胆囊腺癌中VEGF和Ki67的表达及意义

李双标 李胜水 田甜

【摘要】目的：对VEGF和Ki67在胆囊腺癌中的表达和意义进行分析和讨论。方法：对我院切除胆囊腺的患者进行研究，利用SP法研究45例患者VEGF和Ki67在胆囊腺癌中的表达与临床关系。结果：VEGF在胆囊腺癌中的表达率为53.3%（24/45），Ki67在胆囊腺癌中的表达率为60%（27/45）。通过研究分析可以发现淋巴结转移和浸润深度使得VEGF和Ki67在胆囊腺癌中呈现正相关的表达特点。P<0.05。结论：对于胆囊腺癌的转移和浸润，VEGF和Ki67有着重要的影响，其在胆囊腺癌中表达的越高作用越大，通过对VEGF和Ki67进行检测能够对胆囊腺癌的预后进行判断。

【关键词】胆囊腺癌;VEGF;Ki67

【中圖分类号】R174+.6      【文献标识码】A     【文章编号】2095-6851（2019）08-045-01

引言

胆囊结石、胆管异常以及胆囊炎对于胆囊腺有着重要影响，常无临床表现。在胆囊癌组织中，胆囊腺癌是一种比较常见的组织类型，在早期就容易发生转移，而且预后较差。本文通过SP法对VEGF和Ki67在胆囊腺癌中的表达和意义进行研究和分析。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取时间为2012年12月至2018年12月的45例在我院进行手术切除患者的胆囊腺癌病理存档蜡块。所有患者都被确诊是胆囊腺癌，共有26例男性患者和19例女性患者，所有患者的年龄都小于68岁，大于28岁。在胆囊腺癌中有18例一级患者，有23例二级患者，其中共有22例无浆膜侵犯患者;在所有患者中，在胆囊颈和胆总管周围淋巴结发生转移的患者一共18例，此外还有27例患者在研究时没有发生胆总管周围淋巴结的转移。在根据腺癌分级时，能够分为两大组，一组是高分化组，共有32例患者，一组是低分化组，共有13例患者。在进行手术之前，所有的患者都没有经过化疗、放疗、生物治疗等，所以在其它方面没有明显差距。在选用抗体时，即用型鼠抗人Ki67单克隆抗体、，即用型鼠抗人VEGF单克隆抗体、超敏免疫组织化学SP检测试剂以及即用型DAB显色剂。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化染色方法

对肿瘤细胞中的抗原进行检测时利用的是免疫组织化学SP方法进行免疫组织化学染色。对于研究的组织手术标本必须经过离体三十分钟后再在浓度为10%的福尔马林缓冲液中进行固定，对于时间上也有一定的要求，必须要达到二十四小时以上，但不能超过四十八小时。之后在包埋时利用石蜡的方式来进行，将切片的厚度保持在4μm，再对切片进行脱蜡、水化处理，之后可以利用抗原修复法进行修复。所谓的抗原修复法，主要是指EDTA抗原修复液需要煮沸，在煮沸时应该采用直接煮沸的方式来进行。一抗室温下六十分钟或者在温度为四度的冰箱中进行过夜处理，DBA显色、苏木精复染、封片。

1.2.2 阳性结果判定

观察VEGF在细胞质中的表达时，主要通过细胞质的颜色来判定，一般情况下会发现颜色呈现棕黄色或者黄色。在进行评分时，主要根据大多数细胞呈现的颜色来进行判断，并且要根据染色体的强度来进行评分：当细胞没有着色时为0分;当细胞的颜色为淡黄色时为1分;2分对应的是呈现棕黄色的细胞;如果是呈现棕褐色的细胞那么就是3分。细胞颜色越深，评分结果越高。之后为了计算在癌细胞当中阳性细胞的占比，需要在高倍视野下观察癌细胞，选取的癌细胞至少应该超过500个，并采用随机计数的方式：0分对应的是癌细胞中阳性细胞占比为0～5%的;1分对应的是癌细胞中阳性细胞占比为6%～25%的;2分对应的是癌细胞中阳性细胞占比为26%～50%的;3分对应的是癌细胞中阳性细胞占比为51%～75%的;4分对应的是癌细胞中阳性细胞占比超过75%的。将上述两种得分相加，如果总和小于三分，那么结果就为阴性;相反的，如果两个结果的总和大于或者等于三分，那么结果就为阳性;Ki67定位于细胞核，观察细胞核的颜色，阳性表达对应的颜色是棕黄色或者黄色。利用高倍视野观察癌细胞时，数量选取500个以上，并采用随机计数的方式进行观察。阳性病例的判定结果应该依赖于阳性细胞的比例等于或者超过百分之十五这一条件。

1.3 数据统计

在胆囊腺癌中，VEGF呈现阳性的表达为53.3%，Ki67呈现阳性的表达为60%，研究的病例分别为24例和27例。

2 结果

3 讨论

根据上述表格可以发现，对于胆囊腺癌患者而言，转移和复发是引起这种病症的主要原因。在肿瘤间质内，新生血管的生成能力是引起恶性肿瘤增殖和复发的主要基础。通过研究可以发现，VEGF是肿瘤细胞分泌的，对肿瘤血管会起到刺激性作用，而且在一定程度上还能够对肿瘤基质的形成起到促进作用，在恶性肿瘤的转移和侵袭上让其产生更严重的恶化。人类的染色体有很多条，其中Ki67基因在全部染色体中位于第10号的位置。Ki67基因的组成中有分子量较大的蛋白质，还有两条肽链，其中大分子蛋白质的分子量分别为345000和395000。在DNA的合成当中，Ki67基因也发挥着重要的作用，在医学研究中，经常用来当做指标检测恶性肿瘤细胞增殖活性。

参考文献：

[1] 王全志，郭艳风，韩芳毅，王会英.p53与DNA拓扑异构酶Ⅱα在胆囊腺癌中的表达及临床意义[J].南昌大学学报（医学版），2017，（01）：30-34.

[2] 王平凡，张东生，李岚，邱娜，张晶晶，卫陇，拓晓娟.MUC5AC、CDX-2、Ki67在胆囊黏膜肠上皮化生及胆囊腺癌中的表达及其意义[J].现代肿瘤医学，2016，（21）：3433-3436.