Th9/Th22 比例与小儿哮喘病情严重程度的相关性

张伟 张旭力

哮喘是儿童最常见呼吸系统疾患，近年由于环境污染等因素，发病率呈上升趋势，已严重影响小儿的身心健康与生长发育[1-2]。在临床实践中，通过明确的症状体征、同时排除其他器质性疾病所致喘息胸闷，多可确诊哮喘，但具体哮喘病情严重程度的判断仍存在一定难度。CD4+T细胞是体内调节免疫反应、炎症反应的重要细胞群，其中Th9、Th22是近年来新发现的两种CD4+T细胞亚群，已有研究报道Th9 / Th22失调与肺炎[3]及变态反应性疾病[4]的发生发展密切相关。但是，目前关于Th9、Th22细胞分布在哮喘患儿病情进展中扮演的角色尚不明确。为此，本文将以哮喘患儿为研究对象、具体分析外周血Th9 / Th22比例并探讨其与哮喘病情的内在联系，以期为日后小儿哮喘病情严重程度评估寻找简便的血液学指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年8月—2018年8月本院首诊收治的哮喘患儿98例作为哮喘组，纳入标准：（1）符合中华医学会儿科学会呼吸学组制定的《儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）》中哮喘的诊断标准[5]；（2）年龄5～12周岁；（3）智力与年龄段吻合、可配合相关检查；（4）监护人签署知情同意书。排除标准：（1）合并严重先天性疾患；（2）入组前3月内有下呼吸道感染史；（3）合并严重自身免疫性疾病。另取同期在本院进行体检的健康小儿100例作为正常对照组。

哮喘组中男性50例、女性48例，年龄5～11周岁，平均（8.19±1.25）周岁，足月儿90例、早产儿8例，既往肺炎病史：有26例、无72例；正常对照组中男性51例、女性49例，年龄5～12周岁，平均（8.20±1.31）周岁，足月儿92例、早产儿8例，既往肺炎病史：有23例、无77例。两组小儿的性别、年龄、足月 / 早产、既往肺炎病史等基线资料分布差异无统计学意义（P ＞0.05）。经本院伦理委员会审核、此次研究获批。

1.2 研究方法

1.2.1 Th9/Th22细胞分布比例检测 哮喘组小儿发作期（未经治疗前）、正常对照组小儿体检时，留取空腹外周静脉血标本2.0～3.0 mL，采用流式细胞仪测定其中Th9、Th22细胞分布比例。

1.2.2 哮喘病情相关指标检测 同样留取两组小儿的外周血标本，采用放射免疫法测定其中免疫球蛋白E（immunoglobulin E ，IgE）、半胱氨酰白三烯（ cysteinyl leukotriene ，CysLts）等过敏指标的水平；采用酶联免疫吸附法测定炎症介质单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein -1，MCP-1）、转化生长因子-β1（ transforming growth factor-β1，TGF-β1）、嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）计数。采用肺功能仪测定两组小儿的肺功能参数水平，包括第1秒用力呼气容积（forced expiratory volume in 1 second，FEV1）、呼气峰流速（peak expiratory velocity，PEF）。

1.3 统计学方法 本次研究数据计算所用统计学软件为SPSS 20.0。Th9 / Th22细胞比例、过敏指标、炎症指标、肺功能参数水平属于计量资料，以（均数±标准差）表示，两组间比较选择独立样本t检验。相关性分析采用Pearson检验。计算所得统计值P＜0.05则判定差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Th9/Th22比例

哮喘组患儿外周血中Th9细胞比例、Th22细胞比例均显著高于正常对照组小儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 过敏指标

哮喘组患儿外周血中IgE、CysLts的水平均显著高于正常对照组小儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 炎症指标

哮喘组患儿外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均显著高于正常对照组小儿，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表3。

2.4 肺功能参数

哮喘组患儿的FEV1、PEF水平均显著低于正常对照组小儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

2.5 相关性分析

Pearson检验发现，哮喘患儿外周血中Th9细胞比例与过敏指标IgE、CysLts的水平，炎症指标MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相关，r分别为0.294、0.335、0.273、0.412、0.384；与肺功能参数FEV1、PEF的水平呈负相关，r分别为-0.293、-0.341。哮喘患儿外周血中Th22细胞比例与过敏指标IgE、CysLts的水平，炎症指标MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相关，r分别为0.313、0.235、0.391、0.441、0.367；与肺功能参数FEV1、PEF的水平呈负相关，r分别为-0.277、-0.351。以上P均＜0.05。

