血清chemerin、脂联素与子痫前期的相关性研究

马 莉，范立叶

(潍坊市妇幼保健院产科，山东 潍坊 261011)

妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)是妊娠期特有的疾病，其基本病理特征是全身小动脉痉挛，导致全身各系统器官的血液灌流减少，可严重危害母儿健康，甚至导致母儿死亡。该病病因和发病机制复杂，近年来血管内皮细胞损伤和胰岛素抵抗成为妊娠期高血压疾病研究的热点。脂联素(adiponectin，APN)和chemerin被证实为新的脂肪细胞因子，在脂肪组织中高表达，与脂代谢、血管内皮功能、胰岛素抵抗、炎症反应等有关，影响血糖和脂质稳态及血压的调节。本研究主要是通过检测妊娠期高血压疾病患者血清中的脂联素和chemerin的表达情况，以研究其在妊娠期高血压疾病发病过程中的作用及意义。

1研究对象与方法

1.1研究对象

选取2016年12月至2018年1月在潍坊市妇幼保健院系统产前检查的孕妇共110例作为研究对象，其中正常妊娠30例作为对照组，妊娠期高血压疾病患者80例作为疾病组(其中妊娠期高血压组22例，轻度子痫前期组30例，重度子痫前期组28例)。对照组孕妇年龄为(27.63±1.81)岁、孕周为(37.25±0.49)周、身体质量指数为(26.78±1.53)kg/m2。疾病组孕妇年龄为(28.29±1.56)岁、孕周为(36.56±0.64)周、身体质量指数为(28.75±1.69)kg/m2，两组一般临床特征比较均无统计学差异(均P>0.05)。

1.2病例纳入标准

妊娠期高血压疾病的诊断和分类标准参考谢幸主编的第8版《妇产科学》，所选孕妇平素月经规则，孕期均经彩超核对孕周无误，所有研究对象均无其它合并症，无烟酒不良嗜好。所有孕妇在测量血压前未使用任何降压药物治疗。产后12周返院随访。

1.3血清采集及检测

孕妇于检查前一晚上开始禁食10～12h，次日清晨空腹抽2管肘静脉血，每管4mL，一管送至检验科用全自动生化分析仪检测血脂水平，另外一管静置1h后，3 000r/min，离心15min，在超净工作台中用微量加样器吸取血清后加入到已灭菌的EP管中。应用双抗体夹心法检测血清chemerin的水平，实验试剂人chemerin试剂盒购于北京市联动生物试剂有限公司。应用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测血清脂联素水平，试剂盒由上海酶联生物科技有限公司生产。

1.4统计学方法

本研究数据采用SPSS 19.0统计软件进行分析，数据采用均数±标准差来描述，采用t检验两组数据之间的比较。用单因素方差分析做多组数据之间的比较。使用Pearson分析做关联性分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组血清chemerin、脂联素、血脂浓度对比

疾病组血清chemerin浓度明显高于对照组(t=-13.92，P<0.05)，随病情加重逐渐升高，重度子痫前期组变化最明显，差异有统计学意义(t=-6.39，P<0.01)。妊娠期高血压组患者血清中脂联素的水平与对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)；轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者的血清脂联素浓度均明显低于对照组，差异均有统计学意义(t值分别为8.17、4.62，均P<0.01)。疾病组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)均高于对照组，差异均有统计学意义(t值分别为-3.06、-1.98、-2.75，均P<0.05)；疾病组高密度脂蛋白(HDL)低于对照组，差异有统计学意义(t=2.03，P<0.05)，见表1。

表1各组孕妇血清chemerin、脂联素、血脂水平的比较

注：*与对照组比较，P<0.05；#疾病组与对照组比较。

2.2两组血清chemerin、脂联素浓度与血脂的相关性

子痫前期组患者的血清chemerin、脂联素浓度与TC、TG、HDL、LDL的水平均显著相关(chemerin：r分别为0.616、0.558、-0.473、0.392；脂联素：r分别为-0.635、-0.472、0.430、-0.429；均P<0.05),见表2。妊娠期高血压组的血清chemerin、脂联素浓度与血脂水平无明显相关(P>0.05)。

表2子痫前期患者血清脂联素、chemerin和血脂的相关性(r)

Table2CorrelationbetweenserumAPN,chemerinandbloodlipidinpatientswithpreeclampsia(r)

项目TC(mmol/L)TG(mmol/L)HDL(mmol/L)LDL(mmol/L)脂联素-0.635-0.4720.430-0.429chemerin0.6160.558-0.4730.392

