人乳头瘤病毒检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的临床意义

武惠莹

【摘 要】目的：评价人乳头瘤病毒（HPV）检测对于宫颈癌前病变及宫颈癌筛查的临床意义，以及临床对于宫颈癌的早期预防治疗的意义。方法：选出我站在2017年10月-2018年10月筛查发现的10例宫颈癌患者作为A组，20例宫颈癌前病变患者作为B组，300例宫颈炎患者作为C组，另选出5000健康体检者作为D组，对其施予HPV检测、阴道镜检查、液基细胞学检查，观察比较其结果。结果：A组HPV检测阳性率100%（10/10），B组HPV检测阳性率85%（17/20）；C组HPV检测阳性率30%（90/300），D组HPV检测阳性率10%（598/5000）。结论：HPV感染与宫颈病变的严重程度密切相关，在宫颈癌、宫颈癌前病变筛查过程中有非常重要的临床价值，值得推广。

【关键词】人乳头瘤病毒；宫颈癌前病变；宫颈癌；临床意义

【中图分类号】R248.3 【文献标识码】A 【文章编号】1005-0019（2019）15--01

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其发病率随着社会的发展、生活方式的改变及饮食结构的不健康化，造成宫颈癌的发病率呈上升趋势，且愈加年轻化。其HPV的感染是造成宫颈癌及癌前病变的关键因素。通过HPV的测定能够及时对宫颈癌及其癌前病变的高风险患者进行分析[1]。近几年，人们平日生活方法的持续转变，加之女性所具有的压力也持续提升，使得宫颈癌的患病率有所升高，且愈加年轻化。而在这其中，宫颈癌前病变指的就是有一定的癌变倾向，但是，又不可以诊断成原位癌的宫颈异常增殖性病变，其具有进展成恶性肿瘤的潜能，长时间存在极有可能转变成宫颈癌。为了提升治疗最终的效果，保障预后，要尽早对这类患者开展检测与治疗。本文主要就对比与分析了HPV检测对于宫颈癌、宫颈癌前病变患者的作用与效果，并将结果进行如下报道：

1 资料与方法

1.1 临床数据

选出我站在2017年10月-2018年10月筛查发现的10例宫颈癌患者作为A组，20例宫颈癌前病变患者作为B组，300例宫颈炎患者作为C组，另选出5000健康体检者作为D组。对其均施予HPV检测、阴道镜检查、液基细胞学检查。年龄为40-60岁，平均年龄为48岁。

入组标准：

①所有患者与其亲属都全方位把握了此次试验研究的内容，并签订了“知情同意书”；

②此次试验研究通过了站医理委员会的核实及批准；③所有患者都与宫颈癌相关的诊断规范相符。

排除标准：

①排除具有重型心脏、肝脏、肾脏、肺部、脑部等关键脏器功能型障碍的患者；

②排除中途退出此次试验研究的患者；

③排除具有药品过敏史的患者；

④排除具有重型传染病症、精神病症、血液病症的患者；④排除处于妊娠期与哺乳期中的女性患者。

1.2 方法

1.2.1 所有接收检查的女性在采样前的3天内都未使用阴道清洗药物，在采样前的1天内都未进行房事且不再月经期。在进行采样时，要先清理宫颈口的异物与分泌物，然后，利用超薄液基制片采样刷进行细胞采样；采样刷要紧贴在宫颈口黏膜，并順时针均匀地旋转5周。所有检查者均在宫颈鳞柱交接的位置选取，采取自动液基式薄层细胞学测定法，HPV-DNA测定，选取有杭州德同生物技术有限公司所提供的人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测试剂盒，方法为杂交捕获-化学发光法；人乳头瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒，方法为PCR+膜杂交法。

1.2.2 阴道镜下病理检查

对阴道镜下有白色病变，腺体开口、镶嵌、异性血管等可疑病变的部位进行定点活检，对镜下正常着色进行常规移行带区3、6、9、12四点活检，活检组织送病检。

1.2.3 液基细胞学检查（TCT） 用宫颈拭子刷取宫颈表面及宫颈内约1.5cm范围中的脱落细胞，并浸泡于“细胞保存液”中，在电镜下进行分析。

1.2.4 试验过程

1.2.4.1 变性

（1）在质控品与各个样品管加进变性制剂，并运用清洁干净的螺纹盖盖上，在拧上盖子后，加以混匀，最后，各管体现为蓝色。

（2）把如上各管放到水浴（温度即为65摄氏度），共实施45min的孵育。

1.2..4.2 杂交

（1）把96-孔型微孔板当作杂交微孔板，每孔加进探针制剂25ul。

（2）将变性结束后的质控品与样品从水浴中拿出，并放置直到回归室温。

（3）对各管共实施5s的振荡，吸取75μl，以转到杂交微孔板中。

（4）运用封板膜，盖上杂交微孔板，放至微孔板加热振荡器中，速度设定为1100rpm，共实施2-3min的振荡。各孔体现为淡黄色，暂停实施振荡，处于65摄氏度的前提之下共实施一个小时的孵育。

