Ｍ５ａ和Ｍ５ｂ患者实验室检查结果对比分

曹越　曾烈华

【摘要】 目的：比較M5a和M5b患者实验室检查结果异同，对M5患者实验室检查结果进行归纳总结，为该病的临床诊断及分型提供依据。

方法：收集2015年2月-2017年8月韶关市第一人民医院及粤北人民医院初诊M5患者68例，其中M5a 20例，M5b 48例，对以上患者进行血常规检测、免疫表型检测及染色体核型分析。结果：M5a患者白细胞总数及单核细胞所占比例均明显高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但两组患者之间差异无统计学意义（P>0.05）;CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5a患者和M5b患者中阳性率均较低，且两组患者之间差异无统计学意义（P>0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34、HLA-DR阳性率均高于M5a患者，CD19、GlyA和CD13两者间的差异无统计学意义（P>0.05），CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR两者间的差异有统计学意义（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117阳性率高于M5b患者（P<0.05）;M5a患者骨髓细胞染色体核型异常者所占比例明显高于M5b患者（P<0.05），以非平衡核型异常最为明显（P<0.01）。结论：M5a和M5b患者实验室检查各具特征，对M5a和M5b患者实验室检查结果进行归纳有助于M5的诊断及分型。

【关键词】 M5a; M5b; 血常规; 骨髓象; 免疫表型; 染色体核型

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.08.007 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）08-00-03

Comparative Analysis of Laboratory Results of M5a and M5b Patients/CAO Yue，ZENG Liehua.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（8）：-18

【Abstract】 Objective：To compare the results of laboratory tests of M5a and M5b，to summarize the results of laboratory examination of M5 patients and provide basis for clinical diagnosis and classification of the disease.Method：A total of 68 first visit cases of M5 patients were collected，including 20 cases of M5a，48 cases of M5b，in First People's Hospital of Shaoguan from February 2015 to August 2017.Routine blood tests，bone marrow observation，immune phenotypic detection and chromosome karyotype analysis were all analysed for above patients.Result：The morphological features of M5a and M5b were not significant.Total number of white blood cells and mononuclear cells in M5a patients were significantly higher than M5b patients（P<0.05）.RBC，HGB，HCT were reduced to some extent in all patients with M5a and M5b，but there were no statistically significant difference between two groups of patients（P>0.05）.The positive rate of CD3，CD10，CD20，and CD41a in M5a patients and M5b patients were both low，and there were no statistically significant difference between the two groups（P>0.05）.The positive rate of CD7，CD14，CD19，GlyA，CD15，CD13，CD34，HLA-DR in M5b patients were higher than that in patients with M5a.CD19，GlyA and CD13 between M5a and M5b were no statistically significant difference（P>0.05）.CD7，CD14，CD15，CD34 and HLA-DR between M5a and M5b were statistically significant difference（P<0.05）.The positive rate of CD33 and CD117 in M5a patients was higher than that of M5b patients（P<0.05）.The proportion of abnormal chromosomal karyotypes in M5a patients was significantly higher than that of M5b patients（P<0.05），and the non-equilibrium karyotype abnormality was most obvious（P<0.01）.Conclusion：M5a and M5b patients have the characteristics of laboratory examination，and the results of laboratory examination of M5a and M5b patients can be summarized to help the diagnosis and classification of M5.

【Key words】 M5a; M5b; Routine blood test; Myelogram; Immune phenotype; Karyotype

First-authors address：Medical College of Shaoguan University，Shaoguan 512026，China