注：均P<0.05。

3讨论

3.1 Chemerin与妊娠期高血压疾病

3.1.1血清chemerin蛋白的生理作用

Chemerin也称为他扎罗汀诱导基因，最早是1997年Nagpal等应用他扎罗汀药物治疗银屑病时克隆出的，他扎罗汀药物可以使其表达上调。人chemerin基因位于染色体7q36.1，长度为3 289bp，包含4个外显子及3个内含子。通过定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)或者Northern杂交技术，人体肝脏、白色脂肪组织、胎盘及肾脏中均有chemerin mRNA的较高表达，肺脏、垂体、卵巢、皮肤、肾上腺、肠道、胰腺中也有表达。2007年Bozaoglu等证实chemerin是一种新的脂肪细胞因子，在脂肪组织中高表达，对脂肪细胞的分化和代谢有调节作用，并且与肥胖和代谢综合征有关，影响血糖和脂质稳态及血压的调节。

3.1.2血清chemerin蛋白在妊娠期高血压疾病中的变化及作用

脂肪细胞能影响母体代谢、胰岛素抵抗(IR)及炎症反应，引起糖尿病、多发性硬化症及高血压。妊娠期高血压疾病患者存在IR、糖耐量异常、脂代谢异常、低度炎症反应、肥胖等病理状态，分娩后发生远期心血管及代谢性疾病的风险明显升高。由此推测脂肪细胞因子可能与妊娠期高血压疾病的发病过程有关。Bozaoglu等人于2007年研究表明chemerin在糖脂代谢中发挥重要作用。敲除成熟脂肪细胞的chemerin基因能减少其它调节糖脂代谢稳态相关基因的表达，如葡萄糖转运蛋白-4(glucose transporter-4)、APN、瘦素(leptin)等，导致基础脂肪分解率及磷酸二酯酶抑制剂刺激的脂肪分解率的降低。Fasshauer等人于2008年研究发现脂肪细胞因子如leptin、APN、抵抗素(resistin)、内脂素(visfatin)、apelin、载脂蛋白-2(lipocalin-2)，炎症介质如白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等能表达于子宫内，对妊娠期血脂代谢及炎症反应的调节发挥一定的作用，参与了妊娠期高血压疾病的发病过程。Ernst等人于2010年研究发现，在肥胖/糖尿病小鼠脂肪组织、肝脏及骨骼肌细胞中，血清chemerin表达水平升高，外源性给予chemerin加重了葡萄糖耐受不良，降低了血清胰岛素水平，并且减弱了组织对葡萄糖的摄取。血清chemerin水平升高对糖脂代谢的调节可能参与了妊娠期高血压疾病的病理生理过程，但是本研究的样本量太小，还需更大样本量进一步研究。2009年Lehrke等人的研究表明，血清chemerin水平与IL-6、C反应蛋白(CRP)、TNF-α等炎症介质呈正相关，IL-6、TNF-α能使脂肪组织表达和分泌chemerin增加。在3T3-L1细胞和小鼠白色脂肪细胞中，炎症介质TNF-α和IL-1能通过NF-β途径，使chemerin的合成和分泌增加。炎性介质(如TNF-α、IL-6、氧自由基等)能促进氧化应激，持续生成过氧化物，引起血管内皮损伤，导致血管内皮功能障碍，缩血管物质血栓素A2(TXA2)的产生增加，舒血管物质前列环素产生减少，出现痉挛性血管收缩，导致血压升高。由以上结果可以推测chemerin可能通过促进炎症反应，参与了妊娠期高血压疾病的发生、发展。

Cetin等人[1]通过研究发现血清chemerin在重度子痫前期患者显著高于轻度子痫前期患者和健康孕妇，血清chemerin水平与患者的收缩压/舒张压、CRP、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、蛋白尿、住院时间成正相关；与分娩孕周、新生儿出生体重及出生Apgar评分呈负相关，母体血清>252.0ng/mL预测子痫前期的敏感度为95.5%，特异度为95.7%，并得出结论血清chemerin水平与子痫前期的严重程度呈正相关，与不良新生儿结局有显著的相关性。Turgut等人[2]发现肥胖的子痫前期患者血清chemerin和游离脂肪酸(FFA)水平高于非肥胖子痫前期患者和正常妊娠者。与子痫前期组相比，正常组的氧化状态(TOS)和氧化应激指数(OSI)水平显著降低，而肥胖和非肥胖先兆子痫患者则没有发现差异。Xu等人[3]招募518名孕妇，横断面研究表明，子痫前期患者的母体血清chemerin浓度显著升高，然而，关于chemerin和子痫前期之间因果关系的数据有限，线性回归分析发现血清chemerin水平与血浆C反应蛋白水平呈正相关，Logistic回归分析表明，身体质量指数和血清chemerin水平似乎是先兆子痫的独立预测因子。