1.2..4.3 捕获

（1）在微孔板加热振荡器中，拿出杂交微孔板，放置直到回归室温。

（2）在铝箔袋中，拿出捕获微孔板。

（3）把杂交微孔板中的所有液体转到捕获微孔板相应的孔中。

（4）运用封板膜，盖上捕获微孔板，放到回归室温后的微孔板加热振荡器。速度设定为1100rpm，25摄氏度下，共实施一个小时的振荡。

1.2.4.4 检测

（1）把捕获微孔板中的所有液体加以移除，并拍干。

（2）在捕获微孔板中，加进检测制剂（即为HPV核算检测试剂盒），所有孔都要体现为粉红色。

（3）运用封板膜，盖上捕获微孔板，处于室温之下，共实施45min的孵育。

1.2.4.5 化学发光

（1）把捕获微孔板中的检测制剂移除。

（2）运用1×洗涤液，对捕获微孔板共开展六次的清洗，并拍干。

（3）在捕获微孔板中，加进底物制剂，所有孔都要体现为黄色。

（4）处于室温之下，避光实施15min的孵育，并运用化学发光免废分析仪（型号即为TZD_CL_200S）加以读数。

1.3 统计学分析

将本研究所收集的数据录入到SPSS17.0统计软件中，并对其进行统计学处理，计量资料用（）表示，计数资料用率（%）代表。P<0.05，则统计学意义存在。

2 结果

在本次研究的所有受检对象中，A组HPV检测的阳性率为100%（10/10），B组HPV检测的阳性率为85%（17/20）；C组HPV检测的阳性率为30%（90/300），D组HPV检测的阳性率为11.96%（598/5000）。HPV阳性率随着病程程度的严重性呈上升的趋势，详情见表1。

3 讨论

宫颈癌是临床最常见的恶性肿瘤之一，目前普遍认为，HPV的持续感染与宫颈病变有着密切的关系，可以引起宫颈癌前病变及宫颈癌，HPV检出率随着宫颈病变的加重而增加，若在此期间及时进行治疗。可以有效阻断癌变的发生。宫颈癌前病变与宫颈癌的产生同性生活十分繁杂、HPV感染、不够健康的卫生习惯等许多因素间密切联结，而在这其中，最为突出的因素就是HPV感染[2]。对于宫颈上皮而言，其就是宫颈阴道部鳞状上皮、宫颈管柱状上皮等构成的，在原始鳞柱、生理鳞柱间所具有的交汇位置就是转化区[3]。对于转化区而言，其还没有成熟的化生鳞状上皮所具有的代谢十分活跃，处于HPV所带来的刺激之下，部分物质就会产生细胞核异常、有丝分裂有所增多等相关问题，最终，引发宫颈癌前病变，并逐步恶化成宫颈癌[4]。HPV指的就是双链环状DNA病毒，其能够对上皮基底层细胞引发侵入型感染，并产生在染色体中。HPV在引发宫颈组织产生感染后，具有感染特性的分型基因就会进至细胞健康基因组的DNA中，并与其产生整合。对大多浸润型宫颈癌患者来说，其机体中所具有的HPV病毒在与DNA加以整合后，就指出了病症已经恶化成了癌变[5]。宫颈癌是一个不断演變的过程，从感染HPV到病变，到演化成宫颈癌至少需要10年时间，因此通过HPV检测及时发现和排查宫颈癌具有十分重要的理论及临床意义。

本次研究的结果指出了，A组HPV检测的阳性率为100%（10/10），B组HPV检测的阳性率为85%（17/20）；C组HPV检测的阳性率为30%（90/300），D组HPV检测的阳性率为10%（598/5000），由此证实了，HPV阳性率随着病程程度的严重性呈上升的趋势。

综上所述，HPV的感染与宫颈癌的发生、发展密切相关，女性定期健康检查，及时发现宫颈癌，在临床中对HPV加以检测，能够及早发现宫颈癌、宫颈癌前病变，及时治疗、干预，减低宫颈癌的死亡率，值得临床推广。

参考文献

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