猪塞内卡病毒感染的最新研究进展（续2）

唐彩琰

摘 要：主要介绍塞内卡病毒的致病性证据、免疫应答和诊断等。

关键词：猪；塞内卡病毒；水疱性疾病

3 塞内卡病毒的致病性证据

9周龄和4月龄猪试验性感染当代塞内卡病毒毒株的结果显示了该病毒与猪水疱病之间的关联。在这两项研究中，塞内卡病毒的潜伏期均为4 d～5 d。在感染急性期，扁桃体是该病毒復制的主要部位之一。病毒血症期短，持续7 d，接种后第3天血清中的塞内卡病毒基因组拷贝可达到峰值（约1×106.5/mL），随后病毒滴度不断减小，直至30 d后检测不到病毒。

塞内卡病毒可引起猪的急性自限性水疱性疾病。接种猪在其鼻吻部、唇部和/或蹄部（尤其是在冠状带和/或趾间间隙）出现病变。试验性感染塞内卡病毒的猪的其他临床表现包括嗜睡、跛行和厌食。感染期间可观察到多病灶深部溃疡和皮肤糜烂/擦伤，最终形成陈年病变。

试验感染的猪仅在扁桃体、脾、淋巴结和肺上可见组织显微镜改变，淋巴组织有轻度到中度增生，多病灶轻度肺不张，淋巴细胞、血浆细胞和肺部巨噬细胞偶发弥漫性充血并伴有多病灶轻度血管周积聚。研究显示塞内卡病毒在组织中分布广泛，在疾病感染的急性期，病毒RNA和感染性颗粒在肺、纵隔和肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏、小肠和大肠以及扁桃体中均可检测到。恢复期猪的不同器官（除肺、心脏和肝脏外）的塞内卡RNA呈阳性，但在以后的感染中不能从这些组织中分离到活的病毒颗粒。

根据试验研究，塞内卡病毒可持续排毒28 d。该病毒可经口腔、鼻腔分泌物和粪便排出。排毒高峰期出现在猪感染后1 d～5 d，相对于鼻腔分泌物和粪便而言，口腔分泌物中的病毒量更高。此外，口腔分泌物、粪便和鼻腔分泌物分别在21 DPI（感染后天数Days Postinfection，DPI）、10 DPI和7 DPI成功分离到塞内卡病毒的感染性颗粒。自然和试验性感染塞内卡病毒的结果表明，感染了塞内卡病毒的猪的口腔/鼻腔分泌物、粪便以及尿液都可能会通过使用相同设施的猪之间的接触直接传播病毒，或通过病毒污染环境间接传播。然而，我们还需要进一步研究来证实这些分泌物/排泄物在田间条件下对塞内卡病毒传播的作用。

4 对塞内卡病毒的免疫应答

目前，只有少数研究评价了宿主对塞内卡病毒感染的免疫应答。这些研究表明，田间条件下受感染和未受感染的母猪以及长期接受试验挑战的育肥猪，塞内卡病毒感染可诱导早期免疫反应。无论疾病的临床表现如何，塞内卡病毒感染后约5 d就可发生血清转化。随着中和抗体滴度增加，疾病的严重程度、组织病毒载量、病毒血症和病毒脱落降低，这表明抗体反应可从体循环和大多数器官、排泄物和分泌物中逐渐清除塞内卡病毒。

塞内卡病毒特异性免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）抗体的最大浓度持续约10 d（从5 DPI到15 DPI），随后血清IgM浓度从21 DPI下降到无法检测的滴度。相比之下，塞内卡病毒特异性IgG应答出现较晚，21 DPI后有强积极应答。

自然感染塞内卡病毒的猪其病毒抗体滴度不同，间接荧光抗体（Indirect Flurescent Antibody，IFA）试验或病毒中和（Virus Neutralization，VN）试验检测到的滴度在160～2 880之间，但巴西临床感染动物的VN试验可检测到更高的滴度（≥4 096）。

5 塞内卡病毒诊断

目前许多诊断测试可用于检测塞内卡病毒感染和/或其与病变和疾病的关联。除新一代测序技术（Next-generation Sequencing，NGS）外，传统PCR和定量RT-PCR（qRT-PCR）分子检测是最常用的技术。分子检测，尤其是qRT-PCR，是任何水疱性疾病的金标准，因为这种方法快速、敏感且特异，能够快速并准确地诊断水疱性疾病，包括从不同生物样本中检测塞内卡病毒基因组。分子学检测诊断塞内卡病毒的一个缺点是，由于塞内卡病毒感染的进程不同，不同生物样本中病毒脱落和/或载量不同导致检测结果不一致。因此，应收集多种样本，包括血清、扁桃体、粪便、口腔和水疱液，通过分子检测对塞内卡病毒进行筛选。

目前可用的其他诊断工具包括免疫组化和原位杂交，这两种方法分别用来鉴定组织样本中的特定病毒抗原和核酸。不同研究组已成功使用这两种技术诊断塞内卡病毒相关疾病。虽然仅有组织病理学评价不能直接判定为塞内卡病毒感染，但这项技术的结果可指导选择适合的组织/器官样本进行免疫组化和原位杂交分析。

间接和竞争性酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）、IFA和VN试验均可用于猪塞内卡病毒的抗体检测筛选。抗体检测分析的主要优点是具有在流行病学研究、大规模诊断程序和/或流行病学监测中处理大量样本的能力，表明猪群过去有病毒暴露和/或存在史。

无论选择何种检测方法，在临床上都难以区分猪塞内卡相关疾病和经典病毒性囊泡感染，尤其是口蹄疫。对于主要的生猪生产国，出现临床病史和/或表明可能存在水疱性疾病的病变时，都需要进行完整的水疱性外来动物疾病调查，因为塞内卡病毒感染可能会对快速报告猪口蹄疫产生不利影响。□□

（待续）

原题名：Update on senecavirus infection in pigs（英文）

原作者：Raquel A. Leme、Alice F. Alfieri和Amauri A. Alfieri（巴西）