AFP、AFU、TSGF联合检测在早期肝癌中的诊断效能

于洪远，刘淑明，李兵

北京航天总医院检验科，北京100076

原发性肝癌是起源于肝细胞或胆管上皮细胞的消化系统恶性肿瘤，其起病隐匿，进展较快，预后差。有文献报道，中国每年死于肝癌的患者数量占全球肝癌死亡人数的51%[1]，早期诊断对降低肝癌的病死率有着重要的意义。血清肿瘤标志物检测是诊断早期肝癌的重要手段，不仅可提高诊断效率，还可为疗效及预后的评估提供参考，与影像学检查及肝穿刺活检比较，其具有经济、高效及易于操作等优点[2-3]。甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）是较早发现并用于早期肝癌诊断的常用肿瘤标志物，但有研究证实部分肝损伤及胚胎源性肿瘤患者也存在血清AFP水平升高，AFP单独检测存在不同程度的漏诊和误诊，诊断价值不高[4]。因此，寻找更好的肿瘤标志物对早期肝癌的诊断十分必要。本研究分析了AFP、α-L-岩藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU）和肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factor，TSGF）对早期肝癌的诊断效能，旨在为早期肝癌的诊断提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月至2017年12月于北京航天总医院诊治的早期原发性肝癌和肝硬化患者的临床资料。纳入标准：①早期原发性肝癌患者的诊断符合《原发性肝癌的临床诊断与分期标准》[5]中原发性肝癌的诊断标准，临床分期为Ia～Ib期；②肝硬化患者的诊断符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[6]中乙型肝炎肝硬化的诊断标准；③肝癌患者未接受过介入治疗或化疗等；④临床资料完整。排除标准：①合并妊娠；②合并肝脏占位性病变或其他恶性肿瘤。根据纳入、排除标准，共纳入80例早期原发性肝癌患者（早期肝癌组）和78例肝硬化患者（慢性肝病组）。早期肝癌组80例患者中，男48例，女32例；年龄为 33～80岁，平均年龄为（52.44±10.38）岁。慢性肝病组78例患者中，男45例，女33例；年龄为 31～81岁，平均年龄为（54.14±11.03）岁。选取同期76例健康体检者（对照组）的体检结果为对照，其中男43例，女33例；年龄为32～82岁，平均年龄为（51.13±10.76）岁。3组受试者的年龄、性别比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治疗方法

80例肝癌患者均行根治性肝切除术治疗，肝硬化患者入院后进行抗病毒治疗及相关对症支持治疗。

1.3 观察指标及评价标准

所有肝癌和肝硬化患者均于入院次日清晨接受了血清AFP、AFU、TSGF检测。AFP采用电化学发光法进行检测，AFU采用生化比色法进行检测，TSGF采用ELISA双抗夹心法进行检测。阳性判定：AFP＞25µg/L，AFU＞40 U/L，TSGF＞64 U/ml。联合检测结果的判定：任一指标检测结果为阳性，则联合检测结果为阳性；所有指标检测结果均为阴性，则联合检测结果为阴性。依据根治性肝切除术后病理结果判定真阳性及假阴性例数，灵敏度=真阳性例数（/真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数（/真阴性+假阳性）例数×100%，准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数×100%，约登指数=灵敏度+特异度-1。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件分析数据。计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用方差分析，两组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组受试者血清AFP、AFU、TSGF表达情况的比较

3组受试者的血清AFP、AFU、TSGF表达水平及阳性表达率比较，差异均有统计学意义（P＜0.01）；早期肝癌组患者的血清AFP、AFU、TSGF表达水平及阳性表达率均高于慢性肝病组和对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；慢性肝病组患者的血清AFP、AFU、TSGF表达水平及阳性表达率均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1、表2）

表1 3组受试者血清AFP、AFU、TSGF表达水平的比较（±s）

表1 3组受试者血清AFP、AFU、TSGF表达水平的比较（±s）

注：a与对照组比较，P＜0.05；b与慢性肝病组比较，P＜0.05

组别AFP（µg/L）AFU（U/L）TSGF（U/ml）对照组（n=76）慢性肝病组（n=78）早期肝癌组（n=80）F值P值5.07±1.24 29.32±7.16a 157.45±40.78a b 900.534 0.000 15.16±4.95 32.53±7.81a 162.54±51.09a b 555.270 0.000 20.98±5.75 43.51±10.09a 72.39±15.67a b 403.328 0.000

表2 3组受试者血清AFP、AFU、TSGF阳性表达情况的比较[n（%）]

2.2 早期肝癌组AFP阴性患者的AFU、TSGF阳性表达率

早期肝癌组患者中AFP阴性29例，其中TSGF、AFU、AFU+TSGF检测的阳性表达率分别为68.97%（20/29）、82.76%（24/29）、86.21%（25/29）。

