赣州市野生茶树资源的茶多酚、游离氨基酸及其组分研究

王璞 刘知远 吴金华 陈清华 江树华郭伟 刘跃清 张斐斐 方贻文 倪德江

(1.江西省赣州市赣南科学院 341000；2.华中农业大学园艺林学学院园艺植物生物学教育部重点实验室 430070；3.江西省赣州市上犹县茶果局341200；4.江西省赣州市农业科学研究所341000)

赣州市是著名的革命老区，位于江西省南部，气候条件适宜茶树生长，野生茶树资源非常丰富[1]。上犹、崇义、定南、安远、寻乌、信丰都曾发现野生大茶树，树形从灌木型到小乔木型，树冠从披张到直立，类型多样[2]。野生茶树资源的收集和早期评价对于资源多样性、资源分类和资源利用都有十分重要的意义，鲜叶茶多酚和游离氨基酸含量在资源早期评价中尤为关键。酚氨比决定鲜叶的适制性，比值低于8的单株适制绿茶，比值在8到16之间的单株红绿兼制，比值高于16的单株适制红茶[3]。此外，儿茶素作为茶多酚中关键的功能成分和滋味物质，其总量和各组分含量也是资源评价的重要组成部分。茶氨酸是茶树中含量最高的氨基酸组分，占茶树氨基酸总量的80%左右。茶氨酸具有镇静安神功能，也是茶汤中重要的滋味物质，茶氨酸和其它氨基酸组分在鲜叶中的含量同样是资源评价的重要部分[4]。本研究选取赣州市4个资源点的8份野生茶树资源，对其茶多酚和游离氨基酸总量进行测定，了解其适制性；选取每个资源点各一份资源，对其儿茶素和氨基酸组分含量进行分析，全面了解其品质特点。本研究扩大了赣州市茶树种质资源库，也有助于对赣州市野生茶树资源的进一步开发和利用。

1 材料与方法

1.1 材料来源

本研究以赣州市4个资源点采集的8份野生茶树资源的叶片为材料，采摘标准为驻芽第一叶，采摘时间为2017年12月，每份资源的基本情况见表1。

1.2 测定方法

茶多酚总量测定采用酒石酸亚铁法，游离氨基酸总量测定采用茚三酮比色法。茶多酚总量测定具体方法如下：取若干茶鲜叶放置于研钵，加入液氮进行研磨至粉末，称取0.1g茶粉，加入400μL70%乙醇，涡旋1min，12000rpm离心5min，吸取50μL上清液加入3mL缓冲溶液，1mL酒石酸亚铁溶液，加水定容至5mL，用分光光度仪在540nm条件下测定吸光值。游离氨基酸总量测定具体方法如下：取若干茶鲜叶放置于研钵，加入液氮进行研磨至粉末，称取0.5g茶粉，加入2mL水，在90℃下水浴加热30min，冷却，吸取0.4mL上清液，加入4mL水，500μL缓冲溶液，500μL茚三酮，100℃下水浴加热15min，冷却后加水定容至25mL，用分光光度仪在570nm条件下测定吸光值。LC-MS参照阮建云等人的方法[5]，浸提液中甲醇：水=3:1，内标为乙羟茶碱。标样购自Sigma公司，色谱纯级甲醇购自Thermo公司，水为超纯水。

表1 赣州市野生资源样品的基本情况

2 结果与分析

2.1 茶多酚和游离氨基酸总量的测定

如表2所示，齐云山野生资源的茶多酚总量在30%左右，2个单株的差异很小；社墩子野生资源2个单株的茶多酚总量差异很大，1号茶多酚总量为41.24%，2号茶多酚总量在24.84%；贼古坑野生资源的茶多酚总量为22.11%～27.89%，3个单株的差异不大；阳岭野生资源茶多酚总量为29.18%。茶树鲜叶的茶多酚总量一般为15%～40%，社墩子1号的多酚含量达到41.24%，可以作为特色资源和品种选育的候选单株。齐云山野生资源2个单株的游离氨基酸总量差异较大，1号游离氨基酸总量为1.55%，2号游离氨基酸总量为2.54%；社墩子野生资源2个单株的游离氨基酸总量差异非常大，1号游离氨基酸总量为2.18%，2号游离氨基酸总量为6.67%；贼古坑野生资源的游离氨基酸总量为3.05%～3.53%，3个单株差异较小；阳岭野生资源的游离氨基酸总量为0.89%。茶树鲜叶的游离氨基酸总量一般为2%～4%，社墩子2号的游离氨基酸含量达到6.67%，阳岭1号游离氨基酸含量不到1%，可以作为特色资源和品种选育的候选单株。从酚氨比来看，齐云山1号、社墩子1号、阳岭1号适制红茶，社墩子2号、贼古坑2号、贼古坑3号适制绿茶，齐云山2号、贼古坑1号红绿兼制。

表2 茶多酚和游离氨基酸总量测定

2.2 儿茶素组分分析

每个资源点挑选1份资源进行儿茶素组分分析，结果见表3。在齐云山1号的儿茶素组分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>C>GCG;在社墩子1号和贼古坑1号的儿茶素组分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>GCG>C;在阳岭1号的儿茶素组分中，EGCG>CG>EGC>EC>GCG>GC>C。齐云山1号、社墩子1号、贼古坑1号的儿茶素组成较为相似，阳岭1号的儿茶素组成稍有不同。在4份茶树野生资源中，EGCG、EGC、CG含量均明显高于其它儿茶素组分。LC-MS的儿茶素总量结果与酒石酸亚铁法的多酚结果基本一致，因为儿茶素是茶树叶片中含量最高的多酚类物质。

2.3 氨基酸组分分析

每个资源点挑选1份资源进行氨基酸组分分析，结果见表4。在4份茶树野生资源中，检出的氨基酸有缬氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、茶氨酸，其中茶氨酸含量均占氨基酸总量的70%以上。齐云山1号和阳岭1号的氨基酸组成较为相似，社墩子1号和贼古坑1号的氨基酸组成较为相似。LC-MS的氨基酸总量结果与茚三酮法的检测结果基本一致。

表3 野生资源的儿茶素组分分析

注：数值表示该物质与内标物质的峰面积比值(相对峰面积)。

表4 野生资源的氨基酸组分分析

注：数值表示该物质与内标物质的峰面积比值(相对峰面积)。

3 小结

利用酒石酸亚铁比色法和茚三酮比色法分析江西省赣州市4个资源点的8份野生茶树资源鲜叶茶多酚和游离氨基酸总量，结果表明：社墩子1号的茶多酚总量很高，社墩子2号的游离氨基酸总量很高，阳岭1号游离氨基酸总量很低，可作为特色资源和品种选育的候选单株。利用LC-MS法分析其中4份野生茶树资源鲜叶儿茶素和氨基酸组分，结果表明：齐云山1号、社墩子1号、贼古坑1号的儿茶素组成较为相似，阳岭1号的儿茶素组成稍有不同；齐云山1号和阳岭1号的氨基酸组成较为相似，社墩子1号和贼古坑1号的氨基酸组成较为相似。