本实验结果显示，疾病组患者血清chemerin的浓度显著高于血压正常的孕妇，重度子痫前期患者血清chemerin浓度明显高于轻度子痫前期患者，这与Cetin[1]、Xu等[3]的研究结果是一致的。但PE患者血清chemerin水平升高的具体机制及其对PE发病的具体作用还需要进一步研究阐明。

3.2脂联素与妊娠期高血压疾病

脂联素是由脂肪细胞分泌的一种特异性的激素蛋白，1995年纽约爱因斯坦医学院的Scherer等首先将其从鼠的脂肪细胞中分离出来。1999年Arita等命名为脂联素，并建立测定人血清中脂联素浓度的方法。脂联素能增加机体对脂质的摄取及氧化，使肌肉组织和肝脏中甘油三酯和游离脂肪酸的水平降低，从而改善脂代谢。脂联素还可增加外周组织对胰岛素的敏感性，降低胰岛素抵抗。脂联素有保护心血管内皮的功能，具有抑制动脉粥样硬化形成和抑制炎症反应等作用。综上所述，脂联素是与肥胖呈负相关的细胞因子。代谢综合征是一种合并有高血压与脂质及血糖代谢异常的综合征，它是由基因3q27决定的，而脂联素的编码基因也恰巧位于该区域。妊娠期高血压疾病在某种程度上与代谢综合征存在相似的临床表现，推测脂联素可能与妊娠期高血压疾病相关。

Ouchi等人于2000年进行的体外试验显示，脂联素显著抑制了TNF-α诱导的单核细胞对动脉内皮细胞的黏附作用，抑制了内皮细胞中黏附分子的表达，并且具有剂量依赖性，从而减轻内皮细胞的炎症反应。其中部分是通过环磷酸腺苷(cAMP)依赖的调节核因子κB的信号传导途径而发挥作用的。Shimabukuro等人于2003年在受损伤的血管壁内皮中检测到脂联素，而在未损伤的血管壁上则无脂联素表达。Chen等于2006年研究发现在人的胎盘组织中，脂联素在mRNA和蛋白水平均有表达，主要在合体滋养层中表达。放射免疫分析显示胎盘在体外培养基可分泌脂联素。因此推测胎盘是妊娠期母体血清中脂联素的重要来源。Wang等人[4]采用ELISA法测定血APN浓度，发现患者的APN水平明显低于对照组。并且检测了脂联素中两个单核苷酸多态性+45T>G(rs2241766)和+276G>T(rs1501299)的基因型、等位基因和单倍型的频率。他们发现SNP+276 TT基因型与防止妊娠期高血压疾病显著相关，而G基因型的作用则相反。与对照组相比，SNP+276的基因型和等位基因频率分布有显著差异。揭示了两个单核苷酸多态性与妊娠期高血压疾病患者脂质代谢紊乱之间的关联。

本研究采用ELISA法检测研究对象的血清脂联素的浓度，妊娠期高血压组患者的血清脂联素水平与对照组相比，差异无统计学意义。轻度子痫前期患者的血清脂联素水平(7.68±1.16μg/mL)和重度子痫前期患者的血清脂联素水平(5.27±1.35μg/mL)均明显高于对照组(均P<0.05)。发现患者血清脂联素浓度与TC、TG、LDL和HDL的升降均显著相关(P<0.05)。韩乃枝[5]的研究结果与本研究结果一致，重度子痫前期组孕妇的血清脂联素水平低于轻度子痫前期组。但Ramsay等在2003年研究发现正常人妊娠时血浆脂联素浓度没有升高，患妊娠期高血压疾病的孕妇血清中脂联素的水平并不降低，反而异常升高，他认为此种现象可能是通过促进脂肪的利用而减轻内皮损伤的生理反应，或是继发于过度的非特异性的脂肪细胞的脂解作用。沈永红等人[6]也发现重度子痫前期组血清脂联素和可溶性血管内皮生长因子1(sFlt-1)水平均明显高于轻度子痫前期组和健康对照组，提示脂联素和sFlt-1可作为子痫前期的预测指标。脂联素在妊娠期高血压疾病中的具体作用有待于进一步阐明。

综上所述，chemerin及脂联素的表达都与妊娠期高血压疾病的病理过程密切相关，然而分娩后两种因子的表达是否仍高于正常分娩的产妇，以及通过何种机制导致疾病的发生，与患者远期发生心血管疾病的关系需要进一步研究。本实验的不足在于研究例数有限，没有对产妇和新生儿进行长期的随访。且妊娠期高血压疾病的病因和发病机制复杂，多种因子参与了血管内皮细胞损伤，单纯研究chemerin及脂联素存在一定的局限性，若综合其他因素，开展更大规模的临床研究，会为妊娠期高血压疾病的早期预防和诊断、治疗提供充分的理论和临床实验依据。