年龄相关性黄斑变性玻璃体内康柏西普注射疗效分析

邓吕红 谭钢 郑浩 唐九丰

[摘要] 目的 分析載脂蛋白E基因（APOE）多态性预测年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）玻璃体内康柏西普注射疗效的价值。 方法 选取2016年10月～2018年4月于我院经FFA和OCT确诊的年龄相关性黄斑变性患者76眼作为研究对象。所有患眼均每月接受10 mg/mL康柏西普玻璃体内注射0.05 mL，注射后每月随访1次，连续注射3个月，比较注射前和注射后1、2、3个月患者的最佳视力（best corrected visual acuity，BCVA）、黄斑中心凹视网膜厚度（central macular thickness，CMT）以及不同APOE等位基因分型疗效。 结果 治疗前BCVA为（50.36±9.84），治疗后1、2、3个月的BCVA为（70.18±11.07）、（72.22±12.06）和（70.31±12.39），与治疗前相比均明显提高（P<0.05）。治疗前CMT为（465.23±79.82）μm，治疗后1、2、3个月的CMT为（268.31±94.13）μm、（259.21±82.09）μm和（259.42±81.35）μm，与治疗前相比均明显降低（P<0.05）。根据不同基因分型分析，与APOEε3相比，APOEε4和APOEε2型的患者BCVA明显较高，CMT明显较低（P均<0.05），而APOEε2和APOEε4型患者的BCVA和CMT无明显差异（P>0.05）。 结论 玻璃体内康柏西普注射疗效治疗年龄相关性黄斑变性疗效显著，APOEε4和APOEε2型的患者疗效更佳，APOE分型可为康柏西普治疗AMD提供指导。

[关键词] APOE;多态性;黄斑变性;康柏西普

[中图分类号] R774.5          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2019）08-0077-03

[Abstract] Objective To analyze the value of apolipoprotein E gene （APOE） polymorphism in predicting the efficacy of intravitreal Conbercept injection in age-related macular degeneration（AMD）. Methods A total of 76 eyes of age-related macular degeneration patients diagnosed by FFA and OCT in our hospital from October 2016 to April 2018 were selected as subjects. All eyes received a monthly injection of 10 mg/mL Conbercept intravitreal injection of 0.05 mL， followed by monthly injections for 3 months. The best corrected visual acuity （BCVA）， central macular thickness （CMT） and different APOE allele genotyping effects before and at 1， 2， and 3 months after injection were compared. Results The BCVA before treatment was（50.36±9.84）. The levels of BCVA at 1， 2， and 3 months after treatment were（70.18±11.07）， （72.22±12.06） and （70.31±12.39）， which were all significantly higher than those before treatment（P<0.05）. The CMT before treatment was（465.23±79.82） μm. And the levels of CMT at 1， 2， and 3 months after treatment were（268.31±94.13） μm， （259.21±82.09） μm and （259.42±81.35） μm， which were significantly lower than those before treatment （P<0.05）. According to different genotyping analysis， compared with that of patients with APOEε3， the BCVA was significantly higher and the CMT was significantly lower in patients with APOEε4 and APOEε2 （P<0.05）. While there were no significant differences in BCVA and CMT between APOEε2 patients and APOEε4 patients （P>0.05）. Conclusion The efficacy of intravitreal Conbercept injection in the treatment of age-related macular degeneration is significant. Patients with APOEε4 and APOEε2 have better efficacy. APOE typing can provide guidance for the treatment of AMD with Conbercept.

[Key words] APOE; Polymorphism; Macular degeneration; Conbercept

年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）是全球一大致盲杀手，全球盲人患者致盲原因4%均为AMD，尤其是欧美国家，AMD为60岁以上患者的首要致盲原因[1，2]。随着我国进入老龄化社会以及各项电子产品的高速普及，我国近年AMD患者的发病率高达10.6%，AMD日渐成为威胁我国大众视力安全的凶手[3]。康柏西普是我国2013年批准用于治疗AMD的一种新蛋白，它可以有效帮助VEGF蛋白融合，目前对于康柏西普的疗效报道不一[4]。本文主要研究玻璃体内注射康柏西普的疗效，同时分析载脂蛋白基因（APOE）基因多态性预测AMD疗效的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

选取2016年10月～2018年4月于我院经眼底荧光素血管造影（fundus fluorescence angiography，FFA）和眼部光学相干断层扫描（optical coherence tomography，OCT）确诊的年龄相关性黄斑变性患者76例作为研究对象，共76眼。所有患者均经FFA和OCT眼底检查确诊为年龄相关性黄斑变性。患者中包含干性AMD44例，湿性AMD患者32例，其中脉络膜新生血管33只眼，地图状萎缩24只眼，玻璃膜疣11只眼，血管性色素上皮脱离8只眼。患者中男40例，女36例，左眼44只，右眼32只，患者年龄50～82岁，平均（67.1±6.41）岁。所有患者均对本研究知情同意并签署知情同意书，本研究经过本院医学伦理会批准同意进行。

