喹乙醇检测方法研究

摘要：喹乙醇是一种人工合成的喹噁啉类药物，具有良好的抗菌效果和蛋白同化作用，常用来提高动物饲料转化率、促进动物生长，也常用于兽药添加治疗仔猪。但不规范使用喹乙醇会直接引起食品安全问题，喹乙醇具有蓄积毒性，有三致危害。本文就当前常用的喹乙醇残留检测方法进行综述，为开展相关检测工作提供技术支持。

关键词：喹乙醇;危害;检测

随着现代养殖技术的快速发展，兽药在畜禽养殖过程中的使用比例逐渐增加。有些兽药不仅能用于杀菌、畜禽疫病的防治，还有促进畜禽生长的作用。然而，由于养殖人员的技术和知识水平参差不齐或追求更多利益，因此经常出现盲目用药、重复给药、药物乱用、实验性用药等现象，这不仅导致畜禽体内残留大量的兽药，还给食品安全带来了巨大隐患[1]。

喹乙醇是一种人工合成的喹啉类药物，是德国拜尔药厂于1965年研究合成的饲料添加剂，商品名为快育灵，可作为抗菌促生长剂，抗菌谱广。喹乙醇为浅黄色结晶性粉末，无臭味苦，可溶于热水，微溶于冷水。喹乙醇可以促进蛋白质同化，能提高饲料在动物体内的转化率，加快动物的生长发育，因此被广泛添加在兽药及饲料中。

1976年，欧盟批准可在畜禽饲料中添加喹乙醇。1981年，国内成功研制出喹乙醇并广泛应用于养殖业。但毒理学研究表明，喹乙醇具有蓄积毒性，有致畸、致癌、致突变的危害，导致畜禽体内残留大量兽药。喹乙醇的毒性对不同种属的动物不同，对其危害也有很大的差异。比如，对于水产品来说，喹乙醇对于部分鱼类有明显的致畸作用;对于禽类动物，则有明显的蓄积毒性和一定程度的遗传毒性。由此可见，喹乙醇给食品健康带来了巨大的安全隐患。欧盟于1998年禁止喹乙醇继续用于可食用性动物;2005年版《中华人民共和国兽药典》明确规定禁止在家禽及水产品饲料中使用喹乙醇[2]。以下将对当前常用的检测喹乙醇残留的方法进行综述。

一、光谱分析法

光谱法是基于物质与辐射能作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为原子光谱法和分子光谱法[3]。

可采用紫外分光光度法检测复合制剂喹乙醇的含量，先使用适当的分能力方法将喹乙醇分离出来，并稀释若干倍，在380 nm波长处检测其吸收度，并与标准品对比回收率。此方法操作简便、快捷，且所需仪器简单[4]。

二、液相色谱—质谱联用法

液相色谱—质谱联用法（HPLC-MS）是以液相色谱系统用于分离，质谱检测系统用于检测。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质量分析器将离子碎片按质量分开，并经检测器得到质谱图。液相色谱—质谱联用技术体现了色谱和质谱的优势互补，同时具有高灵敏度、高选择性、高精密度等特点。目前，该技术被最广泛应用于喹乙醇的检测[5-6]。

常用于液相系统的流动相有0.1%乙酸∶乙腈（70∶30）、甲醇∶0.1%甲酸水∶乙腈（20∶70∶10）、甲酸水∶乙腈（15∶85）、甲酸水∶甲醇（15∶85）。常用的提取液为甲醇溶液、乙腈溶液等。按照一定浓度梯度绘制标准曲线，曲线的R2值需达到0.99。本检测方法虽然操作方法较为复杂，但是精密度、准确性良好。

三、电化学分析法

电化学分析法包括电导法、极谱分析法、电位分析法、电位滴定法。其中，电位分析法中溶出伏安法常被用于测定饲料中喹乙醇的含量，此方法测得喹乙醇的检出限为0.7 mol/L。

四、色谱法

色谱法是一种分离和分析技术，主要的分离方法有柱色谱法、纸色谱法、薄层析法、高效液相色谱法和气相色谱法等，常用于检测喹乙醇残留的方法是高效液相色谱法和薄层色谱法[7-8]。

先将样品进行前处理，用反向高效液相色谱法在380 nm波长处检测，可选择0.1%乙酸∶乙腈（70∶30）、甲醇∶0.1%甲酸水∶乙腈（20∶70∶10）、甲酸水∶乙腈（15∶85）、甲酸水∶甲醇（15∶85）等可作为流动相，选用分离效果较好的流动相，绘制梯度浓度曲线，R2值需达到0.99，回收率在85%～90%。

五、免疫法

（一）胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析法是近年来迅速发展的一种免疫学检测方法，使用被纯化过的喹乙醇多克隆抗体与胶体金结合生成的金标抗体涂抹在硝酸纤维垫上，并将包被抗原和二抗分别结合在纤维素膜上，组装制得免疫层析快速检测试纸条，可用此试纸条检测含喹乙醇样品[8]。此方法简捷方便，检测时间短，设备便携，适用于快速检测和现场检测，可广泛推广。

（二）酶联免疫技术（ELISA）

酶联免疫检测技术具有高灵敏度和选择性，高于大多数理化分析技术，非常适合用于复杂基质中痕量组分的分离和检测[9]。常采用间接竞争ELISA法检测喹乙醇含量，检测限低于行业标准（SN 0197—93）液相色谱法的最低检出限，可检测含有较低喹乙醇含量的样品，且可用于大批样品检测。

（三）荧光微球免疫层析法

荧光微球免疫层析法于2016年被提出，是将新型标记物荧光微球与喹乙醇克隆抗体偶联，将其复合物作为检测试剂制成荧光微球免疫层析试纸条，可用肉眼检测的同时，也可将试纸条与荧光微球定量侧向层析读数仪联合使用，可用于饲料中喹乙醇含量的定量快速检测[10]。该试纸条的特异性和准确性高，可保存较长时间，检测时间较短。

参考文献：

[1]宋春美，侯玉泽，刘宣兵，等.喹乙醇的危害及检测方法研究进展[J].河南农业科学，2009（12）：13-17.

[2]殷居易，倪梅林，寿成杰，等.鸡肉中喹乙醇、卡巴多及其代谢物的残留检测[J].中国兽药杂志，2006（1）：11-15.

[3]刘同民，权仁子.一阶导数分光光度法测定促生长剂中喹乙醇的含量[J].中国兽药杂志，2000（3）：30-31.

[4]王文杰.应用近红外光谱分析技术快速监测预混添加剂中的喹乙醇[J].饲料研究，1992（10）：9-10.

[5]高嵘.高效液相色谱法测定猪肉中的喹乙醇残留量的研究[J].中国卫生检验杂志，2014（22）：23-25.

[6]吴玉杰，陈冬梅，陶燕飞，等.高效液相色谱法测定动物组织中3-甲基喹喔啉-2-羧酸残留量[J].分析科学学报，2009（4）：427-430.

[7]张憬，梁斌，吴志奇，等.乙腈提取液相色谱法测定饲料中喹乙醇含量[J].饲料广角，2016（4）：54-55.

[8]高嵘.高效液相色谱法测定猪肉中的喹乙醇残留量的研究[J].中国卫生检验杂志，2014（22）：23-25.

[9]周彤，危丽俊，程祥磊.喹乙醇残留速测金标试纸条的研制[J].中国卫生检验杂志，2013（17）：3322-3324.

[10]霍如林，朱爱荣，张林，等.胶体金免疫层析法快速定量检测猪肝中喹乙醇残留[J].食品工业科技，2014（9）：299-302.

通讯作者：李晓丹。