α-内收蛋白基因多态性与血压盐敏感和左室肥厚的相关性

王若琦 李红梅 唐献斐 彭昳媛 魏秋醉 黄怡佳 潘征

(右江民族医学院 1临床学院心脏内科，广西 百色 533000；2基础学院)

高血压发病机制复杂，是多个微效基因与环境因素交互作用的产物。钠离子被认为是影响血压的最重要环境因素，而α-内收蛋白(ADD)参与细胞连接、膜离子转运和信号传递等过程,与多种钠离子转运机制密切相关〔1,2〕。许多研究发现ADD基因Gly460Trp多态性与高血压的易感性和靶器官损伤等存在相关性。血压的盐敏感性(SS)和左室肥厚(LVH)都是高血压发生发展的独立危险因素〔3,4〕，与高血压的预后密切相关，明确ADD基因Gly460Trp多态性与两者的相关性有助于更加深入理解两者的发生机制，制定相应的治疗方案。本研究拟探讨ADD基因Gly460Trp多态性与血压盐敏感和LVH的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年6月至2017年6月在右江民族医学院临床学院住院治疗，资料齐全，年龄18～80岁，同意参与研究的壮族高血压患者。排除存在继发性高血压、严重肝肾功能不全、脑血管意外及不愿意参与研究者等。根据冷加压试验检测结果分为盐敏感者和盐不敏感者各75例；盐敏感者男40例、女35例，年龄54～72岁，平均(63.14±8.62)岁；盐不敏感者男42例，女33例，年龄55～78岁，平均(61.97±7.54)岁。根据LVH的检测结果分为LVH组102例和无LVH组48例。LVH组男62例，女40例，年龄55～76岁，平均(63.23±8.57)岁；无LVH组男20例，女28例，年龄51～74岁，平均(62.35±9.47)岁。各组在性别和年龄等差异无统计学意义(P>0.05)。均知情同意。

1.2基线调查 调查研究对象的人口学信息、疾病史和家族史等。

1.3临床资料 以电子血压计规范测量收缩压(SBP)和舒张压(DBP)，以全自动生化仪检测肝功能、肾功能、血糖和血脂等生化指标。

1.4左室肥厚的检测 固定的技术人员采用飞利浦彩色多普勒超声诊断仪检测量左房前后径(LAD)、右房前后径(RAD)、左心室舒张末期内径(LVDd)、左室收缩末期内径(LVDs)、右室舒张末期内径(RVDd)、室间隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(PW)和左室射血分数(LVEF)。按照Devereux校正公式计算左室重量(LVM，g)=0.8×1.04×{〔左室内径(LVID)+IVS+PW〕3-LVID3}+0.6。体表面积(BSA)=0.006 1×身高+0.012 8×体重-0.152 9。左室重量指数(LVMI，g/m2)=LVM/BSA，以LVMI>125 g/m2(男)，>110 g/m2(女)为诊断LVH标准。

1.5盐敏感的检测和判断 血压的SS判定目前尚无统一规范的方法和标准，近年来国内外有相关研究提出冷加压试验可作为可靠并且相对简单的方法检测SS〔5,6〕。本研究采用冷加压试验检测和判断SS，即测量基线血压值，受试者的手掌置于冰水混合物中，计时60 s，以试验后收缩压、舒张压和平均动脉压中任一项最高值较基础血压值升高15 mmHg为阳性，反之为阴性。

1.6基因多态性检测 参考相关文献〔7,8〕进行检测。常规抽取静脉血5 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，低渗分离白细胞，提取基因组DNA。Genebank进行引物检索验证并委托公司合成。ADD基因引物序列上游的顺序：5'-CTCCTTTGCTAGTGACGGTGATTC-3',下游的顺序：5'-GACTTGGGACTGCTTCCATTCGGC-3'。95℃预变性5 min，变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环，72℃再延伸5 min，内切酶酶切。以基因双链第614位的碱基都是G的为GG型，都是T碱基的为TT型，其余为GT型。

1.7统计学分析 采用SPSS17.0软件进行χ2及t检验。

2 结 果

2.1盐敏感患者与盐不敏感患者的心脏结构指标比较 两组LVPS、LVDd和LVMI差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2合并LVH组与不合并LVH组心脏结构指标比较 两组LAD、LVDs、LVDd、LVMI和LVEF差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表1 盐敏感患者与盐不敏感患者的心脏结构指标

与盐不敏感组对比：1)P<0.05

表2 LVH患者与LVH组患者的心脏结构指标

与无LVH组对比：2)P<0.05

2.3盐敏感组与盐不敏感组ADD基因Gly460Trp多态性检测结果 两组GG型、TG型和TT型分布差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 盐敏感与盐不敏感组、合并LVH与不合并LVH组ADD基因Gly460Trp多态性检测结果〔n(%)〕

与无LVH组比较：1)P<0.05

2.4合并LVH组与不合并LVH组ADD基因Gly460Trp多态性检测结果 左室肥厚组TT基因型频率明显高于无左室肥厚组(P<0.05)。见表3。

3 讨 论

内收蛋白是异源二聚体细胞骨架蛋白，在细胞表面离子转运与维持钠钾泵的功能等方面起到了重要作用。内收蛋白的3种亚基分别由ADD1、ADD2、ADD3 3种基因编码，ADD1基因与高血压的关系的研究较多，其Gly460Trp多态性曾经也是盐敏感高血压易感基因研究的热点〔9,10〕。早前的临床研究和荟萃分析认为ADD基因的Gly460Trp多态性可能与血压的SS相关〔11〕，我们进行的纳入了更多研究结论的荟萃分析结果提示白人ADD基因的Gly460Trp多态性与SS之间并不存在显著关联，亚组分析显示亚洲国家一些小规模研究的结果认为俩者存在着关联〔12〕。

盐是高血压最重要的环境相关因素。盐敏感是包括人类在内的哺乳动物共有的生物学特点。不同的人对盐负荷存在不同的血压反应，血压可在盐负荷后呈现出的相应升高或者降低等改变。血压的SS是连接盐与高血压的遗传基础，是原发性高血压的中间遗传表型，也是心血管病的独立危险因子〔13,14〕。

LVH是发生心力衰竭和心脑血管病等的独立危险因素。临床上有超过30%的高血压患者可能发生LVH，并且发生率与高血压严重程度呈正相关。高血压伴LVH的加权危险将会加剧并促进心脑血管病的发生和进展〔4,15〕。

本研究结果与我们前期的研究和既往的相关研究结论相似〔12,16〕。

LVM受许多因素的影响，多种因素可以诱导心脏质量增加和室壁增厚，进而导致心室重构和心力衰竭等〔4,17〕。根据本研究结果，我们推测ADD基因Gly460Trp多态性可能是高血压患者LVM的预测指标，T等位基因可能是高血压左室肥厚发病的遗传易感基因。与GG基因型相比，TT基因型可能通过影响心肌细胞膜内收蛋白功能，干扰了心肌肌动蛋白的丝状聚集及可能激活肾小管细胞Na+-K+-ATP酶活性，增加水钠潴留，加重心肌负荷等机制在LVM发生发展中起了重要作用。因此，对高血压患者尽早进行ADD基因Gly460Trp多态性检测，尽早发现高危人群，尽早积极干预治疗有助于将高血压防治战线前移，延缓甚至逆转靶器官损伤，降低心血管事件及死亡风险，改善预后，具有重大的理论意义和现实价值。