纳入标准：（1）患者年龄≥50周岁;（2）患者症状符合中华医学会眼科学会1986年制定的关于AMD的临床诊断标准;（3）能配合各项眼底检查且无禁忌证或过敏现象;（4）所有患者均为单眼AMD。

排除标准：（1）排除无法配合研究的特殊人群以及无法完成随访人群;（2）排除严重的心脑血管疾病者;（3）排除视网膜病变、白内障等眼底疾病者;（4）纳入研究前半年连续1个月患眼使用过皮质类固醇激素药物或者激光治疗者。

1.2 治疗方法

所有患眼注射前对其过敏史等信息进行采集分析，并于前1 d分4次滴用左氧佛沙星滴眼液[参天制药（中国）有限公司，批号：H20113438]预防感染，注射时将患者置于无菌化条件下接受无菌化穿刺注射，先使用盐酸奥布卡因（参天制药株式会社，批号：H20100362）滴眼液局麻，并以碘伏对眼周皮肤进行消毒以及结膜囊冲洗，铺巾后取患者颞下3.5～4.0 cm处进针点，向患者玻璃腔内缓慢推注0.5 mg/0.05 mL康柏西普（成都康弘生物科技有限公司，批号：S2013 0012，规格：10 mg/mL，0.2 mL/支），每月注射1次，连续3次为1个疗程，1个疗程结束后根据患者眼部视力稳定情况酌情处理，对于视力连续3个月稳定的可以停止治疗，而对于视力不稳定的情况则需按照病情进行继续治疗。注射后每月随访1次，直至停止治疗。治疗前后及随访期间均需要做最佳视力（best corrected visual acuity，BCVA）檢查，观察患者的黄斑中心凹视网膜厚度（central macular thickness，CMT）等变化情况。

1.3 APOE检测方法

于患者治疗前和治疗后3个月抽取患者清晨空腹静脉血2 mL，离心后取下层血浆进行APOE基因型检测，引物购自上海生物工程有限公司，TagDNA聚合酶等PCR试剂购自TAKARA公司，TA克隆试剂盒购自Promega公司，DNA片段购自华美生物公司，严格按照说明书操作。APOE基因型检测方法参照文献[5]，包括采用蛋白酶K裂解法提取基因组DNA、APOE扩增、PCR片段回收、质粒的提取和重组质粒的鉴定分析等操作步骤，之后将酶切鉴定大小正确的质粒进行系列分析，对患者的APOE等位基因型进行判定，并对不同APOE分型患者的BCVA和CMT情况进行比较。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计软件处理数据，计量资料以（x±s）表示，多组计量资料比较采用方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患眼治疗前和治疗后1、2、3个月 BCVA及CMT比较

患者治疗后1、2、3个月的BCVA与治疗前相比均明显提高（P<0.05），治疗后1、2、3个月的CMT与治疗前相比均明显降低（P<0.05），见表1。

2.2不同APOE分型患者BCVA和CMT比较

根据不同基因分型分析，与APOEε3相比，APOEε4和APOEε2型的患者CMT明显较低（均P<0.05），而APOEε2和APOEε4型患者的CMT无明显差异（P>0.05），见表2。

3讨论

AMD是目前常见的致盲原因，发病率非常高，且有随着年龄逐年增长的特性，流行病学调查显示50～60岁年龄段AMD的发病率为2%左右，而75周岁以上的AMD发病率高达40%[6，7]。AMD病因目前尚不明确，多认为是多因素致病，由遗传性因素、环境因素、眼睛疾病、外伤等等原因导致。AMD患者中心视力明显下降，视物时物体变形，颜色对比度下降，视野出现黑影，视网膜厚度变厚，随着病情进展症状越加明显，直至致盲，严重影响患者的日常生活，威胁患者的视力健康，因而，寻找合适的治疗药物保证AMD疗效，帮助患者阻止AMD进程、提高视力保证其老年生活质量是目前我国逐渐进入老年化社会进程中迫切需要解决的问题[8，9]。

康柏西普是新一代的抗VEGF药物，它可以通过玻璃体腔内注射治疗提高VEGF水平，增加血管通透性，促进视网膜内渗液的吸收，减少渗出物质沉淀，帮助AMD患者恢复视力[10-12]。大量研究证实康柏西普有一定的疗效，然而其结果不一，参差不齐。本文通过研究试图为稳定康柏西普疗效寻找合适的用药指导，保证其疗效[13，14]。

