澈超纯水机制备），茶氨酸标准品（美国CATO公司）。

1.2 试验样品

本试验所用茶样选自贵州开阳、贵州德江、贵州清镇、江苏常州、四川雅安、山东青岛、广东海丰7个产地的福鼎大白茶所制绿茶，茶样均为2017年生产，每个产地茶样制作5个平行样品。

1.3 试验仪器

日本岛津AP135W电子天平，岛津LC-16高效液相色谱仪，上海梅香XMTD-204恒温水浴锅，密理博明澈-D24VDC超纯水仪，上海梅香80-2B电动离心机，上海其林贝儿涡旋振荡器，移液枪。

1.4 茶叶样品制备

分别称取不同地区绿茶样品经磨碎混匀后，称取（100±0.5 mg）的茶粉倒入到离心管中，用移液枪加入10 mL自制超纯水，密封。恒温水浴锅中浸提45 min，离心（3500 r·min-1、40 min），然后取上清液用0.45 μm水相滤膜过滤，放置待测。

1.5 色谱条件

色谱柱为RP-18（粒径5 μm，250 mm×4.0 mm），流速1.0 mL·min-1，柱温为（35±0.5）℃，检测波长为λ=210 nm，进样量为10 uL;流动相为A相用100%超纯水，采用0.45 μm水相滤膜过滤;B相用100%乙腈，采用0.45 μm有机相滤膜过滤备用。色谱梯度洗脱条件列于表1。

1.6 茶氨酸标准储备溶液

精密称取0.05 g茶氨酸（精确到0.0001 g）标准品，用水溶解后移入50 mL容量瓶中，稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升含1 mg茶氨酸，有效期为1年[4]。

1.7 标准溶液的配制

准确吸取茶氨酸标准储备溶液0、0.10、0.20、0.50、1.00、1.50、2.00 mL，用水定容至10 mL，得到浓度分别为0、0.01、0.02、0.05、0.10、0.15、0.20 mg·mL-1的茶氨酸标准使用溶液。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制

将不同浓度的茶氨酸系列标准溶液采用《GB/T 23193-2017茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法》[4]进行测定。以茶氨酸标准品质量浓度（mg·mL-1）为横坐标x，峰面积y为纵坐标绘制茶氨酸标准曲线（图1），其线性回归方程为y=755507x+35827，相关系数R2=0.9997。检测波长在210 nm处，经高效液相色谱仪测得茶氨酸标准品高效液相色谱图（图2），系数方程R2=0.9997，满足试验检测要求。

2.2 精密度试验

准确吸取茶氨酸对照样品1 mL，每次进样量10 μL，重复进样6次，绘制色谱图，分别记录各个峰的峰面积，计算求得其相对标准偏差RSD=0.57%。表明该方法的精密度良好，可用于检测茶氨酸含量。

2.3 回收率测定

取1.4所得茶叶样品进行回收率测定试验，在已知茶氨酸含量的茶样中加入一定量的标准品进行回收率试验，按样品处理方法（1.4）处理后上机测定，结果见表2。从表2可以看出，茶叶样品回

2.4 不同产地福鼎大白茶制绿茶茶氨酸含量比较分析

从试验结果（表3）可知，不同产地福鼎大白茶制绿茶茶氨酸含量为7.00～26.30 mg·g-1。贵州德江茶样的茶氨酸含量最高，为26.30 mg·g-1，与其他不同产地茶样差异均达极显著水平;广州海丰和江苏常州茶样茶氨酸含量较接近，二者差异未达显著水平，与其他产地茶样差异均达极显著水平;贵州开阳茶样茶氨酸含量最低，仅为7.00 mg·g-1。

3 结论

本研究采用高效液相色谱方法测定广东海丰、山东青岛、贵州开阳、贵州德江，贵州清镇、江苏常州、四川雅安7个产地福鼎大白茶制绿茶茶氨酸含量，RSD=0.57%，方法回收率为88.80%～97.35%，该方法精密度高，回收率良好，结果准确。有研究表明，茶氨酸含量可能与茶叶的种植地区生长环境（大气、降水、土壤中元素含量、土壤酸度）等有关[5-7]，也可能与茶叶加工方式和发酵方式有关[8]。本研究结果表明，7个产地福鼎大白茶制绿茶茶氨酸含量为7.00～26.30 mg·g-1，茶氨酸含量差异较大。其中，贵州德江茶样茶氨酸含量最高（26.30 mg·g-1），比其他地区茶样茶氨氨酸含量高28.2%～73.7%，说明贵州德江地区种植的福鼎大白制绿茶茶氨酸含量丰富，值得大力推广。由于茶氨酸含量只是茶叶品质重要的评判标准之一，其茶叶品质是否高于其他6个种植产地还有待进一步研究。

参考文献：

[1]蔡翔，李延升，杨普香，等.茶氨酸呈味特征及應用前景[J].蚕桑茶叶通讯，2017（6）：31-33.

[2]林伟东，孙威江，郭义红，等.茶叶中茶氨酸的研究与利用[J].食品研究与开发，2016，37（20）：201-206.

[3]赵丹，王朝旭.茶氨酸的国内外研究现状[J].食品科学，2002（5）：145-147.

[4]杜琪珍，李名君.环境条件对茶树花器内含化学成分的影响[J].中国茶叶，1990（3）：6-7.

[5]赵璇，李新生，邢丽红，等.高效液相色谱法测定汉中茶叶中茶氨酸含量[J].食品安全质量检测学报，2015，6（12）：4902-4907.

[6]郞明洋，付长华.浙江省不同产地茶叶主要成分含量比较及分析[J].机电信息，2018（26）：38-44.

[7]邓敏，徐茂，徐泽，等.不同地区不同类型普洱茶中茶氨酸含量比较分析[J].南方农业（园林花卉版），2011，5（4）：25-27.

[8]国家标准化管理委员会，国家质量监督检验检疫总局.GB/T23193-2017茶叶中茶氨酸的测定高效液相色谱法[S].北京：中国标准出版社，2017.

（责任编辑：林玲娜）