T细胞抗原受体Vβ7阳性T细胞检测在乙型肝炎患者中的临床应用

邹秀利

（广东省梅州市中医医院（梅州市田家炳医院）检验科，广东 梅州 514000）

乙型肝炎是一种感染性疾病，主要由乙型肝炎病毒引起，以肝脏病变为主要特征。乙型肝炎临床患者主要表现为乏力、食欲下降、肝区疼痛、恶性、腹部不适等，部分患者伴有黄疸、发热等症状，如果治疗不及时随着病情发展会出现肝硬化，严重的则发展为肝癌[1]。本次研究通过对乙型肝炎患者外周血TCR Vβ7阳性T细胞增殖活性进行检测，分析其应用于乙型肝炎患者中的临床价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2015年4月至2017年8月我院体检正常的18例健康体检者作为正常组，选取同期体检为急性乙型肝炎患者15例为急性乙型肝炎组，同期体检为慢性乙型肝炎患者35例作为慢性乙型肝炎组。正常组：男10例，女8例，平均年龄（43.6±2.8）岁；急性乙型肝炎组：男9例，女6例，平均年龄（43.7±2.6）岁；慢性乙型肝炎组：男23例，女13例，平均年龄（43.5±2.4）岁，所有体检者均自愿参加，医学伦理会批准通过，组间具有比较意义（P＞0.05）。

1.2 方法：①外周单个核心细胞处理：采取静脉血3～4 mL（无菌）置入含有抗凝剂的食管中，加入Hank液4 mL进行稀释，用Ficoll液对外周血单个核细胞进行分离，并吸取，用RPMI-1640培养液进行洗涤，次数3～4次，然后将其加入浓度为1×105/mL 48孔培养板中，并置浓度为5%CO2培养箱中对其进行培养，24 h后，通过孔适当的加入PHA、HBsAg重组抗原，24 h后，用流式细胞术对TCR Vβ7+T细胞检测。②荧光抗体对细胞标记：将细胞培养悬液分三组，并标记如下：A加免疫球蛋白20 μL。B加入抗CD4-PE10 μL以及抗TCRVβ7-PEcy5，剂量为10 μL。C加入抗CD8-PE10 μL以及TCRVβ7-PEcy5，剂量为10 μL，加入培养后细胞，保证细胞数为1×105，将其置于暗室，时间约20 min。③流式细胞仪检测：A管对流式细胞仪电压进行调节，然后对B管、C管进行检测，测定结果则为CD4+TCR Vβ7+T细胞、CD8+TCR Vβ7+T细胞含量的百分率。

1.3 统计学方法：统计学软件为版本为SPSS21.0统计学软件分析研究中的数据结果，计量资料采取（±s）表示，t检验，P＜0.05说明两组数据统计学检验有差异。

2 结 果

2.1 CD4+TCR Vβ7+T细胞含量结果：正常组、急性乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组之间比较，CD4+TCR Vβ7+T细胞含量结果有统计学差异（P＜0.05），见表1。

表1 CD4+TCR Vβ7+T细胞含量（%，s）

表1 CD4+TCR Vβ7+T细胞含量（%，s）

images/BZ_152_175_1945_1196_1991.png急性乙型肝炎组 15 7.92±0.95 3.65±0.38慢性乙型肝炎组 35 7.14±1.05 1.49±0.15正常组 18 8.14±0.91 3.79±0.19 F-6.716 689.194 P-0.006 0.001

2.2 CD8+TCR Vβ7+T细胞含量结果：正常组、急性乙型肝炎组与慢性乙型肝组CD8+TCR Vβ7+T细胞含量比较，有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 CD8+TCR Vβ7+T细胞含量（%，）

表2 CD8+TCR Vβ7+T细胞含量（%，）

images/BZ_152_175_2458_1196_2504.png急性乙型肝炎组 15 10.85±1.61 5.81±0.11慢性乙型肝炎组 35 10.41±1.40 2.13±0.16正常组 18 11.06±0.71 5.71±0.15 F-1.519 4128.453 P-0.087 0.000

3 讨 论

TCR是T细胞识别抗原的功能性结构，属于其特有的抗原受体。T细胞抗原受体共包括4中，分别为TCRα、TCRβ、TCRγ、TCRδ，T细胞抗原受体β是其中之一[2]。外周血T细胞中TCRαβ型T细胞占比例约超过95%，TCRγδ型T细胞占比例1%～5%，且成熟的αβT细胞多为CD4+、CD8+单阳性细胞，进一步将其分为两个亚群，分别为CD4+、CD8+，增强吞噬细胞介导抗感染作用、特异性杀伤靶细胞作用是其主要的效应功能[3]。

Vβ有24个亚家族，其中Vβ7基因具有较强的识别抗原，T细胞激活杀伤等作用。本次研究结果显示，在PHA刺激下，TCRVβ7+T细胞处于增殖状态，说明研究中应用的细胞具有一定的增殖能力。且在PHA刺激下，CD4+TCRVβ7+T细胞也处于增殖状态，组间阳性比例有差异（P＜0.05），HBsAg刺激下，正常组、急性乙型肝炎组CD8+TCRVβ7+T细胞含量、CD4+TCRVβ7+T细胞含量均高于慢性乙型肝炎组（P＜0.05），说明慢性乙型肝炎组患者的TCR Vβ7+T细胞增殖对该刺激物不敏感，对该结果分析，可以与TCRVβ7+T细胞增殖活血低有关，进而导致机体清除功能下降，造成乙型肝炎病毒在体内停留时间较长。

综上所述，在乙型肝炎患者的临床检测中，应用TCR Vβ7+）T细胞检测，可以对患者机体的免疫功能予以动态监测，对乙型肝炎患者的检测具有重要的价值。