白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，按白血病细胞分化阻滞阶段可分为急性白血病和慢性白血病，其中急性白血病按病变细胞系列分类可分为急性髓细胞白血病和急性淋巴细胞白血病，急性髓细胞白血病又可依据FAB分型标准将其分为M0～M7八个亚型，其中M5即为急性单核细胞白血病。据统计，在我国M5占急性髓细胞白血病的20%～30%，仅次于M2，位居第二位，并且该病易伴有明显的髓外浸润、高白血症等，是一种预后较差的白血病。M5的实验室检查项目有很多，除血常规、骨髓象、细胞化学染色以外，还有免疫表型及细胞遗传学等多项指标。到目前为止，已经有较多关于M5实验室检查的相关报道，但是不够全面，本研究通过对M5a和M5b患者实验室检查结果对比分析，以期让临床能够更加全面的了解M5实验室检查特征，为临床M5的诊断及分型提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年2月-2017年8月韶关市第一人民医院初诊M5患者68例，其中M5a 20例，M5b 48例。M5a患者中，男11例，女9例，男∶女=1.2∶1;年龄30～69岁;M5b患者中，男26例，女22例，男∶女=1.2∶1，年龄7～69。诊断及分型依据：患者均进行了骨髓象、血常规中及细胞化学染色检查，并依据《血液病诊断及治疗标准》进行诊断和分型。

1.2 血常规检测

于化疗前，采用真空采血法采集患者清晨静脉血标本2 ml，EDTA-K2抗凝，采用Sysmex XN-2000全自动五分类血细胞分析仪及其配套试剂对标本进行检测，所有标本均在2 h以内完成检测，检测前仪器要进行严格的质量控制并符合要求。

1.3 免疫分型检测

于化疗前，经髂后上棘穿刺吸取患者骨髓液2 ml，肝素抗凝，于标本采集后24 h以内应用BD公司流式细胞仪及其配套检测试剂盒（间接免疫荧光法）检测血细胞表面分化抗原（CD），结果以双参数散点图表示。髓系及CD7≥20%定为阳性，淋系除CD7外≥30%定为阳性，CD34≥10%定为阳性，HLA-DR≥10%定为阳性。所用的抗体种类有：造血干细胞CD34;髓系CD14、CD33、GlyA、CD15、CD13、CD117、HLA-DR、CD41a;T细胞CD3、CD7;B细胞系CD10、CD19、CD20。

1.4 染色体核型分析

于化疗前，取患者骨髓标本2 ml，肝素抗凝。采用24 h短期培养法制备染色体标本，G显带后镜检，每个病例分析20个中期分裂相，异常染色体参照《人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN2009）》进行描述。核型分组：正常核型;平衡核型（以平衡易位为主要异常的核型，DNA含量没有发生改变）;非平衡核型（染色体部分片段的获得或缺失，DNA含量发生改变，且不包含已确立的平衡易位）[1-2]。

1.5 统计学处理

采用SPSS 16.0对数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2檢验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 M5a和M5b患者血常规结果比较

M5a患者白细胞总数明显高于M5b患者（P<0.05），M5a患者中白细胞大于50×109/L者占55%（11例），M5b患者中白细胞大于50×109/L者占31%（15例）。M5a患者单核细胞所占比例高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者中单核细胞在正常范围内的患者所占比例分别为45%（9例）和13%（6例）。M5a和M5b患者常伴有淋巴细胞百分比的增高，所占比例分别为45%（9例）和52%（25例），差异无统计学意义（P>0.05）。M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但两组患者之间差异无统计学意义（P>0.05）。具体检测结果见表1。

2.2 M5a和M5b患者免疫表型结果分析

免疫表型检测结果显示，CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5a患者和M5b患者中阳性率均较低，且两组患者之间差异无统计学意义（P>0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34、HLA-DR阳性率均高于M5a患者，CD19、GlyA和CD13两者间的差异无统计学意义（P>0.05），CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR两者间的差异有统计学意义（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117阳性率均高于M5b患者，且两者间差异有统计学意义（P<0.05）。具体检测结果见表2。

2.3 染色体核型分析检测结果

20例M5a患者中有19例患者进行了核型分析，其中10例患者核型异常。48例M5b患者中有19例患者进行了核型分析，其中4例患者存在核型异常。M5a患者骨髓细胞染色体核型异常者所占比例明显高于M5b患者（P<0.05），以非平衡核型异常最为明显（P<0.01）。具体染色体核型检测结果见表3。

