鲍玉林,刘妍妍
(青海畜牧兽医职业技术学院,青海湟源 812100)
随着我国生态环境建设和封山禁牧工作逐步推进,以及国家对畜牧业各项优惠政策的陆续出台和落实,藏羊养殖方式已由传统的放牧饲养逐渐转变为现代化设施的舍饲圈养[1]。舍饲养殖能够合理调节藏羊的营养物质需求,达到快速育肥的效果,缩短养殖周期,可显著提高藏羊养殖经济效益,且舍饲养殖能够有效缓解草原畜草之间相互竞争的矛盾,保护草原生态环境、促进生态畜牧业的可持续发展[2]。但舍饲养殖改变了藏羊的生活习性,藏羊的活动空间和运动量明显减少,养殖密度明显变大,导致舍饲藏羊的免疫力和抗病力降低,患病率升高[3-4]。因此,提高舍饲藏羊的免疫力和抗病力对提高舍饲藏羊养殖经济效益、保障当前藏羊养殖业稳定与健康发展均至关重要。黄芪多糖(Astragalus Polysaccharin)是中药黄芪的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、增强机体免疫力等广泛的生物学功能[5-7],目前,黄芪多糖在提高鸡、猪等畜禽生长性能和免疫功能方面的研究与应用较多,但在反刍动物方面的研究与应用较少,且未见黄芪多糖在舍饲藏羊中的应用。鉴于此,本试验旨在研究黄芪多糖不同添加水平对舍饲藏羊生长性能和免疫功能的影响,为黄芪多糖在舍饲藏羊养殖中的推广应用奠定基础,为提高舍饲藏羊生长性能、免疫力以及养殖经济效益提供方法与依据。
1.1 药物和试剂 黄芪多糖粉(纯度为70%)购自山东方舟生物科技有限公司;6 月龄健康藏羊由富国种养殖专业合作社提供;羊免疫球蛋白G(IgG)(批号为mL025602)、免疫球蛋白A(IgA)(批号为mL025601)、免疫球蛋白M(IgM)(批号为mL025607)、白介素2(IL-2)(批号为mL025537)、γ 干扰素(IFN-γ)(批号为mL025661)ELISA 试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。
1.2 试验设计与饲养管理 将90 只6 月龄健康藏羊(已去势公羊与母羊各半)随机分成3 组,每组30 只,每组3 个重复,每个重复10 只。试验藏羊采取完全舍饲,对照组饲喂由粗饲料和精饲料混合搭配后制备的基础日粮(日粮组成与营养成分见表1),0.05%黄芪多糖组、0.1% 黄芪多糖组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%黄芪多糖。各处理组分栏饲养,日常饲养管理均一致,试验预试期10 d,正试期60 d。
表1 基础日粮组成和营养成分
1.3 生长性能测定 每日称量和记录每个重复的给料量和剩料量并计算每个重复试验期总耗料量,根据每个重复试验期总耗料量计算每只羊的日均采食量;在试验开始与结束时对试验羊逐只空腹称重,计算每只羊的日均增重;根据日均采食量和日均增重计算耗料增重比。
1.4 免疫功能测定
1.4.1 血清样品的制备 试验结束后采集所有试验羊血清样品,采用一次性注射器在每只羊颈静脉处采集血液1.0 mL 于1.5 mL 离心管中,将其依次置于37℃ 2 h、4℃ 4 h 后,5 000 r/m 离心10 min,吸取上清液。
1.4.2 血清中免疫球蛋白含量和细胞因子含量的测定 分 别 利 用 羊IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ ELISA 试剂盒测定各处理组试验羊血清样品中的IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ 含量。
1.4.3 免疫器官指数的测定 试验羊采集血清后,从每个重复中随机选取5 只羊(不分公母),进行屠宰,即每组随机屠宰15 只藏羊,摘取屠宰后藏羊的脾脏并称重,计算脾脏指数。
脾脏指数=(脾脏重/活体重)×100%
1.5 统计分析 数据采用SPSS 22.0 软件中One-Way ANOVA 程序进行单因素方差分析,用Duncan's 法进行多重比较,数据以平均值±标准差表示,以P<0.05 作为差异显著性判断标准。
