烟草杀虫剂和除草剂药害修复剂筛选试验

沈会芳，蒲小明，张景欣，孙大元，林壁润

（广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室，广东 广州 510640）

【研究意义】烟草是我国重要的经济作物，杨静等对黔东南州植烟区的368户烟农农药使用情况进行了问卷调查，显示当前烟草种植中存在用药行为不规范、施药技术不科学等问题［1］。广东省烟区主要县市化学农药销售和使用种类调查后发现，烟区存在使用高毒或高残留的有机磷等农药现象，如灭多威等［2］。农药使用有严格的要求，若用量过大、浓度过高，就可能产生药害，为减少农药药害给烟草生长造成的损失，筛选烟草药害有效修复剂势在必行。【前人研究进展】杀虫剂、杀菌剂多引起烟草急性药害，发生快，表现为叶片褪绿斑点或斑驳。刘世超等研究12种杀菌剂对烟草苗期的药害，表明粉剂型药剂浓度高于正常用量容易产生药害，且药害症状明显，叶面喷雾处理的药剂容易出现药害［3］。对杀虫剂、杀菌剂药害可喷施赤霉素、植保素、腐殖酸等以减轻药害［4］。除草剂残留药害是对烟草危害最大的农药药害，通常观察到药害症状时，作物已经出苗甚至到了种植后期，造成了巨大损失。近年来，湖南、四川、福建、江西、广东、安徽等产区烟叶生产多次出现除草剂药害，其中以二氯喹啉酸和磺酰脲类除草剂残留药害最为普遍。二氯喹啉酸在土壤中持效期长，对水稻生长安全，但对茄科作物如烟草极易产生药害。陈泽鹏等研究表明，二氯喹啉酸半衰期为22 d，处理后180 d，土壤中仍检测到0.069～0.085 mg/kg的残留量，推论稻田中一次施用二氯喹啉酸，烟草的安全间隔期为342 d［5］，因此水稻施用的二氯喹啉酸易对下茬烟草造成药害。磺酰脲类除草剂如苄嘧磺隆、砜嘧磺隆、氯嘧磺隆、苯磺隆和烟嘧磺隆等也致烟株产生药害，持续时间长，不易恢复［6-8］。我国对二氯喹啉酸等药害的治理措施有物理化学降解等，如客土法、施用活性炭和生石灰［9-10］，另外利用微生物降解除草剂，因其绿色安全成为国内外研究热点。其中，Lu等从原药生产厂的污水处理池中分离得到LS（Ochrobactrumsp.）和WZI菌（Bukhlderia cepecia），2个菌株能高效降解二氯喹啉酸，降解率为 95.7%和 93.5%［11-12］。一些真菌黑曲霉、青霉、假单胞菌、浅灰链霉菌具有降解磺隆类除草剂的作用，但目前降解菌的研究仅局限于菌株的分离筛选和室内试验，还未有成功应用于大田的报道［13］。【本研究切入点】烟草发生药害，及时施用修复剂可有效缓解，减少损失。因此，本研究就几种常见烟草杀虫剂和除草剂药害修复剂进行筛选。【拟解决的关键问题】筛选出修复烟草上灭多威、辛硫磷、吡虫啉、二氯喹啉酸和苄嘧磺隆药害的修复剂，为解决生产中烟草农药药害问题提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试药剂：90%灭多威可溶性粉剂，广东中迅农科股份有限公司；40%辛硫磷乳油，山东埃森化学有限公司；70%吡虫啉水分散粒剂，拜耳作物科学（中国）有限公司；50%二氯喹啉酸可湿性粉剂，江苏江南农化有限公司；10%苄嘧磺隆可湿性粉剂，浙江天丰生物科学有限公司；微量元素水溶性肥，山东嘉丰海洋生物科技有限公司；0.004%芸苔素内酯水剂，昆明云大科技农化有限公司；植保素，广东省佛山市化工产品技术开发公司；20%赤霉酸可溶性粉剂，浙江钱江生物化学股份有限公司；甲壳素有机水溶性肥，深圳海苒化学科技有限公司；氨基酸肥，漯河百威生物技术有限公司；生物菌肥，山东华诺联邦农化有限公司；活性炭，东莞市洪笙活性炭有限公司；生石灰，广州市庆康化工有限公司；解草酯，北京普博欣生物科技有限责任公司；吡唑解菌酯，北京普博欣生物科技有限责任公司。

