茶多酚提取工艺影响因素探究

杨金伟，杨 斌

（广西壮族自治区产品质量检验研究院，广西 南宁 530007）

茶叶是人们日常生活中最重要的食品和保健品之一，多年来一直被广泛饮用。研究表明，茶叶中的有效营养成分为茶多酚。茶多酚功效很多，例如，在较长时间内可使食品保持原有营养水平和色泽，能够防止食用油类、食品的腐败变质，同时消除异味。另外，茶多酚不仅用于配制茶味风味饮料，还能抑制多种有益维生素的降解破坏，保证饮料中的营养成份[1]。所以茶多酚应用前景广阔，发展潜力巨大。

研究表明，茶多酚是一类以儿茶素为主体的多酚类化合物的复合体，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等[2]。茶多酚一方面具有抗菌消炎、降血脂、降压、预防心脑血管疾病等功效，另一方面也具有较强的防癌抗癌和抗衰老作用，延缓衰老。利用科学高效的方法提取茶叶中的茶多酚是科研人员需要解决的问题，研究茶叶中茶多酚的提取工艺具有重要意义。目前常用的茶多酚测定方法有酒石酸亚铁比色法、高锰酸钾滴定法、高效液相色谱法、原子吸收法等[3]。多酚类物质易溶于水，但是水却不是提取多酚的最优浸提溶剂。这就要求在提取时加入有机溶剂来破坏氢键提高多酚类物质的提取率，因此笔者选用甲醇-水溶液来浸提多酚类物质[4-5]。本文分别对几种因素做了试验，检验各种因素对茶多酚提取率的影响。

1 实验部分

1.1 仪器与材料

仪器：紫外分光光度计、离心机、恒温水浴锅、电子天平。

试剂：7.5%碳酸钠、甲醇水（7∶3）、10%福林酚试剂、没食子酸标准储备溶液（1000ug/mL）。

1.2 标准曲线（没食子酸工作液）的建立

分别移取没食子酸标准储备液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于 100mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，得到浓度分别为0、10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL。利用分光光度计在765nm波长下用1cm比色皿测定其吸光度，测得不同浓度标液对应的吸光度分别为 0.000、0.109、0.219、0.326、0.428、0.540。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线见图1。

1.3 步骤

称取0.2g左右的茶叶于10mL离心管中，加入5mL预先放入70℃水浴的甲醇水在70℃水浴中放置10min，中间不断地搅拌，浸提后冷却，放入离心机中离心，提取上清液转入10mL比色管中，残渣再用5mL甲醇水提取一次，最后定容至10mL，摇匀，过0.45μm膜。吸取1mL滤液用水定容至100mL。然后分别吸取没食子酸工作液、水、茶叶滤液1.0mL于10mL比色管中，分别加入5.0mL福林酚试剂，摇匀，反应5min，再加入4.0mL碳酸钠溶液，摇匀，放置一定时间后，在765nm波长下，用1cm比色皿测定吸光度，根据标准曲线计算茶多酚含量。

图1 茶多酚标液的标准曲线

2 结果与讨论

2.1 提取温度对茶多酚含量的影响

称取0.2g茶叶，分别加入5mL甲醇水，分别在50℃、60℃ 、70℃、 80℃ 水浴下提取两次，在紫外分光光计下测定其吸光度，计算茶多酚含量，其结果分别为14.3%、17.8%、19.0%、18.2%。

结果表明，在一定范围内，随着提取温度的提高，茶多酚含量逐渐上升。从结果看出，当提取温度为60℃、70℃和80℃时，茶多酚含量为17.8%、19.0%和18.2%。即提取温度超过70℃时，茶多酚含量逐渐下降。一般认为，当温度为80℃时，提取试剂处于微沸状态，高温会导致茶多酚部分降解变性，故含量有所降低。所以选择70℃水浴为最佳提取温度。

2.2 不同浓度的提取液对茶多酚含量的影响

称取0.2g茶叶，在70℃水浴下分别加入50%、60%、70%、80%的甲醇水提取两次，在紫外分光光计下测定其吸光度，计算茶多酚含量，其结果分别为16.6%、17.2%、19.0%、19.2%。

结果表明，随着提取液浓度的逐渐增加，茶多酚含量逐渐增加。从结果可以看出，当提取液浓度达到70%和80%时，茶多酚含量分别为19%和19.2%，增加并不明显，说明提取基本达到平衡。在实验中基于成本和减少试剂用量的考虑，故选择70%的甲醇水作为最佳提取浓度。

2.3 不同的反应时间对茶多酚含量的影响

称取0.2g茶叶，在70℃水浴下加入70%的甲醇水提取两次，测试液加入显色剂后摇匀分别放置 30min、45min、60min、75min、90min 测定其吸光度，计算茶多酚含量，结果见表1。

表1 不同反应时间对应茶多酚含量

结果表明，随着反应时间的逐渐延长，茶多酚含量逐渐增加，但是当放置时间达到60min时，茶多酚含量达到最大，继续延长放置时间，茶多酚含量反而下降。通过分析认为，茶多酚的稳定性不好，放置时间过长，易发生氧化变性，导致检测的茶多酚含量下降。所以选择时间60min为最佳放置时间。

3 结论

本文采用有机试剂提取茶叶中茶多酚，并通过做单因素实验选择提取茶多酚的最佳实验条件。结果如下：1） 70℃水浴为最佳提取温度，2） 70%的甲醇水为最佳提取浓度，3） 60min为茶多酚显色最佳放置时间。随着新型纯化技术的发展与应用，通过研究筛选出纯化茶多酚更合适的工艺条件，争取将茶多酚产品广泛应用于食品、医药、保健等行业。