两广交界地区180对反复自然流产夫妇染色体核型分析

马洪熹 黎永鉴

【摘要】 目的 研究染色体核型异常与两广交界地区反复自然流产夫妇之间的关系。方法 对两广交界地区180对反复自然流产夫妇进行外周血染色体核型分析。结果 180对反复自然流产夫妇中，共出现染色体核型异常夫妇46对，染色体核型异常检出率为25.56%（46/180），46对异常核型中染色质多态变异25对（54.35%），染色体倒位11对（23.91%），染色体平衡易位7对（15.22%），罗伯逊易位1对（2.17%），染色体数目异常1 对（2.17%），嵌合体1对（2.17%）。结论 染色体核型异常是导致两广交界地区育龄夫妇反复自然流产的重要危险因素之一。

【关键词】 复发性流产;染色体;核型分析

中图分类号：R714.21;R446.7   文献标志码：A   DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.05.006

【Abstract】 Objective To investigate correlation between chromosomal karyotype abnormality and repeated spontaneous abortion of couples in the border areas between Guangdong and Guangxi.Methods Analysis of chromosomal karyotype in peripheral blood was performed in 180 couples with repeated spontaneous abortions in the border areas between Guangdong and Guangxi.Results Among 180 couples with repeated spontaneous abortion，46 couples had abnormal chromosome karyotype，detection rate of which was 25.56%（46/180）.Among 46 couples with abnormal chromosome karyotype，25 couples（54.35%） had chromatin polymorphism variation，11 couples（23.91%） had chromosome inversion，7 couples（15.22%） had balanced translocation of chromosome，1 couple（2.17%） had Robertsonian translocation，1 couple（2.17%） had abnormal chromosome numbers，and 1 couple（2.17%） had chimera.Conclusion Chromosomal karyotype abnormality is one of the important risk factors for repeated spontaneous abortion in couples of childbearing age in border area between Guangdong and Guangxi.

【Key words】 repeated spontaneous abortions;chromosome;karyotype analysis

自然流產通常是指妊娠不足20周，胎儿体重不足500 g的妊娠物自然丢失。反复自然流产（Repeated spontaneous abortion，RSA）亦称复发性自然流产（Recurrent spontaneous abortion），一般指与同一配偶发生连续3次或3次以上的自然流产[1]。近年来国内外部分学者[2～3]提出将连续发生2次或2次以上的自然流产者纳入RSA的范畴。RSA作为常见的临床不育症，严重影响了广大妇女的生殖健康。因此对反复自然流产的原因进行准确的判断有着重要的现实意义。目前的研究表明：RSA病因主要涉及染色体核型、内分泌、解剖、免疫、感染、不良环境、心理等因素。本文对2014年1月至2018年9月间来我院就诊的180对两广交界地区反复自然流产的夫妇进行了外周血染色体核型分析，研究该组病例异常染色体出现的频率规律。

1 资料与方法1.1 一般资料 选择2014年1月至2018年9月来我院就诊的两广交界地区反复自然流产遗传咨询者共180对夫妇（360例）。男性年龄24～45岁，女性年龄20～43岁。纳入标准为：就诊夫妇至少有2次以上的自然流产史，所有病例均排除了内分泌、生殖系统、免疫、感染、不良环境、心理等干扰因素。

1.2 主要仪器 普通低速离心机、37℃普通恒温培养箱、37℃水浴箱、干燥箱、Olympus CKX41型显微镜（日本Olympus公司）、LABBM9080全自动染色体核型扫描分析系统（上海北昂医疗技术有限公司）。

1.3 主要试剂 一生骏细胞培养液、达晖淋巴细胞培养液、秋水仙素、KCL低渗液、固定液、胰蛋白酶、吉姆萨染液。

1.4 研究方法 常规外周血染色体制备法，在无菌条件下，接种外周血于淋巴细胞培养基中，每个标本接种A、B瓶。常规条件下培养、制片，经G显带法处理后镜检。每个病例计数20～30个染色体中期分裂象细胞，并诊断分析5个细胞核型、数目。如疑为嵌合体或镶嵌体，计数100个核型，并计算百分比。

2 结  果  180对两广交界地区的反复自然流产夫妇中，共出现染色体核型异常夫妇46对，染色体核型异常检出率为25.56%（46/180）。46对异常核型中染色质多态变异25对（54.35%），染色体倒位11对（2391%），染色体平衡易位7对（15.22%），罗伯逊易位、染色体数目异常、嵌合体各1 对（各占217%）。46对染色体核型异常夫妇均为一方出现异常，无夫妇双方异常。46对染色体核型异常夫妇比例及构成比见表 1;46对染色体核型异常夫妇类型频率分布见表2。

