椒目的生药学研究

陈舒忆　唐艺　赵应梅　陆雅丽　莫我跃

【摘 要】目的：对椒目进行生药学鉴定研究，为椒目的质量标准提供研究依据。方法：采用基源鉴定、性状鉴别对椒目的来源、性状进行鉴别;采用石蜡切片和粉末制片法研究椒目的显微结构。结果：椒目呈类圆球形、半球形或卵形，表面黑色具光泽。显微结构清晰，表皮细胞长方形，石细胞众多，内种皮细胞有明显网状纹理，子叶海绵组织细胞排列疏松。粉末棕褐色，可见种皮表皮细胞、石细胞、内种皮细胞等。结论：椒目原植物形态特征明显，性状特征及显微构造显著，其生药学研究可为椒目的质量标准提供充分的科学依据。

【关键词】椒目;生药学;性状鉴别;显微鉴别;石蜡切片

中图分类号： R282.5文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2019）20-0224-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.20.104

椒目Semen Zanthoxyli为芸香科植物花椒的干燥成熟种子。立秋前后果熟时采收，晾干，待果实开裂，果皮与种子分开时，取出种子即得。据记载，该药性味苦、辛，温。小毒。归脾、肺、肾、膀胱经，有利水消肿，祛痰平喘等功效，用于水肿胀满、哮喘、痰饮喘逆等症[1]，始载于《本草经集注》。现对椒目的基源、药材性状、横切面和粉末的显微鉴别特征进行生药学研究，旨在建立椒目的真伪鉴别方法，并为其质量标准的修订提供依据。

1 材料和仪器

（1）材料：椒目采集于贵州贞丰、贵州遵义、陕西凤县等地，并经贵州中医药大学魏升华教授鉴定。

（2）仪器设备：Leica DM2500光学生物显微镜和Leica S60立体显微镜（德国Leica Microsystems）;Leica RM2245半自动轮转切片机（德国Leica Biosystems）。

（3）试剂试药：无水乙醇、乙醇、二甲苯、番红、固绿等（国药集团化学试剂有限公司）。

2 方法

（1）基原鉴定对原植物形态进行观察，制作蜡叶标本，进行原植物鉴定，并描述植物形态特征。

（2）性状鉴别使用游标卡尺测量椒目果实和种子的长度、直径，采用肉眼和立体显微镜观察椒目的形状、大小、颜色、表面特征、质地、断面、气味等。

（3）显微鉴别采用石蜡切片法[2]研究椒目的显微结构。取椒目，煮沸数分钟后，在水中浸泡过夜，放入70% FAA固定液（70%的乙醇90ml，冰醋酸5ml，37%甲醛5ml）中固定24h，依次在不同浓度的乙醇中逐级脱水，乙醇浓度按顺序依次为70%、80%、90%、95%、100%，每次1h。脱水后先用无水乙醇-二甲苯（1：1）浸泡1h;再用二甲苯浸泡1h，反复2次。后置于65℃恒温箱中浸蜡，每隔30min加固体石蜡1次，反复3次，置换成纯石蜡后在恒温箱中放置6h，使石蜡充分浸入种子中。包埋后修块、切片。切好的蜡片在展片台上展开、贴片，再置50℃烘箱中烘干。在二甲苯中脱蜡，乙醇复水后番红染色1h左右，60%、70%、80%、90%的乙醇逐级脱水后，入固绿溶液中染色2min，脱水后二甲苯透明封片。采用Leica DM2500光学生物显微镜观察、拍照，图片均用Leica LAS V4.3显像系统处理。

3 结果

1）植物形态特征花椒落叶灌木或小乔木，枝有短刺，小枝上的刺基部宽而扁且劲直的长三角形，当年生枝被短柔毛。叶有小叶5-13片，叶轴常有甚狭窄的叶翼;小叶对生，无柄，卵形，椭圆形，稀披针形，位于叶轴顶部的较大，近基部的有时圆形，长2-7厘米，宽1-3.5厘米，叶缘有细裂齿。叶背基部中脉两侧有丛毛或小叶两面均被柔毛，中脉在叶面微凹陷，叶背干后常有红褐色斑纹。花序顶生或生于侧枝之顶，花序轴及花梗密被短柔毛或无毛;花被片6-8片，黄绿色，形状及大小大致相同;雄花的雄蕊5枚或多至8枚;退化雌蕊顶端叉状浅裂;雌花很少有发育雄蕊，有心皮3或2个，间有4个，花柱斜向背弯。果紫红色，单个分果瓣径4-5毫米，散生微凸起的油点，顶端有甚短的芒尖或無。花期4-5月，果期8-10月[3]。

2）性状特征本品呈类圆球形、半球形或卵形，种脐斜平，直径3-5毫米。表面黑色具光泽，可见细密的鱼鳞状纹理，有的部分表皮脱落，露出黑色鱼网状纹理。质坚硬，剖开可见淡黄白色的胚乳及两枚子叶，显油性。气香，味微麻、辣。如图2所示。

3）显微特征

（1）本品横切面：表皮细胞长方形，栅状，大小相近，外被有角质层，其下有众多石细胞，相聚成带，细胞形状各异，大小不一，纹孔及孔沟清晰。内种皮细胞数列，有明显的网状纹理，木化。胚乳细胞多列，多角形，细胞壁薄。子叶表皮细胞1-2列，海绵组织细胞排列较疏松。胚乳细胞及子叶细胞内含油滴及糊粉粒[4-5]。如图3所示。

（2）粉末特征本品粉末棕褐色，种皮表皮细胞多角形，棕红色，长28-80μm，直径20～58μm，垂周壁念珠状增厚，少数均匀增厚，有的细胞较大，内充满黄棕色透明分泌物。石细胞类圆形、类方形或椭圆形，棕黄色，纹孔和孔沟清晰。内种皮细胞淡黄色，网状增厚明显，木化。如图4所示。

4 讨论

显微鉴定是中药材真伪鉴别的重要方法，是中药鉴定必不可少的手段之一。但在椒目石蜡切片的制作过程中发现，椒目硬度大，溶液不宜渗入，切片时易脱落，切片难度大。通过研究比较，新鲜椒目相较于干燥的椒目，更易制作出效果良好的石蜡切片。在石蜡切片的制作过程中，表皮细胞易脱落，栅状结构易破碎，制作时应格外注意。本文对椒目进行了详细的生药学研究，为椒目质量标准的制定提供参考依据。

【参考文献】

[1]江苏新医学院，中药大辞典（上册）[M].上海：上海人民出版社，1977：2292.

[2]赵中振，陈虎彪.中药显微鉴定图典[M].福州：福建科学技术出版社，2016.

[3]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京：科学出版社，1996.

[4]曹蔚，薛美玲，谢艳华，等.椒目种皮的石蜡切片制备方法及显微鉴别研究[J].陕西中医，2012，33（3）：352-354.

[5]王少平.椒目质量标准研究及椒目脂肪酸SFODLPME_GC测定方法的建立[D].山西医科大学，硕士学位论文，2017.