2.1 黄芪多糖对舍饲藏羊生长性能的影响 如表2 所示,与对照组相比,0.05%黄芪多糖组日均采食量、末体重、日均增重分别提高了2.0%、1.28%、5.36%(P<0.05);与对照组相比,0.1% 黄芪多糖组日均采食量、末体重、日均增重分别显著提高了2.84%、3.0%、13.59%(P<0.05),耗料增重比降低了9.51%(P<0.05);与0.05%黄芪多糖组相比,0.1% 黄芪多糖组末体重、日均增重分别显著提高了1.70%、7.81%(P<0.05),耗料增重比降低了6.41%(P<0.05)。
2.2 黄芪多糖对舍饲藏羊免疫功能的影响 如表3 所示,与对照组相比,0.05% 黄芪多糖组IgG、IL-2、IFN-γ含量分别提高了16.67%、3.52%、7.22%(P<0.05);与对照组相比,0.1% 黄芪多糖组脾脏指数、IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ 含 量 分 别 提 高 了12.59%、30.21%、10.89%、10.53%、4.45%、14.09%(P<0.05);与0.05%黄芪多糖组相比,0.1%黄芪多糖组IgG 含量、IFN-γ 含量分别提高了11.61%、6.41%(P<0.05)。
黄芪多糖具有广泛的生物学功能,将其作为饲料添加剂能够改善动物的肠道健康,提高饲料转化率和营养物质利用率,改善动物产品品质,提高免疫器官指数,增强动物机体免疫力,且具有无残留、不产生耐药性、绿色环保等优点,符合食品安全和国家政策要求。研究表明,黄芪多糖能够消除氟苯尼考诱导的免疫抑制作用,显著改善肉仔鸡在免疫抑制状态下的生长性能,调节免疫抑制肉鸡肠道的微生态平衡,提高免疫抑制肉鸡的免疫功能[8],且能显著提高仔鸡的胸腺、脾脏、法氏囊免疫器官指数[9];黄芪多糖可显著提高断奶仔猪的回肠消化率[10],减少断奶仔猪炎性细胞因子和激素的释放并提高断奶仔猪的淋巴细胞活性[11],可显著改善断奶仔猪生长性能和血液生理生化指标[12];Guo 等[13]研究表明,黄芪多糖能够消除环磷酰胺诱导的免疫抑制作用,显著改善动物机体在免疫抑制状态下T 淋巴细胞数量,提高血清中IL-2、IFN-γ、IgG 和IgM 含量。黄芪多糖对鸡、猪等动物生长性能和免疫功能的改善与促进作用研究报道较多,但由于反刍动物瘤胃消化系统的特殊性,黄芪多糖对反刍动物的消化功能的积极促进作用尚未可知。本研究证实,基础饲粮中添加黄芪多糖可明显提高藏羊的日采食量和日增重,降低耗料增重比,可能因为黄芪多糖改善了瘤胃内环境的微生态平衡和瘤胃发酵状况,提高了瘤胃内有益菌的生长和纤维素酶水解活性[14],使瘤胃内环境更易于降解纤维,提高营养物质的消化利用率,改善瘤胃的消化功能,进而提高生长性能。
表2 黄芪多糖对舍饲藏羊生长性能的影响
表3 黄芪多糖对舍饲藏羊免疫功能的影响
免疫器官是免疫系统的重要组成部分,其发育状况直接影响到机体的免疫水平,免疫器官指数是衡量机体免疫功能的主要指标,免疫器官指数越高则表示免疫系统发育越成熟,机体对致病原的抵抗力越强[15];免疫球蛋白是具有抗体活性的一类球蛋白,其含量变化与动物机体健康状况和免疫力密切相关,含量越高表明机体的体液免疫功能越强[16];细胞因子是由免疫活性细胞经刺激而合成、分泌的一类小分子蛋白质或多肽,具有调节细胞生长与分化、调控免疫应答等多种生物学功能,在免疫应答的调节和效应中起着重要作用,细胞因子含量的检测是基础免疫研究的有效手段[15]。在免疫器官指数、免疫球蛋白和细胞因子的选择中,脾脏是机体最大的外周免疫器官,其可以产生抗体、补体等免疫物质;IgG 和IgA 具有抑菌、抗病毒等免疫活性,IgM 具有激活补体等功能,IgG、IgA、IgM 均是主要的体液免疫检测指标;IL-2 和IFN-γ 均是调节T、B 淋巴细胞免疫功能的主要因子,均是主要的细胞免疫检测指标。故本研究选择脾脏指数、IgG、IgA、IgM 含量和IL-2、IFN-γ 含量分别从免疫器官、体液免疫、细胞免疫三方面全面研究黄芪多糖不同添加水平对舍饲藏羊免疫功能的影响,结果表明随着黄芪多糖添加剂量的增加,其对舍饲藏羊免疫功能的改善作用逐步增强,由于受到黄芪多糖纯度、试验动物机体情况等因素影响,本试验中黄芪多糖0.1 %的添加剂量是否为舍饲藏羊养殖中的最适添加剂量仍需进一步研究,但本试验结果已表明舍饲藏羊基础日粮中添加0.1%黄芪多糖可显著提高藏羊的生长性能和免疫功能,增加舍饲藏羊的免疫力和抗病力,有利于形成环境友好型的藏羊养殖新模式,可在舍饲藏羊养殖生产中推广应用。
本试验条件下,舍饲藏羊基础日粮中添加0.1%黄芪多糖能显著提高舍饲藏羊的生长性能和免疫功能。