表1 两组小儿外周血Th9 / Th22 比值的比较

表1 两组小儿外周血Th9 / Th22 比值的比较

组别 例数 Th9（%） Th22（%）正常对照组 100 0.71±0.09 0.92±0.15哮喘组 98 1.33±0.16 1.58±0.23 t 值 - 33.692 23.963 P 值 - 0.000 0.000

表2 两组小儿外周血过敏指标水平的比较

表2 两组小儿外周血过敏指标水平的比较

组别 例数 IgE（mg/L） CysLts（ng/mL）正常对照组 100 0.67±0.08 21.29±3.40哮喘组 98 2.19±0.35 52.66±7.21 t 值 - 42.317 39.281 P 值 - 0.000 0.000

表3 两组小儿外周血炎症指标水平的比较

表3 两组小儿外周血炎症指标水平的比较

组别 例数 MCP-1（pg/mL） TGF-β1（ng/mL） EOS（×108 个/L）正常对照组 100 29.47±4.51 10.28±1.53 256.81±32.54哮喘组 98 54.23±7.95 34.16±5.22 473.29±58.01 t 值 - 27.023 43.867 32.469 P 值 - 0.000 0.000 0.000

表4 两组小儿FEV1、PEF 水平的比较

表4 两组小儿FEV1、PEF 水平的比较

组别 例数 FEV1（%） PEF（L/min）正常对照组 100 90.12±13.21 381.25±54.92哮喘组 98 78.51±11.32 293.41±59.23 t 值 - 9.191 8.282 P 值 - ＜0.05 ＜0.05

3 讨论

Th9是主要分泌IL-9的CD4+T细胞亚群，其可促进呼吸道中IgE的分泌并增加气道反应性[6-7]；Th22经配体依赖转录因子调节IL-22的表达，具有促进呼吸道上皮修复、缩小炎症反应等作用[8-9]。Th1 / Th2等免疫细胞在哮喘中的作用研究已经开展十分广泛，而Th9 / Th22的作用则尚不明了。文中哮喘患儿外周血中Th9细胞比例、Th22细胞比例均较同龄健康小儿有了大幅提升，说明高表达的Th9、Th22细胞参与哮喘病程，推测Th9高表达直接促进哮喘气道炎症、Th22反应性表达增加是机体的一种自我保护机制。关于Th9 / Th22分布比例与小儿哮喘病情的具体内在联系，下文从过敏反应、炎症反应、肺功能三方面展开阐述。

较多研究认为，哮喘属于I型变态反应，高表达的IgE是哮喘急性发作的典型特征[10-11]，CysLts也是典型的过敏指标，在变态反应性疾病患者中呈高表达，可促进气道平滑肌剧烈收缩以及一系列哮喘症状出现[12]。文中哮喘患儿外周血中IgE、CysLts的水平显著高于健康同龄小儿，这与疾病的变态反应本质吻合。相关性分析指出，哮喘患儿外周血中Th9、Th22细胞分布比例与上述过敏指标水平呈正相关，说明Th9、Th22细胞分布比例可客观反映哮喘患儿的过敏严重程度。

变态反应发生后小儿气道内大量炎症介质合成分泌，是气道高反应性出现及维持的重要机制，具体气道局部及全身炎症反应程度与哮喘病情间存在良好的相关关系。MCP-1、TGF-β1是单核巨噬细胞及白细胞等分泌的炎症因子；EOS是典型的炎症细胞，相关的研究已经证实其在哮喘患儿中存在异常高表达。文中哮喘患儿外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平显著高于健康小儿，与既往研究结论吻合。相关性分析指出，哮喘患儿外周血Th9、Th22细胞比例与上述炎症指标的水平呈正相关，说明Th9、Th22细胞比例可客观反映哮喘患儿的全身炎症反应程度、间接反映哮喘病情严重程度。

哮喘反复发作可导致患儿通气功能发生显著异常，主要表现为FEV1、PEF水平下降，这也是临床症状不典型患儿进行疾病诊断的最主要肺功能参数指标。文中哮喘患儿的FEV1、PEF水平低于健康小儿，相关性分析进一步发现哮喘患儿外周血中Th9、Th22细胞分布比例与上述肺功能参数水平呈负相关，说明Th9、Th22细胞分布比例可客观反映哮喘患儿的肺功能损伤程度，也同样间接反映哮喘整体病情严重程度。

综上可知，哮喘患儿存在外周血Th9、Th22细胞分布比例的异常增高，且其增高幅度与患儿过敏程度、全身炎症反应程度及肺功能损伤程度均直接相关，可能是反映哮喘病情的有效指标之一。