3 讨论

白血病是一个具有高度异质性的疾病群，FAB协作组将其分为了八个亚型，其中M5，也即单核细胞白血病，又被分为M5a和M5b两个亚型，急性单核细胞白血病准确分型是顺利诊治该病和判断预后的关键[3]。目前有关M5实验室检查的报道都有所侧重，不能较为全面的体现该病的实验室检查特征。本研究对M5a和M5b两种亚型多项检查项目进行检测和对比分析，使临床对M5 的实验室检查特征有更为深入的认识，为临床该病的诊断和分型提供理论依据。

M5a和M5b患者血常规检查结果、免疫表型检测结果、染色体核型分析检测结果均存在一定差异。血常规检测结果显示，M5a患者白细胞总数及白细胞大于50×109/L患者所占比例均明显高于M5b患者（P<0.05），因此，白细胞总数对于M5的诊断和分型有一定的提示作用。M5a患者单核细胞所占比例高于M5b患者（P<0.05），M5a和M5b患者中单核细胞在正常范围内的患者所占比例分别为45%和13%，可见以外周血单核细胞的数量和比例来判断有无M5及进行M5分型容易产生漏诊和分型错误，可靠的诊断一定要结合患者的临床表现及其他实验室检查。M5患者经常伴有淋巴细胞百分比的增高和中性粒细胞比例减低，此现象产生原因可能是因为单核细胞的恶性增生抑制骨髓粒细胞增殖导致淋巴细胞相对增高，临床上要注意将此现象与病毒性感染导致的淋巴细胞比例增高相区别，如果某患者血常规检测结果淋巴细胞比例增高的同时单核细胞比例也有所增高，临床上最好同时进行外周血涂片形态观察。M5a和M5b患者RBC、HGB、HCT均有不同程度降低，但两组患者之间差异无统计学意义（P>0.05），此研究结果说明贫血对M5患者早期诊断确有提示作用[4]，但对于M5的分型意义不大。

免疫表型检测结果显示，CD3、CD10、CD20、和CD41a在M5患者中表达都比较低，对于M5的诊断及亚型的鉴别意义不大。M5b患者的CD7、CD14、CD19、GlyA、CD15、CD13、CD34阳性率均高于M5a患者，但只有CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR两者间的差异有统计学意义（P<0.05），有助于M5亚型的鉴别。已有研究显示，CD14在诊断急性髓细胞白血病方面特异性较高，M0、M1、M2、M3患者CD14均为阴性，CD14主要表达于M4、M5患者，并且M5患者阳性率高于M4患者[5]。结合本研究结果，如果CD14为阳性，该患者为M4或M5b的可能性很大。CD117是一种由c-Kit原癌基因编码的跨膜酪氨酸激酶受体，其配体是干细胞因子（SCF），SCF在早期造血调节中起重要作用。近些年，CD117检测主要用于急性白血病的诊断和分型[6-8]。本研究结果显示M5a和M5b患者CD117阳性率均比较高，且M5a患者CD117阳性率明显高于M5b患者（P<0.05），说明CD117有助于M5的诊断和亚型区分[9]。另有研究显示，CD117/CD34的共表达可用于排除ALL，有助于AML临床诊断和鉴别诊断[10]，本研究结果显示M5b患者中CD117/CD34共表达占到45%，而M5a患者仅有15%存在CD117/CD34共表达现象，因此CD117/CD34的共表达除具有已有研究结果显示的临床价值以外还可用于M5亚型鉴别[10-11]。

