米玛次仁 次仁卓嘎 张一帆 黄康艳
(1西藏林芝市波密县农技推广服务站,西藏林芝850400;2广东省微生物研究所,广东广州510000)
天麻(Gastrodia elata)是一种与蜜环菌共生的兰科植物,其地下块茎为药用部位。天麻虽然不是传统的藏药(《国家藏药标准全书》中未收录),但在汉族的药物典籍中,天麻被奉为草药中的“上品”。《中国药典》2015版中描述天麻“用于小儿惊风,癍痫抽搐,破伤风,头痛眩晕,手足不遂,肢体麻木,风湿痹痛”。
20世纪60年代天麻首次人工栽培成功,到70年代天麻实现无性繁殖[1],其栽培技术开始推广至全国适合天麻种植的地区。目前天麻主要产区为云南昭通、贵州毕节、四川宜宾、泸州和凉山地区[2]。而包括西藏在内的某些地区,即使具备栽培天麻的自然环境可能由于经济文化、用药习惯的原因,尚未被认定为天麻产区[3]。
天麻素和对羟基苯甲醇是天麻中的主要小分子药理成分,其含量是评价天麻质量的主要指标。天麻素具有调节血管舒张、抑制血栓形成、保护神经细胞、改善肌萎缩侧索硬化症细胞活力等作用[4-5],其前体对羟基苯甲醇也有类似的功能[6-7]。而天麻的大分子成分——多糖,则有抗氧化、降血压、免疫调节等功效[8]。
野生天麻的天麻素含量普遍高于人工栽培天麻[9]。但野生天麻来源复杂、价格较高,而人工栽培天麻产量稳定,来源明确,质量可控。因此,笔者对波密县人工栽培天麻、天麻素等进行检测,检验其是否符合药材质量的现有要求。
波密县人工栽培天麻两份,一份收集于2016年11月,记代号为GeA-16;另一份收集于2017年11月,记代号为GeA-17;市售人工栽培天麻一份,购买时间为2017年11月,产地为贵州,记代号为GeA-G。所有样品均4℃下保存。
水分测定参照《中国药典》(2015版)通则0832水分测定法中的烘干法;灰分测定参照《中国药典》(2015版)通则2302灰分测定法中的总灰分测定法;二氧化硫残留量测定参照《中国药典》(2015版)通则2331二氧化硫残留量测定法中的气相色谱法;天麻素和对羟基苯甲醇含量测定参照《中国药典》(2015版)中天麻品名下天麻素和对羟基苯甲醇的测定方法;粗多糖含量测定参照《中国药典》(2015版)中铁皮石斛品名下粗多糖含量的测定方法。
选取大小较为一致的样品进行试验(图1)。三种样品都呈长圆形至椭圆形,长7~9 cm,宽3~4 cm,表面淡黄棕色,有纵皱纹,顶端有残留茎基,另一端有圆脐形疤痕。干燥、结实、具有天麻特有的气味。三种样品从外观较难主观区分。
经测定,三种天麻样品都符合药典中规定的检测指标要求。其中GeA-17中天麻素和对羟基苯甲醇含量总和在三个样品中最高(0.62%),并超过药典要求(0.25%)的两倍;其天麻素含量(0.54%)也是三个样品中最高。GeA-17灰分含量最低,为GeAG的一半以下。GeA-G二氧化硫残留量较高,但仍然仅是药典限量要求的十分之一左右。GeA-16和GeA-17的二氧化硫残留量都低于10 mg/kg。GeAG粗多糖含量在三个样品中含量最高,分别是GeA-16和GeA-17的1.5倍和2.7倍。
表1 天麻中各种质量指标的测定
按药典方法测定波密县天麻的天麻素和对羟基苯甲醇,经过工作站修正积分,天麻素在11.8~190.0 μg/mL线性良好(峰面积=21.020094×浓度+13.58277,R2=1.00000);对 羟 基 苯 甲 醇 在 5.6~90.0 μg/mL线性良好(峰面积=55.5249013×浓度+15.752843,R2=1.00000)。天麻标准品(混标,图2A)和检测样品(图2B)中的天麻素、对羟基苯甲醇两主峰信号较强、分离度良好,峰形狭窄、对称,杂峰少。而市售天麻提取物中仅发现天麻素,未发现对羟基苯甲醇。
图2 天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的HPLC图谱
曾勇等[10]证明了在海拔1400~1800 m,红、绿天麻都是在较高海拔中生产时产量和品质上更优。因此,高海拔可能是生产优质天麻的一个天然优势。波密县具有这样独特的气候环境,满足生产优质天麻的周年生产环境条件。
结果显示,波密县天麻质量符合药典的指标要求,其中天麻两大活性物质含量总和大幅超过药典规定,也超过了地方标准《地理标志产品大方天麻》DB 52/T 1118~2016的规定(≥0.30%);就天麻素而言,GeA-17和GeA-6超过了国家标准《地理标志产品昭通天麻GB/T 19776-2008的规定(≥0.35%),表明波密县天麻活性物质含量较高。
试验中天麻素含量较高(2009年报道三样品天麻素含量0.175%~0.235%;2011年报道六样品天麻素含量0.040%~0.228%;2012年报道人工栽培样品天麻素含量0.20%)[11-13],笔者的2017年样品(GeA-17)也是比同一区域2016年样品(GeA-16)的天麻素含量高。可能随着栽培技术的成熟,栽培效果得到提高。
天麻多糖与天麻外观商品等级具有正相关性的理论[14],可能会给消费者带来一定误导。因为笔者发现,天麻多糖含量高的样品,天麻素和对羟基苯甲醇含量不一定也高。表明天麻的综合药效物质含量可能和外观商品等级不挂钩。另外,天麻多糖含量的检测未有标准方法,考虑到天麻含量超过10%[15],因此选用了铁皮石斛中多糖的检测法。然而此法仍未能完全排除淀粉的影响。再加上天麻在干燥[16]和提取[17]过程中,淀粉都会通过物理反应影响多糖检测。因此所测得的天麻多糖可能是近似值,天麻的多糖检测仍需要一个标准的方法。
波密县人工栽培天麻各项指标符合药典要求。另外,天麻生产年份或产地可能较难从外观商品性状中体现,但其中的活性物却存在较大差异。