妇科门诊患者解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌和人乳头瘤病毒感染特点及相关性分析

张丽敏，吕 虹，陈柯霖，刘淑静，周 金，谷愉愉，康熙雄，张国军△

(1.首都医科大学附属北京天坛医院检验科，北京 100070；2.北京市免疫试剂临床工程技术研究中心，北京 100070)

性传播疾病是一类以性接触为主要传播方式的泌尿生殖道感染性疾病。性传播指的是一种传播方式，有直接传播和间接传播2种。北京天坛医院妇科门诊对患者进行的性传播疾病病原体检查主要包括解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)和淋球菌(NG)3种[1-2]。大部分患者因泌尿生殖道感染症状而就诊，其中部分患者也会同时进行人乳头瘤病毒(HPV)的检测，后者也属于性传播疾病病原体的一种。在临床工作中笔者发现UU、CT和NG检测阳性的患者，其HPV阳性检出情况也较多，那么二者之间是否存在协同感染，即UU/CT/NG与HPV感染是否存在相关性是值得探讨的问题。本研究探讨妇科门诊患者性传播疾病病原体分布情况及感染特征，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年2月至2017年11月于北京天坛医院妇科门诊初诊妇女共2 064例，年龄17～75岁，平均(35.25±10.18)岁。患者的初步诊断主要为阴道炎、子宫颈炎、盆腔炎、女性不孕和月经紊乱等。患者未接受过抗性传播疾病病原体相关治疗，排除妊娠。

1.2方法

1.2.1标本采集 由妇科医生使用阴道窥器暴露宫颈，采用专门的采样刷采集宫颈脱落细胞标本,将毛刷放入盛有细胞保存液的收集管中，4～8 ℃冰箱保存，3 d内完成检测。

1.2.2仪器与试剂 采用潮州凯普生物化学有限公司生产的UU/CT/NG和HPV基因分型检测试剂盒，采用凯普导流杂交技术,对UU/CT/NG及21种常见的HPV基因型进行分型检测，HPV包括13种高危型HPV和8种低危型HPV，高危型包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68,低危型包括HPV6、11、42、43、44、53、66和CP8304。

1.2.3实验过程 取装有宫颈细胞的细胞保存液0.8 mL，用pH 7.2的PBS洗涤2次，弃上清液，然后用DNA提取试剂盒(凯普生物技术有限公司)提取样本DNA，取2 μL作PCR的DNA模板。采用试剂盒中自带的UU/CT/NG引物和HPV引物进行PCR扩增。利用导流杂交技术将扩增产物与基因芯片上的探针进行杂交，洗膜、酶标显色后根据显色位点判断病原体检出情况。同时基因芯片上2个质控点均显色为蓝色斑点，提示PCR扩增及产物杂交过程在控，实验有效。

1.3统计学处理 采用SPSS18.0统计学软件进行数据分析；计数资料以率表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。二分类变量之间的相关采用相关分析，相关系数r越接近于1，说明关系越密切。

2 结 果

2.1妇科门诊患者宫颈感染UU/CT/NG检出情况

2.1.12 064例妇科门诊初诊患者，检出UU/CT/NG阳性例数为1 335例(UU/CT/NG检出一项阳性即为阳性)，总阳性检出率为64.68%(1 335/2 064)，3种病原体均有检出。各病原体检出情况见图1。其中UU检出率最高，共1 311例，阳性率为63.52%，CT和NG阳性率分别为5.81%和0.68%。

图1 妇科门诊患者UU/CT/NG检出情况

2.1.2单一及多重感染分布 在1 335例检出阳性标本中，单一感染1 229例，占总阳性标本的92.06%，主要为UU感染，其次为CT。二重感染102例，占总阳性标本的7.64%，主要为UU合并CT感染；三重感染4例，占总阳性标本的0.3%。见图2。

图2 妇科门诊患者检出UU/CT/NG单一及多重感染分布

2.1.3妇科门诊患者感染UU/CT/NG年龄分布情况 妇科门诊患者不同年龄段UU/CT/NG感染率呈现2个峰值，分别为≤30岁和41～50岁2个年龄段。其中≤30岁感染率最高，为68.20%。年龄≥61岁患者感染率最低，为32.69%。见表1。

表1 妇科门诊患者感染UU/CT/NG年龄分布情况

注：与≤30岁比较，*P<0.05；与31～40岁比较，#P<0.05；与41～50岁比较，&P<0.05；与51～60岁比较，★P<0.05

2.2妇科门诊患者宫颈感染UU/CT/NG合并HPV检出情况 2 064例患者中，有1 090例同时进行了HPV检测，对其进行4种病原体的感染特点分析如下。

2.2.11 090例样本HPV检出情况 1 090例样本中，检出HPV阳性例数为205例，感染率为18.81%。其中高危感染检出210人次(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68至少1种阳性即为阳性)，低危感染检出69人次(HPV6、11、42、43、44、53、66和CP8304至少1种阳性即为阳性)。各基因型检出情况见图3 。在205例阳性样本中，单一感染153例，占阳性样本的74.63%；二重感染35例，占总阳性标本的17.07%；三重及以上感染17例。见图4。

