徐香猕猴桃茎段快繁技术研究

王建萍，李公存，顾亮，沙玉芬，刘笑宏，苏佳明

(烟台市农业科学研究院，山东烟台 265500)

徐香猕猴桃萌芽率、成枝率和坐果率高，丰产稳产，适应性强。果实圆柱形，果皮黄绿色，被黄褐色硬刺毛，果肉绿色、质细多汁、酸甜可口，单果重75～110g，最大果重137g，具有极高的推广价值[1]。猕猴桃的常规育苗方法主要是实生苗嫁接法和枝条扦插繁殖法。嫁接苗童期生长缓慢，育苗周期达2年以上，扦插苗成活率极低[2]。因此传统的育苗方法已经不能满足日益增长的猕猴桃产业需求。组织培养具有繁殖速度快、繁殖系数大，而且具有繁殖后代整齐一致、能保持原有品种优良性状的优点，本试验对徐香猕猴桃的茎段快速繁殖技术进行了研究，探讨了不同培养阶段不同培养基对培养效果的影响，旨在为生产上进行徐香猕猴桃工厂化生产提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以徐香猕猴桃当年生健壮枝条的茎段为组织培育材料。

1.2 试验设计

初代培养，采用MS培养基，添加3种激素ZT(玉米素)、6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸)，设置6个不同处理(表1)。增殖培养，采用MS培养基，添加3种激素，6-BA、IAA(吲哚乙酸)、GA3(赤霉素)，设置8个处理(表2)。生根培养，采用1/2MS培养基，添加2种激素，NAA、IBA(吲哚丁酸)，设置9个处理(表3)。炼苗及移栽，使用河沙、蛭石、草炭土3种基质，设置5个处理(表4)。分别调查组培苗各阶段的生长情况，移栽的成活率等。

1.3 试验方法

剪掉徐香猕猴桃当年生健壮枝条上的叶片，用自来水冲洗30～60分钟，在超净工作台上严格消毒，过程为：先用75%酒精浸泡45秒，再用0.1%升汞浸泡10～12分钟，最后用无菌水冲洗4～6次。将消毒好的枝条剪成2cm左右的带芽茎段，纵剖成两半，将剖面向下接种到预先配制好的初代培养基上，分化成苗后，转到增殖培养基上，经过继代培养形成一定数量的试管苗后，选取高约2cm以上的健壮幼苗转移到生根培养基上。生长至高约3cm、并生有3～4条1cm左右的新根时，即可炼苗移栽。在自然光下驯化炼苗4～6天，然后揭开瓶盖进行透气锻炼，每天喷清水2～3次，3天后小心取出幼苗，洗净根部的培养基进行移栽。

2 结果与分析

2.1 MS培养基加不同激素对徐香猕猴桃初代培养的影响

由表1可以看出，徐香猕猴桃茎段在不同初代培养基中的诱导分化植株情况不同，其中处理6的生长情况最好，成活率最高，为90.0%，生长50天后平均株高最高，为2.9cm，且生长健壮；处理4的生长健壮，生长50天后平均株高较高，为2.8cm，但是成活率较处理6低，为66.7%；处理1的生长情况最差，成活率仅有16.7%，平均株高1.7cm，且生长细弱。因此，徐香猕猴桃初代培养适合的培养基为MS+ZT 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L。

表1 MS培养基加不同激素对徐香猕猴桃初代培养的影响

2.2 MS培养基加不同激素对徐香猕猴桃增殖培养的影响

由表2可以看出，徐香猕猴桃茎段在不同激素的MS培养基上继代增殖情况不同，随着继代次数的增多，增殖系数基本呈上升的趋势。其中处理6的增殖及生长情况最好，第5代时增殖系数达6.8，丛生芽多且生长健壮；处理2和处理5的增殖和生长情况较好，第5代时，增殖系数分别达6.0和5.6，丛生芽均较多，生长较健壮；处理1、4、7和8的增殖情况均一般，且处理4、7和8出现了不同程度的玻璃化现象。因此，徐香猕猴桃继代培养适合的培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.2mg/L+GA30.1mg/L。

表2 MS培养基加不同激素对徐香猕猴桃继代增殖的影响

2.3 1/2培养基加不同激素对徐香猕猴桃生根培养的影响

由表3可以看出，徐香猕猴桃茎段在不同激素的1/2培养基上生根情况不同，处理5生根最好，生根率100%，单株生根5.8条，平均根长2.5cm，生长粗壮；处理2、6生根情况较好，生根率均为100%，生根分别为5.2和5.0条，平均根长较长，分别为2.2cm和2.3cm，根系均粗壮；处理3、8生根率较高，均为83.3%，单株生根分别为4.2和3.3条，平均根长较短，分别为2.0cm和1.9cm；处理1、4生根情况较差，生根率分别仅有16.6%和33.0%，单株生根分别为0.83和1.0条，平均根长0.5cm和0.9cm。因此，徐香猕猴桃适合的生根培养基为1/2MS+NAA 0.15mg/L+IBA 0.1mg/L。

2.4 炼苗与移栽

由表4可看出，当基质为蛭石+草炭土时，徐香猕猴桃试管苗移栽成活率最高，为90%；当基质为河沙+草炭土时，移栽成活率也较高，为87%；当基质分别为河沙和蛭石时，移栽成活率较低，分别仅为27%和22%，这可能是由于单用河沙和蛭石保水性差；当基质为草炭土时，移栽成活率也不高，为47%，这可能是因为草炭土透气性差。因此，炼苗后将徐香猕猴桃移栽到蛭石+草炭土基质中，确保成活率。

表3 1/2MS培养基加不同激素对徐香猕猴桃生根的影响

表4 不同基质对徐香猕猴桃试管苗移栽的影响

3 小结与讨论

在培养基中加入适当的植物生长调节剂(人工合成的植物激素)后，才能诱导细胞的分裂，愈伤组织的形成和生长以及根、芽的分化等变化[3]。朱学栋等[4]认为MS+ZT 0.8mg/L+NAA 0.1mg/L能很好地诱导红阳猕猴桃茎段分化。本研究采用较低浓度的ZT、6-BA与低浓度的NAA搭配，对徐香猕猴桃诱导效果较好，最佳诱导培养基为MS+ZT 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L，成活率达90%。

本研究结果表明，徐香猕猴桃最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+IAA 0.2mg/L+GA30.1mg/L，第5代增殖系数达6.8。这与文国琴[5]使用较高的激素浓度MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.4mg/L+GA30.1mg/L组合相比有些差异。但GA3浓度太低不利于增殖培养，6-BA浓度太高容易出现植株玻璃化。本研究发现继代培养次数影响增殖效果，第5代时的增殖系数明显高于第1代和第3代，这与Standardi[6]研究的猕猴桃继代次数越多，芽增殖率越高的结果一致。

马欢[7]认为在1/2MS+IBA 1.0mg/L培养基上猕猴桃生根效果较好，低浓度的IBA不适宜猕猴桃生根。本研究结果表明在1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1mg/L培养基上，徐香猕猴桃生根效果很好，生根率达100%，低浓度的NAA和IBA搭配也能有效的促进猕猴桃生根。

移栽时采用蛭石+草炭土作为基质成活率最高，由此可见猕猴桃移栽对基质的保水性及透水性要求均较高，透气性差容易烂根，保水性差小苗容易萎蔫。