2型糖尿病患者血清ChREBP水平与糖尿病肾病的相关性*

陈琰，白倩，蔡妍，赵淑杰

（吉林大学第二医院 内分泌科，吉 林 长春 130041）

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病的微血管并发症，是增加糖尿病患者疾病负担的主要原因。患者一旦进入临床肾病期，肾脏损伤难以逆转。因此，临床需要新的治疗策略来控制其进展。ChREBP是响应葡萄糖的关键转录因子，有研究显示高糖处理过的肾系膜细胞，ChREBP及其下游基因表达均显著增加[1]。本研究旨在通过检测2型糖尿病患者血清ChREBP及相关炎症指标水平，探讨ChREBP与DN的相关性及其可能致病机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2018年1月于吉林大学第二医院内分泌科确诊为2型糖尿病的患者80例作为研究对象。纳入标准：①年龄18～65岁；②符合1999年世界卫生组织颁布的2型糖尿病诊断分型标准[2]。③同意参与本研究，并且资料齐全。排除标准：①1型糖尿病及特殊类型糖尿病；②妊娠、哺乳期女性；③其他类型慢性肾脏病、泌尿系感染等；④心力衰竭、高血压；⑤糖尿病酮症酸中毒、糖尿病高血糖高渗性综合征及乳酸酸中毒等；⑥其他自身免疫性疾病和可能影响泌尿系统的疾病；⑦应用降低尿蛋白药物的患者。患者半年内检测3次24 h尿白蛋白排泄率（24 h urinary alumin excretion rata，24 h UAER），≥2次24 h UAER≥30 mg/24 h患者作为糖尿病肾病组（DN组），24 h UAER＜30 mg/24 h患者作为2型糖尿病组（T2DM组），每组40例。其中T2DM组患者男性20例，女性20例；平均年龄（47.45±14.78）岁。DN组患者男性16例，女性24例；平均年龄（51.85±7.69）岁。同时选取本院健康体检中心同期体检的健康群众40例作为对照组（NC组）。其中，男性21例，女性19例；平均年龄（49.23±5.10）岁。本研究通过院伦理委员会审批，受试者签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 临床资料收集收集研究对象的性别、年龄、病程、身高及体重等资料，并计算BMI。检测患者空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）、糖化血红蛋白（glycosylated hemogloin，HAb1c）、甘油三酯（Triglycerides，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋 白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、血清肌酐（serum creatinine，Scr）、空腹胰岛素（fasting insulin，FINS）及24 h UAER，计算肾小球滤过率（eGFR）=186×Scr-1.154×年龄-0.203×（0.742，如果是女性），计算稳态胰岛素评价指数（homeostasis modeall assessment of insulin resistance，HOMA-IR）=FPG×FINS/22.5。

1.2.2 血清ChREBP及其他炎症指标检测受试者禁食8～10 h，采集肘静脉血，室温静置2 h后3 500 r/min离心10 min，分离上层血清，置于-80℃冰箱中备用。采用长沙达尔锋生物科技有限公司bioRike酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测血清指标，ChREBP检测范围2.5～200.0 ng/ml，检测敏感性≤1.25 ng/ml；HMG-1检测范围250～20 000 pg/ml；检测敏感性≤125 pg/ml；白细胞介素-1β（Interleukin 1β，IL-1β）检测范围1～80 pg/ml，检测敏感性≤0.5 pg/ml；白细胞介素-6（Interleukin 6，IL-6）检测范围0.6～48.0 pg/ml，检测敏感性≤0.3 pg/ml；肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）检测范围1～80 pg/ml，检测敏感性≤0.5 pg/ml。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 18.0统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）或中位数和四分位数间距[M（P25，P75）]表示，比较用t检验、方差分析或H检验；相关分析用Spearman法；影响因素的分析用多因素Logistic回归模型，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般资料和生化指标比较

各组患者的年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。各组病程、BMI、FPG、HAb1c、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、24 h UAER、IL-1β、IL-6、TNF-α、ChREBP、HMG-1、eGFR及HDL-C比较，差异有统计学意义（P＜0.05），病程、BMI、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、24hUAER、IL-1β、IL-6、TNF-α、ChREBP、HMGB-1的水平在DN组最高，NC组最低；eGFR、HLD-C水平在NC组最高。见表1。

