一个规模猪场伪狂犬病血清学检测与免疫程序评价

陈文志

（福建省漳州市诏安县动物疫病预防控制中心，福建 漳州 363500）

猪伪狂犬病是由疱疹病毒引起的一种病毒性传染病，是当前困扰、危害猪场的主要疾病之一，不仅可以进行水平传播，也可通过胎盘、精液进行垂直传播，也是引起呼吸道病综合征的重要原发性病原之一[1]。猪只一旦感染可以长期带毒，且有排毒散毒的风险[2]，防控难度大。该病目前尚无特效的治疗方法，疫苗免疫是预防和控制猪伪狂犬病最为有效的措施之一。猪群进行血清流行病学调查检测，是评价疫苗免疫效果及优化免疫程序的重要手段和掌握猪场是否有野毒存在情况，保证猪场猪群安全。

1 材料与方法

1.1 血清样品来源

采集福建省诏安县某规模猪场血清样品325份送诏安县动物疫病预防控制中心实验室检测，其中采集待售后备公猪83头、种公猪22头、后备母猪20头、1～3胎及以上生产母猪80头、30～35日龄仔猪20头、40～45日龄仔猪20头、50～55日龄仔猪20头、60～70日龄小猪 20头、90～100日龄肉猪 20头、110～120日龄肉猪20头。血样采集后，静置2 h，离心分离血清，-20℃冻存备用。该猪场使用猪伪狂犬病活疫苗（K-61株）免疫：种猪采用“一刀切”方式分别在每年3月份、6月份、9月份、12月份各免疫1次，每次2头份/头；商品猪出生当天滴鼻免疫1头份/头，小猪68日龄肌注免疫1头份/头，肥育猪105日龄肌注免疫1.5头份/头。

1.2 检测试剂

猪伪狂犬病gB、gE抗体检测试剂盒都是美国IDEXX公司生产的。

1.3 检测方法

采用ELISA方法检测猪伪狂犬病gB、gE抗体，按照试剂盒说明书操作步骤进行试验。结果判定：S/N值≤0.60判断为阳性，S/N值＞0.60但≤0.70判断为可疑，S/N值＞0.70判断为阴性，可疑样品重测。

2 检测结果

不同阶段猪伪狂犬病gB、gE抗体检测结果见表1。

表1 不同阶段猪伪狂犬病gB、gE抗体检测结果

2.1 猪伪狂犬病gB抗体检测情况

后备公猪83份样品gB抗体阳性率为92.77%；公猪、后备母猪、1胎、2胎、3胎及3胎以上母猪122份样品，gB抗体阳性率均为100%。商品猪30～35、40～45日龄各20份样品gB抗体阳性率均为95%，50～55日龄20份样品gB抗体阳性率为85%，60～70日龄20份样品gB抗体阳性率为65%，90～100日龄20份样品gB抗体阳性率为90%，110～120日龄20份样品gB抗体阳性率为75%。商品猪gB抗体阳性率随日龄增长呈下降趋势，如图1。

图1 商品猪gB抗体阳性率曲线

2.2 猪伪狂犬病gE抗体检测情况

后备公猪83份样品，gE抗体阳性率为3.61%；公猪22份样品，gE抗体阳性率为4.55%；后备母猪、生产母猪1胎、2胎、3胎及3胎以上样品各20份，gE抗体阳性率分别为10%、15%、45%、55%、65%。母猪gE抗体阳性率随生产周期增长而逐步提高，如图2。商品猪 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100、110～120日龄gE抗体阳性率分别为95%、65%、40%、35%、5%、20%，商品猪gE抗体阳性率随日龄增长而呈逐渐下降趋势，达到100日龄后稍有回升，如图3。

图2 母猪gE抗体阳性率曲线

图3 商品猪gE抗体阳性率曲线

3 讨论

（1）猪伪狂犬病gB属于病毒的中和抗体，gB抗体既有疫苗免疫抗体，也可能有野毒感染抗体。对gB、gE抗体检测结果进行分析，后备公猪、公猪、后备母猪gB抗体阳性率为92.77%以上，且gE抗体阳性率不超过10%，疫苗免疫对于gB抗体的产生起到主导作用；对于不同胎次的母猪虽然gB抗体阳性率均为100%，但母猪1胎、2胎、3胎及3胎以上gE抗体阳性率分别为15%、45%、55%、65%，野毒对gB抗体的产生不容忽视。

（2）赵雪丽等研究指出，要保证猪群不被野毒感染，猪群猪伪狂犬病免疫抗体平均合格率需长期维持高于90%[3]。后备公猪、公猪、后备母猪、生产母猪gB抗体阳性率均为92.77%以上，表明种猪采用“一刀切”方式每季度免疫1次、每次2头份/头的免疫程序是可行的。从图1 gB抗体阳性率曲线图可以看出，商品猪在 50～55、60～70、90～100、110～120 日龄gB抗体阳性率分别仅为85%、65%、90%、75%，表明该猪场分别在仔猪出生当天滴鼻免疫1.0头份/头、68日龄肌注免疫1.0头份/头、105日龄肌注免疫1.5头份/头的免疫程序不够理想。建议将68日龄提前到45日龄肌注免疫1.5头份/头，105日龄肌注免疫1.5头份/头提高剂量至2.0头份/头[4]，适当调整免疫时间及免疫剂量，维持各日龄商品猪群免疫抗体较高水平，每年定期开展gB抗体检测3～4次，发现gB抗体水平低下要及时补免，随时优化免疫程序，提升免疫保护效力[5]。

（3）从图2母猪gE抗体阳性率曲线图可以看出，后备母猪、生产母猪gE抗体阳性率呈上升趋势，表明种猪随着生产周期增长，存在被野毒感染机会也在增加。该猪场业主已对gE抗体阳性的3头后备公猪、1头公猪、2头后备母猪淘汰掉。要定期开展gE抗体监测（可与gB抗体检测同步），有计划地加速淘汰gE抗体阳性母猪，为今后净化工作打好基础。

（4）仔猪出生后哺乳母乳，获得母源抗体，母源抗体中含有gB抗体，同时也可能有gE抗体。本次检测该场商品猪 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100 日龄gE抗体阳性率分别为95%、65%、40%、35%、5%，随着日龄的增加，gE抗体阳性率逐渐下降直至5%，符合母源抗体消长规律[6]，这提示在前期gE抗体来自母源抗体的可能性更大[7]；110～120日龄gE抗体阳性率提升至20%，这表明部分猪只被野毒感染了，因此，必须提高猪群免疫抗体水平和猪场生物安全。

（5）落实生物安全措施，扎实做到“五个严格执行”。严格执行猪场内外人员进场消毒程序；严格执行一切车辆未经彻底消毒不得入场；严格执行引种制度，特别是引种前进行猪伪狂犬病gE抗体检测，gE抗体阴性方可进场；严格执行场内环境定期消毒制度；严格执行消灭猫、老鼠、苍蝇、蚊虫等，防止病源传播扩散。