供试烟草品种粤烟98，由南雄烟草研究所提供，温室播种，育苗，于5～6片真叶期移栽。供试土壤取自广东省农科院大丰基地试验田，未施用任何农药，经自然风干过筛备用。

1.2 试验方法

1.2.1 杀虫剂药害修复剂的筛选 称取等重土壤装盆，移栽5～6片叶烟苗，移栽后20 d喷施杀虫剂，待烟草出现明显药害后，按说明书推荐使用浓度喷施修复剂，20%赤霉酸可溶性粉剂稀释10 000倍，0.004%芸台素内酯水剂稀释500倍，植保素稀释1 000倍，微量元素肥稀释500倍，氨基酸肥稀释500倍，甲壳素有机水溶性肥稀释1 000倍喷于烟草植株，以喷施清水为对照。每个处理4次重复，每个重复5株烟苗，药后3、6、9 d调查药害发生程度。试验于2017年6—12月在广东省农科院大丰基地试验大棚内进行。

为方便数据统计，对杀虫剂造成的烟草药害进行分级，0级：烟草叶片无药害斑；1级：叶片上有药害斑，占叶面积20%以下；2级：叶片上有药害斑，占叶面积20%～40%；3级：叶片上有药害斑，占叶面积40%～60%；4级：叶片上有药害斑，占叶面积60%～80%；5级：叶片上有药害斑，占叶面积80%以上；

1.2.2 除草剂药害修复剂的筛选 称等重土壤，加入用水稀释的除草剂制剂，混合均匀，使土壤中除草剂达到同一致药害浓度；同时把修复剂稀释加入土壤，混合均匀，使土壤中修复剂达到推荐使用浓度，装盆，移栽5～6片叶烟苗，以不施除草剂和修复剂为空白对照，以只施除草剂无修复剂处理为除草剂对照。20%赤霉酸可溶性粉剂稀释10 000倍，0.004%芸台素内酯水剂稀释500倍，植保素稀释1 000倍，微量元素肥稀释500倍，生物菌肥50 mg/kg，生石灰150 mg/kg，活性碳80 mg/kg，解草酯1 mg/kg，吡唑解草酯4 mg/kg，每个处理4次重复，每个重复5盆烟苗。在温室中种植10、20、30 d后，分别测量烟草中部叶片的叶长、叶宽和株高，计算抑制率。选取效果较好的修复剂，分设5个处理浓度，按上述方法进行试验。试验于2018年3—10月在广东省农科院大丰基地试验大棚内进行。

采用DPS软件对试验结果用邓肯氏新复极差多重比较法（DMRT）进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2.1 杀虫剂药害修复剂的筛选

2.1.1 灭多威药害修复剂的筛选 把灭多威制剂按有效成分配制为500 μg/mL溶液，均匀喷于烟草植株上，药后2 d可见叶片出现灰白色灼伤型不规则药害斑，此时喷施6种修复剂。从表1可以看出，6种修复剂对灭多威药害均有一定的修复作用，微量元素肥的修复效果最好，药后9 d对灭多威药害的修复率达47.28%，其次是氨基酸肥，药后9 d修复率达42.71%。但赤霉酸、芸台素内酯和植保素对药害的修复效果相对较差，药后9 d对灭多威药害的修复率低于20%。因此，对灭多威引致烟草药害的修复剂可以选择微量元素肥和氨基酸肥。

2.1.2 辛硫磷药害修复剂筛选 把辛硫磷制剂按有效成分配制为500 μg/mL溶液，均匀喷于烟草植株上，药后3 d可见烟草叶片出现黄白色药害斑，类似烟草花叶病症状，此时喷施修复剂。在6种修复剂中，微量元素肥的修复效果最好，药后9 d对辛硫磷药害修复率达54.43%，其次是氨基酸肥，修复率达44.72%，甲壳素肥和赤霉酸的修复效果次之，修复率为33.08%和27.75%。芸台素内酯和植保素对药害的修复效果相对较差，药后9 d药害修复率低于20%（表2）。因此，对辛硫磷引起的烟草药害的修复剂可以选择微量元素肥和氨基酸肥。

2.1.3 吡虫啉药害修复剂筛选 把吡虫啉制剂按有效成分配制为350 μg/mL溶液，均匀喷于烟草植株上，药后3 d可见烟草叶片出现黄化褪绿药害斑现象，此时喷施修复剂。在6种修复剂中，芸台素内酯的修复效果最好，药后9 d药害修复率达60.32%，其次是氨基酸肥，修复率达56.77%；微量元素肥和甲壳素肥的修复效果也较好，药后9 d修复率分别为46.24%和42.78%。赤霉酸和植保素的修复效果较差，药后9 d药害修复率低于20%（表3）。因此，对吡虫啉引致的烟草药害可选择芸台素内酯和氨基酸肥进行修复。

表1 不同修复剂对灭多威药害的修复效果Table1 The remediation effects of different detoxications on methomyl phytotoxicity

表2 不同修复剂对辛硫磷药害的修复效果Table2 The remediation effects of different detoxications on phoxim phototoxicity