2.3 血清AFP、AFU、TSGF单独及联合检测诊断早期肝癌效能的比较

在单项诊断和联合诊断中，AFP+AFU+TSGF诊断早期肝癌的灵敏度、准确度、约登指数均最高，分别为95.00%、89.76%、0.81；AFP+AFU诊断早期肝癌准确度与AFU相同，均为89.32%，仅次于AFP+AFU+TSGF；AFP+AFU诊断早期肝癌的灵敏度、约登指数均仅次于AFP+AFU+TSGF，分别为91.25%、0.80；AFU诊断早期肝癌的特异度最高，为94.16%。（表 3）

表3 AFP、AFU、TSGF单独及联合检测诊断早期肝癌的效能

3 讨论

肿瘤标志物是指特异性存在于肿瘤细胞，由肿瘤组织或细胞相关基因异常表达产生或是人体对肿瘤产生免疫反应，进而产生的在正常人体组织中含量极少，不易被检测到的一类物质，其含量可反映肿瘤的发生、发展，有助于明确诊断、监测疗效及评估预后[7]。早期原发性肝癌症状不易被发现，多数患者明确诊断时疾病已进展至中晚期，预后较差。随着新的肿瘤标志物的应用和生物检测技术的不断发展，越来越多的早期肝癌被诊断[8]，显著改善了患者的预后，提高了生存率。有研究显示，肿瘤直径≤5 cm的早期肝癌患者，经手术治疗后5年生存率可达55.8%[9]，因此寻找更好的肿瘤标志物对提高早期肝癌的诊断率有着重要的意义。

本研究中早期肝癌组患者的血清AFP、AFU、TSGF表达水平及阳性表达率均高于慢性肝病组和对照组（P＜0.05），慢性肝病组患者的血清AFP、AFU、TSGF表达水平及阳性表达率均高于对照组（P＜0.05），提示AFP、AFU、TSGF可能是早期肝癌诊断的有效指标。

AFP是胚胎时期由卵黄囊和肝脏细胞分泌的一类蛋白质，其在健康人血清中含量极微，不能被检测。20世纪70年代发现肝癌细胞可分泌AFP，之后AFP检测在临床上被广泛应用。大量的研究证实，AFP是肝癌诊断的有效血清肿瘤标志物，约70%的肝癌患者血清AFP水平升高[10-12]。本研究中AFP单项诊断肝癌的灵敏度为63.75%。但有研究发现，AFP在部分消化系统肿瘤、生殖系统肿瘤、肝炎肝硬化患者及妊娠期女性血清中同样可被检测，同时部分肝癌患者血清中AFP水平正常，因此存在误诊和漏诊。AFU是一种广泛存在于人体各器官细胞及体液中的溶酶体酸性水解酶，在肝癌患者血清中显著升高。有研究发现，AFU诊断早期肝癌的灵敏度高于AFP，对早期肝癌诊断有重要意义[13]，本研究中，AFU诊断早期肝癌的灵敏度为80.00%，高于AFP的63.75%，与上述研究结论一致。TSGF是由肿瘤血管生成并分泌的一类物质，多种肿瘤患者发病初期血液中TSGF水平升高，有助于早期肝癌的诊断，但其特异度较差[14]。

AFP是目前应用最广、最常见的肝癌肿瘤标志物，血清AFP水平与肝功能、病灶大小及血管侵袭程度有关，对早期肝功能正常及无血管侵袭的肝癌敏感性较低。本研究中，29例早期肝癌患者的血清AFP阴性，其中AFU检测的阳性表达率为82.76%，高于TSGF的68.97%，AFU+TSGF联合检测的阳性表达率为86.21%，由此可见，联合检测有良好的互补作用，AFU、TSGF对早期肝癌的诊断有着重要的价值。

单项肿瘤标志物检测存在不同程度的误诊和漏诊，联合检测可提高诊断效能。本研究中，AFP+AFU+TSGF诊断早期肝癌的灵敏度、准确度、约登指数均最高，分别为95.00%、89.76%、0.81，结果表明联合检测可显著提高诊断肝癌的灵敏度和准确度等，减少早期肝癌的漏诊，但其特异度为85.71%，低于AFU单项诊断，考虑与检测方法有关。本研究采用平行试验，平行试验在提高灵敏度同时会降低特异度，而系列试验特异度较高，但会降低灵敏度[15]，系列试验有待进一步研究。

综上所述，AFP、AFU、TSGF联合检测有良好的互补作用，可提高诊断肝癌的灵敏度和准确度，具有更高的诊断价值，对早期肝癌诊断有重要的意义。