表1 各组一般资料和生化指标比较 （n =40）

2.2 血清ChREBP水平与其他指标的相关性

ChREBP与eGFR呈负相关（rs=-0.694，P=0.363），与24 h UAER、IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1呈正相关（rs=0.596、0.711、0.650、0.684和0.515，均P=0.000）。

2.3 2型糖尿病患者DN发病的Logistic回归分析

单因素Logistic回归分析显示，年龄、病程、HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP均与糖尿病肾病发病存在关联（P＜0.05）。将以上因素作为自变量纳入多因素Logistic回归，结果显示：病程、HOMAIR、24 h UAER及ChREBP是糖尿病患者肾脏病变的独立危险因素（P＜0.05）。病程越长，HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP水平越高，患糖尿病肾病的风险越大。见表2、3。

表2 糖尿病患者DN发病单因素Logistic回归分析参数

表3 糖尿病患者DN发病多因素Logistic回归分析参数

3 讨论

随着糖尿病发病率的迅猛增长，DN的发病率亦呈快速上升趋势，据统计40%糖尿病患者合并糖尿病肾脏疾病，在世界范围内已成为终末期肾脏病的首要原因[3-7]。ChREBP是响应葡萄糖的一个关键转录因子，在高糖条件下，ChREBP蛋白的表达上调，其自身的去磷酸化程度、糖基化程度增加，并转位进入细胞核，促进基因的转录[8-9]。有研究发现，高糖激活ChREBP途径，诱导低氧因子HIF1、脂质合成基因及纤维化相关基因的表达可能参与DN的发生[10-11]。本研究检测健康群众、糖尿病和DN患者血清ChREBP的浓度，结果显示DN组患者血清ChREP水平较NC组和T2DM组升高，ChREBP与eGFR呈负相关，与24 h UAER呈正相关。Logistic回归分析显示，病程、HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP是糖尿病患者肾脏病变的独立危险因素，ChREBP水平越高，患糖尿病肾病的风险越大，与上述研究结果大致相符。

炎症反应在高糖环境下可加重胰岛素抵抗，并可促进糖尿病并发症的发生[12]。有研究证实，炎症反应在DN的发展过程中起核心作用[13]。在DN发病早期，巨噬细胞和T细胞即在肾小球和肾间质中积聚，同时激活的巨噬细胞和肾脏内主要的炎症细胞产生大量的促炎、促纤维化和抗血管生成因子等，包括TNF-α、IL-1、IL-6、转化生长因子-β、血小板衍生生长因子及血管紧张素Ⅱ等[14-17]。HMG-1是一种核内非组蛋白，其可在免疫激活和细胞死亡等过程中发生转录后修饰并转移到细胞外参与炎症反应。有研究表明，HMG-1激活MAPK、NF-κb及PKC等信号通路，促进炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β的表达，导致肾脏损伤[18-20]。笔者前期研究发现，2型糖 尿病患者血清HMG-1水平与IL-6、TNF等炎症因子的水平呈正相关；高糖可以显著诱导SV40-MES-13细胞中HMG-1表达；干扰HMG-1可显著改善高糖引发的炎症因子表达[21]。亦有研究验证阻断HMG1与其受体之间相互作用，能够延缓STZ诱导的糖尿病小鼠发展为糖尿病肾病的进程[22]。因此本研究还检测了HMG-1、IL-1β、IL-6及TNF-α的浓度，结果显示DN组患者血清IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1浓度较NC组和T2DM组升高，与上述研究结果一致。相关性分析提示ChREBP浓度与IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1水平呈正相关。因此，笔者认为ChREBP可能通过诱导HMG1及促进炎症因子、促纤维因子的表达和释放，从而导致DN的发生。

综上所述，2型糖尿病患者血清ChREBP水平升高，DN患者更高。因此，血清ChREBP水平升高可能与DN发生、发展相关。