染色体核型分析检测结果显示，M5a患者正常核型、平衡核型和非平衡核型所占比例分别为47%、5%、47%，M5b患者正常核型、平衡核型和非平衡核型所占比例分别为79%、16%、5%。M5b患者正常核型所占比例明显高于M5a患者（P<0.05），非平衡核型所占比例明显低于M5a患者（P<0.01）。国外报道急性髓细胞白血病平衡核型检出率为20%～25%，非平衡核型检出率为35%～40%[1]，本研究显示M5a患者平衡核型检出率低于以上报到，而非平衡核型检出率稍高于以上报道，M5b患者两者检出率均低于以上报道。20世纪80年代以来，国际上逐步提出的结合形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学的MICM分型及最新的WHO分型中都体现了细胞遗传学在急性白血病诊断中的重要价值[12]。很多研究证实细胞遗传学不仅对急性髓细胞白血病的诊断有重要意义，而且还与预后有密切的关系，可以作为评估预后检测病情的重要指标[13]，因此染色体核型分析对于M5患者的诊断、分型、治疗及预后评估均有很重要的临床实用价值。

综上，M5a患者白细胞总数及单核细胞所占比例高于M5b患者（P<0.05）;M5b患者CD7、CD14、CD15、CD34和HLA-DR阳性率高于M5a患者（P<0.05）;M5a患者CD33和CD117阳性率高于M5b患者（P<0.05）;M5b患者中CD117/CD34共表达现象明显高于M5a（P<0.05）;M5b患者正常核型所占比例高于M5a患者（P<0.05），非平衡核型所占比例明显低于M5a患者（P<0.01）。M5a和M5b患者骨髓幼稚单核细胞形态差别不大，但血常規检测结果、免疫表型检测结果、染色体核型分析均对M5患者分型起到一定的提示作用。

参考文献

[1] Bacher U，Kem W，Schnittger S，et al.Population-based agespecific incidences of cytogenetic subgroups of acute myeloid leukemia[J].Haematologica，2005，90：1502-1510.

[2]苏龙，高素君，李薇，等.640例急性髓系白血病患者染色体核型与年龄相关性研究[J].中华血液学杂志，2013，34（2）：133-137.

[3]林元峰，郑源海，周艳贞，等.免疫分型在单核细胞相关性急性髓细胞白血病（M4/M5）鉴别诊断中的应用[J].检验医学与临床，2013，10（19）：2520.

[4]郭斌，谢宁，刘文，等，急性髓细胞白血病免疫分型及骨髓、血常规综合研究[J].国际检验医学杂志，2016，37（19）：2710-2712.

[5]林伟尚，林婷.CD64与CD14在急性单核细胞相关的髓系白血病免疫分型鉴别诊断中的意义[J].辽宁医学杂志，2016，30（1）：13-14.

[6] Uckan D，Hicsinmez G，Yetgin S，et al.CD34/CD117 co-expression in childhood acute leukemia[J].Leuk Res，2000，24（3）：201-206.

[7] Muroi K，Ameniya Y，Miura Y.Specificity of CD117 expression in the diagnosis of acute myeloid leukemia[J].Leukemia，1996，10（7）：1048-1051.

[8] Tsao A S，Kantarjian H，Thomas D，et al.C-kit receptor expression in acute leukemias-association with patient and disease characteristics and with outcome[J].Leuk Res，2004，28（4）：373-378.

[9]李庆，翟志敏，徐静玮，等.CD117在急性白血病中的表达及其临床意义[J].白血病·淋巴瘤，2006，15（3）：176-178.

[10]陈红涛，许萍，张红雨.CD117和CD34在急性白血病中的临床意义[J].临床血液学杂志，2013，26（7）：485-487.

[11]谢建兴，谭禾英，彭敏，等.急性白血病患者CD117与CD34的表达及临床意义[J].中国现代医生，2012，50（25）：58-59.

[12]李建勇，薛永权，阮长耿，等.98例成人急性白血病形态学、免疫学和细胞遗传学分型诊断[J].中华肿瘤杂志，1996，16：746-751.

[13]严敏，李建勇，吴雨洁，等.急性髓细胞白血病62例细胞遗传学特征及其诊断预后价值[J].南京医科大学学报，2004，24（2）：153-155.