标准SN/T 1924-2011食品中瘦肉精测定方法优化

王琳琳 陆阳

方法提要

试样中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林残留量采用乙腈水溶液漩涡萃取，PRiME HLB固相萃取柱提取，采用甲醇-乙酸铵流动相上HPLC- MS测定，外标法定量。

试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682 规定的一级水。

甲醇：色谱纯；乙腈：色谱纯；乙酸铵：色谱纯；氮气：纯度≥99.999%；标准品：特布他林（Terbutalin sulfate），CAS编号：23031-32- 5，纯度：96.70%；沙丁胺醇（Salbutamol free base），CAS编号：18559- 94- 9，纯度：99.90%；克伦特罗（Clenbuterol hydrochloride），CAS编号：21898- 19- 1，纯度：99.34%；莱克多巴胺（Ractopamine hydrochloride），CAS编号：90274- 24- 1，纯度：97.0%；标准溶液曲线：配置四种标准溶液的混标曲线，浓度为200PPb、100PPb、50PPb、20PPb、10PPb。

仪器与设备

液相色谱-串联四级杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）；分析天平：感量为0.01g和0.1mg；漩涡混合器；冷冻离心机：转速≥10000r/min；氮吹浓缩仪。

样品处理

取生鲜猪肉2.50g，加入80%乙腈水溶液10mL，漩涡震荡萃取1min，超声波萃取3min，10000r/min高速离心5min，取5mL上清液直接加载到6cc规格PRiME HLB固相萃取柱，保持一秒一滴的流速，收集全部流出液。取4.00mL流出液在40℃下氮氣吹至小于0.5mL，残留液体用10%甲醇水溶液定容至1.00mL，过0.2μm微孔滤膜，上液相质谱。

色谱和质谱条件

液相色谱条件：色谱柱：C18柱，150mm（柱长）×2.1mm（内径），粒度5μm；流动相：甲醇- 5mmol/L乙酸铵溶液，梯度洗脱见表1。

流速：200μL/min；柱温：35℃；进样量：20μL。

质谱条件：离子化模式：电喷雾电离（ESI）正离子模式；质谱扫描方式：多反应监测（MRM）；分辨率：单位质量分辨率；毛细管电压：4200V；干燥气温度：350℃；干燥气流量：11L/min；碰撞气：氮气；主要质谱参数见表2。

结果

标样谱图（见图1）

样品（猪肉）加标谱图以及计算的加标回收率（见图2、图3）

特布他林、沙丁胺醇、莱克多巴胺、克伦特罗加标量均为50ppb，回收率分别为：87.8%、79.6%、64.2%；76.4%，回收率均达到满意。

结果分析

（1）在样品处理中用PriME HLB固相萃取柱代替了净化过程，节约了很多人力以及时间；

（2）采用外标法，在经济成本上做到了节约成本；

（3）流动相使用甲醇-乙酸铵溶液，用甲醇代替乙腈，在经济上节约成本，在环境负担上，检验员长期接触乙腈对人体会产生一定危害，另外女性工作者长期接触乙腈会增大不孕的概率；

（4）在回收率理想的前提下，本方法不仅节约了成本，节省了时间，还降低了危害。