2.2 除草剂药害修复剂的筛选

2.2.1 二氯喹啉酸药害修复剂的筛选 花盆土壤中二氯喹啉酸浓度为5×10-3mg/kg，致烟草产生明显药害。从表4可以看出，活性炭对二氯喹啉酸药害修复效果最好，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽的修复率分别为80.83%、73.92%和85.80%；其次是生石灰，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率分别为64.15%、63.71%和77.07%。而赤霉酸、芸苔素内酯、植保素、微量元素肥和生物菌肥对二氯喹啉酸的修复效果均相对较差。因此，选取生石灰和活性炭分设5个浓度进行二氯喹啉酸药害修复试验，以确定修复剂的适合浓度，试验结果见表5。

表3 不同修复剂对吡虫啉药害的修复效果Table3 The remediation effects of different detoxications on imidacloprid phototoxicity

表4 不同修复剂对二氯喹啉酸药害的修复效果Table4 The remediation effect of different detoxications on quinclorac phototoxicity

由表5可知，生石灰施用量为150 mg/kg时，修复效果最好，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率分别为70.45%、68.36%和83.36%；但当生石灰施用量增加至300、600 mg/kg时，对药害的修复效果下降，表明利用生石灰作为烟草二氯喹啉酸药害修复剂时需选择合适的使用量，避免用量过大对烟草畸形缓解不利。在试验浓度范围内，活性炭对烟草二氯喹啉酸药害的修复效果随着施用量的增加而增加，当施用量为80 mg/kg时，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率分别为81.44%、76.81%和89.59%，施用量增加到160 mg/kg和320 mg/kg时，对烟草药害的修复效果也有所增加，没有出现用量过大对烟草畸形缓解不利的结果。

表5 生石灰和活性炭对二氯喹啉酸药害的修复效果Table5 The remediation effect of quick lime and active carbon to quinclorac phototoxicity

2.2.2 苄嘧磺隆药害修复剂的筛选 花盆土壤中苄嘧磺隆浓度为2×10-2mg/kg，致烟草产生明显药害。从表6可以看出，活性炭对苄嘧磺隆药害修复效果最好，处理后30 d对烟草株高、叶长和叶宽的修复率分别为78.11%、80.14%和82.84%，其次是吡唑解草酯，处理后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率分别为65.16%、65.81%和60.45%，解草酯对株高、叶长和叶宽修复率分别为48.70%、45.39%和53.52%，而赤霉酸、芸苔素内酯、植保素、微量元素肥和生物菌肥对苄嘧磺隆的修复效果相对较差。因此，选取活性炭和吡唑解草酯，分设5个浓度进行苄嘧磺隆药害修复研究，以确定修复剂的适合浓度，结果见表7。由表7可知，吡唑解草酯施用量为4～6 mg/kg时，对苄嘧磺隆药害修复效果最好，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率均在60%～70%之间；当吡唑解草酯施用量增加到8 mg/kg时，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率均在60%以下，修复效果下降。因此用吡唑解草酯作为苄嘧磺隆药害修复剂时，应严格控制使用量。在试验浓度范围内，活性炭对苄嘧磺隆药害修复效果随着施用量的增加而增加，当施用量为320 mg/kg时，药后30 d对烟草株高、叶长和叶宽修复率分别为93.03%、94.99%和96.08%，表明活性炭基本可修复苄嘧磺隆所致烟草药害。

表6 不同修复剂对苄嘧磺隆药害的修复效果Table6 The remediation effect of different detoxications on bensulfuron-methy phototoxicity

3 讨论

杀虫剂灭多威、辛硫磷和吡虫啉易对烟草产生药害，药害症状与刘勇报道的基本一致［14］。赤霉素、植保素、腐殖酸等可修复杀虫剂药害［4］，本研究对这3种杀虫剂所致烟草药害的修复剂进行筛选，结果表明微量元素肥对灭多威和辛硫磷药害的修复效果较好，药后9 d修复率分别为47.28%和54.43%，其次是氨基酸肥，药后9 d修复率为42.71%和44.72%。微量元素肥和氨基酸肥均是叶面肥，叶面肥具有肥效快、养分利用率高，可在短期内为植物补充营养，增加抗逆性，有效修复农药急性药害［15］。芸台素内酯和氨基酸肥对吡虫啉药害的修复效果较好，药后9 d药害修复率达60.32%和56.77%。芸苔素内酯是一种生长调节剂，可以提高作物的光合能力,减弱蒸腾作用，促进植物体内细胞的分裂和伸长，作为一种解农药药害修复剂，被广泛使用［16］。

