无创基因检测和血清学筛查在唐氏综合征筛查中的应用分析

盛 娟

（新疆喀什地区第一人民医院，新疆 喀什 844000）

新生儿染色体异常是临床上常见的一种出生缺陷类型，不仅会导致新生儿身体及智力发育异常，还会给家庭及社会但来沉重的负担[1]。近年来，随着广大群众优生优育意识的提高，越来越多的育龄期妇女及孕产妇选择产前筛查来避免出生缺陷，以提高新生儿出生质量。唐氏综合征（DS）又称为21-三体综合征，属于染色体异常范畴，尽管约有60%以上的唐氏综合征在孕早中期胎死宫内或流产，但仍有部分患儿存活至出生[2]。绒毛活检、羊水穿刺、取脐带血等方法均为DS诊断的金标准，但因其具有一定的创伤性，常不易被患者所接受[3]。因此临床上常采用血清学筛查来诊断DS，但误诊率较高，为此本研究选取2017年1月至2018年3月120孕妇为研究对象，探讨无创基因检测和血清学筛查在唐氏综合征筛查中的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2017年1月至2018年3月120孕妇为研究对象，所有孕妇均单胎妊娠，知情同意，自愿参与本次研究，且排除传染性疾病、肿瘤、心血管疾病、免疫系统疾病以及血液系统疾病等。根据硬币投掷法将受试者分为对照组和研究组，每组60例，对照组孕妇最小年龄22岁，最大年龄36岁，平均（30.25±2.54）岁，孕周22～36，平均（31.24±2.26）周，孕次1～3次，平均（1.85±0.43）次；研究组孕妇最小年龄23岁，最大年龄37岁，平均（30.53±2.46）岁，孕周20～35，平均（31.38±2.17）周，孕次1～3次，平均（1.83±0.39）次。所有患者的年龄、孕周等基本资料比较，无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法：核酸提取或纯化试剂和胎儿染色体非整倍体检测试剂盒购自广州市达瑞生物技术股份有限公司，DA8600半导体测序仪购自中山大学达安基因股份有限公司，Qubit定量仪购自美国LifeTechnologies公司。对照组患者行血清学筛查（AFP＋β-HCG），取孕妇外周静脉血10 mL，离心分离出血清后于-20 ℃保存待检，采用时间分辨免疫荧光分析法及酶联免疫法检测AFP和F-βhCG浓度，结合孕妇的年龄、孕周、体质量、孕次等，应用配套软件计算唐氏综合征风险，唐氏综合征高风险的截断值为1∶250；18-三体综合征高风险截断值为1∶350[4]。研究组患者则取外周血中的游离 DNA 片段进行无创基因检测，取孕妇外周静脉血10 mL，离心后取上层血浆，通过柱分离的方法获取血浆中游离DNA，严格按照非整倍体检测试剂盒的要求行基因组测序技术，结合孕妇的年龄、孕周、体质量、孕次等及生物信息，计算胎儿唐氏综合征风险，唐氏综合征高风险：chr21的T值≥3；18-三体综合征高风险：chr18的T值≥3[5]。最后对唐筛阳性者行羊水穿刺或取胎儿脐带血进行确诊，比较两组方法在唐氏综合征筛查中的诊断准确率。

1.3 统计学方法：采用SPSS19.0软件包，建立Excel表格统计数据，计数资料采用百分比（%）表示，行χ2检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结 果

在对照组的60例患者中，血清学筛查出高风险孕妇8例，筛查阳性率13.33%。其中，唐氏综合征高风险孕妇6例，唐筛阳性率10.00%，所有阳性孕妇均行羊水穿刺或无创 DNA 检测进行确诊，经跟踪随访仅有1例被证实为21-三体综合征，唐筛假阳性率为8.33%。在研究组的60例患者中，无创基因检测出高风险孕妇4例，筛查阳性率6.67%。其中，唐氏综合征高风险孕妇3例，唐筛阳性率5.00%，所有阳性孕妇均行羊水穿刺进行确诊，其中21-三体综合征3例，18-三体综合征1例，唐筛假阳性率为0，研究组唐氏综合征诊断准确率显著高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组方法在唐氏综合征筛查中的诊断准确率[n（%）]

3 讨 论

唐氏综合征是由于配子形成过程中染色体不分离所致，以生长发育迟缓、智力障碍、畸形为主要临床表现，严重影响出生人口质量[6]。目前临床上主要通过检测甲胎蛋白（AFP）、人绒毛膜促性腺激素（hCG）等血清生物学指标来筛查唐氏综合征，但临床数据显示，其准确性仅为60%～70%，特异性差，仍有假阳性率较高的缺陷，从而影响出生质量[7]。有研究表明，母血中携带了胎儿基因组 DNA 的全部遗传信息，且因此在孕中期可通过DNA测序技术检测胎儿游离DNA片段，利用生物信息学进行序列比对，从而推算唐氏综合征的发生风险，且该方法敏感性及特异性较高，有效避免了绒毛活检、羊水穿刺、取脐带血等方法的创伤性，操作简便，快速，具有较高的应用价值[8]。本研究结果表明，对照组筛查阳性率13.33%，唐筛阳性率10.00%，唐筛假阳性率为8.33%；研究组筛查阳性率6.67%，唐筛阳性率5.00%，唐筛假阳性率为0，研究组唐氏综合征诊断准确率显著高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，无创基因检测可降低侵入性产前诊断的风险，在唐氏综合征筛查中具有适应范围广、准确性及特异性高的特点，具有较高的应用价值，值得临床推广使用。