3 讨  论  染色体核型异常是导致育龄夫妇反复自然流产的重要危险因素之一，有数目异常和结构异常两种形式。如今，外周血染色体核型分析作为反复自然流产夫妇遗传咨询中重要组成部分也得到了认可，而针对两广交界地区反复自然流产夫妇染色体分析的系统报道还较为少见。本研究对两广交界地区180对（360例）反复自然流产夫妇的外周血染色体核型分布频率进行研究分析，共检出染色体核型异常夫妇 46对，异常检出率为25.56%。而按例数计算，异常检出率为12.78%（46/360），与国内外文献报道的两广其他地区5.2%～14.52%的检出率基本相符[4～9]。

本研究在180对反复自然流产患者中，检出染色体平衡易位7对夫妇7例病例，异常例数检出率为1.94%。染色体平衡易位作为常见的染色体结构异常类型，是引起自然流产的因素之一。平衡易位指的是同时断裂的两条染色体，断片相互交换位置之后重接而形成两条衍生染色体，该易位原有基因总数和染色体片段均无变化，只是位置发生了改变。因此，携带者表型是正常，对个体发育一般无严重影响。但在生育过程中，理论上形成18种配子，与正常配子结合，可形成18 种合子，正常的仅有一种，平衡易位携带者有一种，其他16种以三体或部分单体的形式出现，由于遗传物质的不平衡而导致流产或死胎[10]。所以表型正常的平衡易位携带者夫妇，在再次妊娠时，应做产前诊断明确胎儿染色体核型是否正常，以决定是否继续妊娠。

罗伯逊易位是指两个D组或G组的染色体在着丝粒或其近端附近断裂后融合成为一个染色体，是相互易位的一种特殊形式[10]。在我院180对反复自然流产夫妇中，检出有1对夫妇1例病例存在罗氏易位，异常例数检出率为0.28%。罗氏易位分为同源罗伯逊易位和非同源罗伯逊易位两种形式。非同源罗伯逊易位携带者产生的6种配子中，正常配子、携带者、不平衡配子的概率分别为1/6、1/6、4/6，因此存在有正常、异常胚胎的孕育情况发生。我院检出的1例病例为非同源罗伯逊易位，该对夫妇出现了怀孕2次，自然流产2次的症状。而同源罗伯逊易位产生的2种配子，与正常配子结合只能形成单体或三体的合子，一般会出现流产或三体方式存活。近年来，有学者认为inv（9）与其他倒位一样会形成遗传效应，提示inv（9）可能与反复自然流产有一定相关性[11～12]。本研究中，46对存在染色体异常的夫妇中，检出11对夫妇11例病例存在倒位核型，异常检出率为3.06%，其中9对夫妇9例病例为inv（9）。染色体倒位是指一条染色体出现断裂后，产生的片断倒转 180 度后重新连接而形成，一般遗传物质无增减，因此倒位携带者表型多正常。倒位携带者理论上可形成4 种配子：两种为带有部分重复及部分缺失的重组染色体，一种为倒位染色体，还有一种为正常染色体。前两种异常配子与正常配子结合后，由于基因的平衡受到破坏而表现为流产等不良妊娠结局。

染色体多态性是人群内各个体之间出现染色体形态或着色方面的变异，其涉及区域一般在遗传上含高度重复DNA序列、不活跃的结构异染色质区。常见的染色体多态性见于1号、9号和16号异染色质区增加以及D组和G组染色体随体的增加或缩短，还有Y染色体的多态性，即大Y和小Y[13]。传统观点认为，染色体多态性一般无临床表型效应，通常认为属于正常的变异。但近几年来，越来越多的文献报道表明染色体的多态性可能与流产有关[14～17]，其引起临床效应的机理可能为染色体多态部分造成遗传物质的增减表现出功能异常，影响了细胞分裂，从而导致胚胎发育障碍，致使生育夫妇反复出现流产等临床症状。本研究中，25对夫妇25例病例出现染色体多态性变异情况，占总受检人群的6.94%，占核型异常例数构成比为54.35%，也说明了多态性变异在本研究中与反复流产有关。

此外，本次研究检出了1对夫妇中丈夫存在有核型为47，XYY的染色体数目异常情况，该患者除精子畸形率高之外无其他异常表型，其妻孕2次自然流产2次。嵌合体1对，核型为46，XY/46，XY，inv（9）（p11;q13），因其在遗传过程中产生异常配子而导致表现出流产、死胎等情况。

综上所述，染色体核型异常是引起两广交界地区育龄夫妇反复自然流产的重要危险因素之一，对于反复流产夫妇进行染色体核型检查是非常有必要的，应在临床上大力推广。从临床医生角度，可以提供诊疗依据;从患者角度，可以指导再次妊娠;从国家层面，可以保障人口出生素质。

参 考 文 献

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