晏意良 明溪县动物疫病预防控制中心 福建明溪 365200
在日常检测工作中,接收采自猪场的血样时,经常会遇到一些猪场由于路途比较远、道路崎岖颠簸而造成猪全血溶血的情况。我们一贯做法都是弃之不用,要求猪场重新送样。但是猪全血溶血对抗体检测到底有否影响,我们也是模棱两可。因此,有必要通过试验来摸清猪全血溶血对样本检查的具体影响。本试验通过观察猪全血是否溶血对猪瘟抗体检测的影响,对溶血情况是否会影响抗体检测作初步探索,为日常检测工作提供参考。
1.1 材料 在明溪县某规模养殖场选择75日龄肉猪20头(21日龄一免广东永顺传代细胞苗,55日龄二免中牧猪丹毒-巴氏杆菌-猪瘟三联苗),每头猪抽取全血各2份,共40份。相同条件保存,每头2份血样其中1份在运输过程中反复颠簸,注射到5 mL离心管中离心,获得20份溶血的血清并编号;另外1份正常保存,正常离心,获得20份的血清编号与溶血的血清相对应,确保相对应的血清来源于同一头猪。
1.2 方法 离心后立即对血清进行猪瘟抗体检测,试剂盒为北京爱德士元亨生物科技有限公司生产;两组血清在同一包被板上进行操作,分别设置阴阳性对照,在深圳雷杜生命科学股份有限公司生产的RT-6100型酶标仪上读取,波长450 nm,100×(阴性对照A平均值-样品A值)/阴性对照A平均值≥40判断为阳性。
2.1 溶血对血清外观的影响 随着全血的溶血,离心得到的血清变得鲜红。
2.2 溶血对血清猪瘟抗体检测的影响 共检测40份血清,其中溶血血清20份,未溶血血清20份,分别对应同一头猪的2份全血,样品A值分别见表1-表2。观察溶血与未溶血血清样品A值,发现溶血血清的A值较未溶血血清略低。
表1 未溶血血清样品A值
表2 溶血血清样品A值
再通过公式计算阻断率,样品阻断率分别见表3-表4。观察溶血与未溶血血清样品阻断率,发现溶血的血清较未溶血的血清阻断率略低,但不影响样品的阴阳性判定。两组样品都是相对应的3个样品阴性,相对应的17个样品阳性。
表3 未溶血血清样品阻断率
表4 溶血血清样品阻断率
试验结果表明,猪全血溶血,除了使血清变得鲜红,对血清猪瘟抗体检测结果没有明显影响,分别对应的两组20份样品阴阳性均一致。笔者认为在猪瘟抗体检测采样时,样品保存运输过程中,除了正常的保存外,不必在意样品是否溶血会对猪瘟抗体检测造成影响。