APOE是1973年于正常人的极低密度脂蛋白中发现的一种载脂蛋白，是人体血浆中的重要成分，研究显示，APOE与大量眼底疾病密切相关，本文通过研究试图找出APOE分型与康柏西普疗效的关系[15，16]。本文选取了76眼，每月接受0.5 mg/0.05 mL康柏西普玻璃体内注射，注射后每月随访1次，连续注射3个月，比较注射前和注射后1、2、3个月患者的最佳视力BCVA、CMT以及不同APOE等位基因分型疗效。结果显示治疗后1、2、3个月BCVA为（70.18±11.07）、（72.22±12.06）和（70.31±12.39），与治疗前相比均明显提高，治疗前CMT为（465.23±79.82）μm，治疗后1、2、3个月的CMT为（268.31±94.13）μm、（259.21±82.09）μm和（259.42±81.35）μm，与治疗前相比均明显降低。提示康柏西普治疗AMD疗效确切，患者短期内可以迅速恢复视力，并保持稳定性。研究中发现，基线接近的不同患者治疗后的BCVA、CMT差异比较明显，通过不同基因分型分析，与APOEε3相比，APOEε2和APOEε4型的患者BCVA明显较高，CMT明显较低，而APOEε2和APOEε4型患者的BCVA和CMT无明显差异，提示不同APOE基因分型的治疗效果不同，APOEε2和APOEε4分型的AMD患者疗效要明显优于APOEε3分型患者，这可能是因为AMD与遗传因素密切相关，康柏西普治疗APOEε2和APOEε4分型的AMD效果更佳。这可能与APOEε2是AMD的易感因子，而APOEε4是AMD的危险因子，二者与AMD的发病密切相关有关。就目前而言，在选择康柏西普治疗AMD时，考虑患者的APOE分型，可以为预测其疗效提供指导。关于本研究的具体可能机制还需进一步大样本和深入的研究，以弥补本文单中心少样本的研究缺陷，并且研究中对于年龄这一个变量没有给予固定考虑，未来希望研究中加入年龄因素作更深入的探讨。

综上所述，玻璃体内康柏西普注射疗效治疗年龄相关性黄斑变性疗效显著，APOEε4和APOEε2型的患者疗效更佳，APOE分型可为康柏西普治疗AMD提供指导。

[参考文献]

[1] LI X，XU G，Wang Y，et al. Safety and efficacy of conbercept in neovascularage-related macular degeneration： results from a 12-month randomized phase 2study： AURORA study[J]. Surv Ophthalmol，2014，121（9）：1740-1747.

[2] Nguyen Tt，Guymer R. Conbercept（KH-902）for the treatment of neovascularage-related macular degeneration[J]. Expert Rev Clin Phar，2015，8（5）：541-548.

[3] 郭桂芬，赵宪孟. 玻璃体内注射康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性的效果[J]. 中华眼外伤职业眼病杂志，2018，40（3）：225-227.

[4] 陈圣文. 康柏西普对湿性年龄相关性黄斑变性患者脉络膜厚度及睫状后动脉血流的影响[J]. 中国老年学杂志，2017，37（17）：4366-4367.

[5] 胡译心，陈梦林，雷维维，等. 基于载脂蛋白Eε4分型的健康老年人静息态全脑功能连接强度特征研究[J]. 中华老年心脑血管病雜志，2017，19（11）：1124-1128.

[6] 路航，崔璟琳，董辉，等. 康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性的临床疗效观察[J]. 中华眼科杂志，2015， 51（11）：818-821.

[7] Qu J，Cheng Y，Li X，et al. Efficacy of intravitreal injection of conbercept in polypoidal choroidal vasculopathy：Subgroup Analysisof the Aurora Study[J]. Retina，2016， 36（5）：926-937.

[8] 戴青，高自清. 玻璃体腔连续注射康柏西普治疗湿性年龄相关性黄斑变性短期疗效观察[J]. 中华解剖与临床杂志，2018，23（2）：166-168.

[9] Pan Jr，Wang C，Yu Ql，et al. Effect of Methyl-CpGbindingdomain protein 2（MBD2）on AMD-like lesions in ApoE-deficient mice[J]. J HuazhongUnivSciTechnolog Med Sci，2014，34（3）：408-414.

[10] Levy O，Lavalette S，Hu Sj，et al. APOE Isoforms Control Pathogenic Subretinal Inflammation in Age-Related Macular Degeneration[J]. J Neurosci，2015，35（40）：13568-13576.

[11] Lima LH，Freund KB，Klancnik JM Jr，et al. Intraretinal crystalline deposits in neovascular age-related macular degeneration[J]. Retina，2010，30（4）：542-547.

[12] 闫忠阳，冬敏，杨娜，等. 抗血小板源性生长因子联合雷珠单抗治疗年龄相关性黄斑变性的临床研究[J]. 中国临床药理学杂志，2018，34（8）：930-933.

[13] 任立宇，张璐. CFH基因，AMRS2基因和HTRA1基因的单核苷酶多态性与年龄相关性黄斑变性相关性的研究新进展[J]. 国际免疫学杂志，2017，40（6）：664-668.

[14] 邵毅. 阿柏西普治疗新生血管性年龄相关性黄斑变性——2017欧洲视网膜专家学会共识解读[J]. 眼科新进展，2018，38（7）：601-605.

[15] 张婧怡，燕芳，张红兵，等. 康柏西普和雷株单抗治疗湿性年龄相关性黄斑变性的成本效益比较[J]. 中国卫生标准管理，2016，7（20）：120-121.

[16] 王毅，李罗翔，李娟，等. ApoE基因缺失小鼠视网膜及Bruch膜组织形态观察[J]. 眼科新进展，2013，33（1）：13-16.