图4 1 090例样本检出HPV单一及多重感染分布

UU/CT/NG感染HPV感染阳性(n)阴性(n)HPV阳性率(%)Pχ2r阳性16453723.40*0.00027.0750.156阴性4134810.54合计20588518.81

注：与UU/CT/NG阴性组比较，*P<0.01

2.2.2UU/CT/NG感染与HPV感染的相关性分析 与UU/CT/NG阴性组比较，UU/CT/NG阳性组的HPV阳性率较高，为23.40%，两组间差异有统计学意义(P<0.01)。两组间相关系数r=0.156。见表2。

3 讨 论

UU、CT和NG是泌尿生殖道感染的主要病原体，可引起女性不孕不育及早产[3]，有报道认为性传播疾病病原体检出率呈增长趋势[4]。首都医科大学附属北京天坛医院对患者进行此项检查为一组合项目，即一份样本同时进行3种病原体的检测。HPV也参与了生殖道炎症的发生，并且是宫颈癌发生的重要因素。因此，在对2 064例患者人群进行UU、CT和NG的感染特征分析基础上，本研究进一步对其中同时进行HPV检测的1 090例患者进行4种病原体的感染情况统计及相关性分析，以了解首都医科大学附属北京天坛医院妇科门诊女性泌尿生殖道感染病原体分布情况。

UU是人类泌尿生殖道常见的寄生菌之一，在特定环境下可致病，引起泌尿系统感染和不孕症。国际上将UU分为生物1群和生物2群，共包含14个血清型，认为不同血清型UU致病性不同[5]。而目前大部分实验室采用的检测方法并不能区分血清型。近年来，UU所致泌尿生殖道感染日益受到重视，约占非细菌性尿道炎的60%，若上行感染，可引起男性前列腺炎或附睾炎、女性阴道炎、宫颈炎，并可感染胎儿导致流产、早产及低体质量胎儿等。本研究数据显示，UU检出率最高，感染率为63.52%，远远高于其他同类报道的28.40%和5.86%[5-6]，但与有的研究报道数据相近[7-8]。分析原因，首先，可能与研究人群不同有关，UU感染率存在地域及性别差异。其次，上述研究采用的方法学也不尽相同，虽然都采用了PCR技术，但试剂盒设计的引物序列不同，并且有的检测方法为荧光PCR，扩增效率或检出灵敏度可能均存在差异。另外，样本量也存在较大差异，有的研究仅对100多例样本进行分析，并不能很好地代表大样本人群的分布情况。CT引起的泌尿生殖道感染主要由D～K血清型引起。男性多表现为尿道炎，女性能引起尿道炎、宫颈炎等，输卵管炎是较严重并发症。因其多为隐匿性感染，因此，实验室检查为明确CT感染的主要手段。本研究显示其感染率为5.81%，远远低于UU感染率，与既往报道相一致[5]。NG是导致淋病的病原菌。人类是NG唯一的自然宿主。NG侵入泌尿生殖系统繁殖，男性发生尿道炎，女性引起尿道炎和子宫颈炎。如治疗不彻底，可扩散至生殖系统。胎儿可经产道感染造成新生儿淋病性急性结膜炎。本研究2 064例样本中NG阳性样本仅为14例，虽然NG感染率低(0.68%)，但一经诊断，应积极给予治疗。

上述3种病原菌以单一感染为主，单一感染率为92.06%，其次为二重感染，以UU合并CT感染为主，这主要与NG本身感染率很低有关。在年龄分布上，国外学者NAUMENKO等[9]研究报道，20～45岁的人群是性传播疾病的高发人群。本研究数据显示，≤30岁及41～50岁2个年龄段感染率最高，二者间差异无统计学意义(P>0.05)。这可能与≤30岁的年轻女性性生活较频繁，多个性伴侣引起交叉感染有关。而41～50岁的女性处于更年期，体内激素水平波动较大，宫颈状况较差，导致抵抗病原菌感染的能力下降有关。因此，应将这2组人群作为性病防治的重点对象。

笔者前期的工作中对首都医科大学附属北京天坛医院妇科门诊妇女及妊娠妇女HPV感染情况进行了系统的描述(部分数据尚未发表)[10]，此次研究主要针对UU/CT/NG人群中同时进行HPV检测的患者进行了HPV的感染特征分析。结果显示，HPV阳性检出率为18.81%，高于前期研究中该院妊娠妇女(10.41%)及体检妇女(12.84%)的HPV检出率。这与目标人群来源不同有关，因妇科门诊患者一般均有身体不适的症状或体征而来院就诊检查，因此，其具有较高的阳性率。在基因型别及感染类型上均与之前的研究一致[10]。对于UU/CT/NG感染与HPV感染的相关性分析发现，UU/CT/NG阳性组其HPV感染率明显高于UU/CT/NG阴性组(P<0.01)，这说明二者间具有一定的协同感染作用，但相关系数r=0.157，这同时也表明二者相关性一般。

4 结 论

妇科门诊患者性传播疾病病原体感染具有其自身的特点，当患者存在一种病原体感染时，应警惕其是否合并其他病原体感染。早发现、早干预，对保障女性及母婴健康具有重要的意义。