表7 吡唑解草酯和活性炭对苄嘧磺隆药害的修复效果Table7 The remediation effect of mefenpyr-diethyl and active carbon on bensulfuron-methy phototoxicity

二氯喹啉酸是水稻田常用除草剂，在土壤中残留时间较长，不易降解，是引起下茬烟草畸形药害的一种重要除草剂。本研究发现各种叶面肥和生长调节剂对二氯喹啉酸残留药害修复效果较差，生物菌肥有一定的修复作用，但无法使畸形烟草恢复正常，这与彭耀东等［17］和陈泽鹏等［18］的研究结果一致。施用生石灰可提高土壤碱性，加速土壤中残留的二氯喹啉酸分解，缓解烟草的畸形发生，彭耀东等［17］建议后茬植烟前施用生石灰1 125 kg/hm2并用水灌溉，以缓解烟株畸形症状。但陈泽鹏等［18］认为土壤中生石灰含量过高，土壤碱性增大，会造成烟草新的畸形生长。本研究也证明土壤中生石灰施用量过大，对二氯喹啉酸药害的修复效果下降，因此利用石灰修复二氯喹啉酸药害时，需控制其使用量，以免加重药害。生石灰增加土壤碱性的同时，也可有效抑制烟草茎基部病害如青枯病、黑胫病的发生［19］。本研究结果表明，活性碳对二氯喹啉酸药害的修复效果比生石灰更好，活性炭可吸附土壤中的二氯喹啉酸，降低二氯喹啉酸在土壤中的浓度，对烟草株高和叶宽的畸型程度有明显修复效果。活性碳或生物碳可吸附土壤中的二氯喹啉酸，降低烟草或蔬菜根际土壤中二氯喹啉酸的浓度，减轻除草剂对作物的危害［10，18，20］。可见，活性炭是有效减缓二氯喹啉酸药害的修复剂。

苄嘧磺隆等磺酰脲类除草剂也是一种易致烟草药害的水稻田常用除草剂。李德萍等指出复合菌肥对氯嘧磺隆所致甜菜药害有较好的修复作用［21］，本研究显示生物菌肥对烟草苄嘧磺隆药害的修复效果比赤霉酸、芸苔素内酯、植保素和微量元素肥要好。除草剂安全剂可选择地保护作物免遭除草剂的药害，是除草剂药害研究的新领域，目前已经商品化的安全剂有10余种，其中最成功的是二氯乙酰胺类安全剂［22］。N-二氯乙酰基-2-甲基-1-氧杂-4-氮杂-螺［4.4］壬烷能够减轻氯嘧磺隆对玉米幼苗的药害［23］，环丙磺酰胺和奈安对高粱烟嘧磺隆药害有一定的修复作用［24］，环丙磺酰胺和双苯噁唑酸可缓解玉米烟嘧磺隆药害［25］。苏旺苍等［26］报道吡唑解草酯可较大程度地减轻药害对玉米有效叶片数、茎粗的影响，解草酯拌种在有效叶片数、茎粗、株高、地上鲜质量上均能获得相对理想的缓解效果。但张全国等［27］研究显示解草酯虽能减小烟嘧磺隆对玉米株高及穗位高的影响, 但不能对玉米药害进行有效修复，不仅药害率有所增加, 产量也进一步下降。本研究显示解草酯和吡唑解草酯对烟草苄嘧磺药害均有一定的修复效果，吡唑解草酯对烟草苄嘧磺隆药害的修复效果优于解草酯，在土壤施用量为4 mg/kg时修复效果最好，当施用量增加到8 mg/kg时，修复效果明显下降，因此使用吡唑解草酯作为苄嘧磺隆药害解毒剂时，应控制药剂使用量。因活性碳对除草剂的吸附作用，其对烟草苄嘧磺隆药害修复效果最好，且随着活性炭使用量的增大，修复效果随之增加，是较安全的烟草苄嘧磺隆药害修复剂。

4 结论

灭多威、辛硫磷和吡虫啉施用不当时，可导致烟草产生药害。本研究结果表明，微量元素肥对灭多威和辛硫磷引起的烟草药害修复效果较好，芸台素内酯和氨基酸肥可缓解吡虫啉药害。二氯喹啉酸和苄嘧磺隆是水稻田常用除草剂，常引起烟草药害。生石灰和活性炭对二氯喹啉酸药害修复效果较好，活性炭和吡唑解草酯对苄嘧磺隆药害修复效果较好，但利用生石灰修复二氯喹啉酸药害和利用吡唑解草酯修复苄嘧磺隆药害时，需控制其使用量，以免加重药害。活性炭对2种烟草除草剂药害均有较好的修复效果，且随着使用量的增大，修复效果随之增加，是较安全的二氯喹啉酸和苄嘧磺隆药害修复剂。