心肌梗死后心力衰竭患者血清microRNA-155 表达水平及其临床意义

朱江

（绍兴市中医院 重症医学，浙江 绍兴 312499）

心力衰竭发病机制较复杂，其临床症状、体征等缺乏特异性，发病率、住院率及死亡率较高，临床常用检查方法不能很好的评估患者病情[1]。MicroRNA（miRNA）可介导多种病理生理过程，其在冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称冠心病）、心力衰竭等心血管疾病的发生、发展中具有重要意义[2]。miR-155在冠心病患者血清中水平升高[3-4]。但miR-155在心肌梗死后心力衰竭患者中的水平及意义尚不清楚。本文对心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平进行研究，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—2017年12月绍兴市中医院收治的陈旧性心肌梗死后心力衰竭患者作为心力衰竭组，陈旧性心肌梗死无心力衰竭患者作为心肌梗死组，健康体检者作为对照组，每组80例。心力衰竭组：男性48例，女性32例；年龄（63.31±7.29）岁。心肌梗死组：男性46例，女性34例；年龄（62.79±7.42）岁。对照组：男性45例，女性35例，年龄（63.41±7.13）岁。Framingham心力衰竭诊断标准：患者有基础心血管疾病病史，休息或运动时出现乏力、呼吸困难及下肢浮肿等症状；有呼吸急促、心动过速、胸腔积液、颈静脉压力增高、肺部啰音、外周水肿及肝肿大等体征；有心脏杂音、第三心音、心腔扩大、超声心动图异常及利钠肽水平升高等心脏功能、结构异常证据；收缩性或舒张性心力衰竭特征，则可做出心力衰竭诊断。纳入标准：心力衰竭组和心肌梗死组均有陈旧性心肌梗死，心力衰竭组符合Framingham心力衰竭诊断标准[5]，心肌梗死组不符合心力衰竭诊断标准；对照组身体健康。排除标准：妊娠期及哺乳期女性；严重肝肾功能障碍；患先天性心脏病、肥厚性心肌病及主动脉夹层等其他心脏疾病；心源性休克、严重心律失常及心源性晕厥史；恶性肿瘤、严重感染性疾病及拒绝参与。3组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

收集患者年龄、性别、实验室检查指标及心功能等临床资料。

1.2.1 血清miR-155水平测定抽取3组外周静脉血4 ml，与乙二胺四乙酸抗凝管中放置15 min，3 000 r/min离心10 min，取上清液置于环氧树脂管中，提取血清总RNA（试剂盒购自美国Sigma公司），采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR）（试 剂 盒 购 自 美国Sigma公司）测定血清miR-155（引物由广州复基因有限公司设计合成）水平。miR-155引物，正向引物：5，-TGCCTCGAACTGCACTCGTAG-3；反向引物：5，-GCGAGCAGAGAATAATAGGAC-3。以U6为内参照，反应条件：95℃预变性5 s，60℃变性20 s，62℃退火1 s，72℃延伸1 s，共40个循环，血清miR-155以2-ΔΔCt法表示。

1.2.2 心功能测定采用超声心动图（德国西门子-18彩色多普勒超声显像仪）测定左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness,LVPW）及左室舒 张 末 期 内 径（left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）。所有患者由2名经验丰富的超声科医生进行超声心动图检查，采用常规超声心动图的检查方法于胸骨旁左心长轴切面，用M型超声在左室腱索水平测量LVPW和LVEDD，用双平面改良Simpson法于心尖四腔心切面测量LVEF。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS20.0统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验或方差分析，进一步两两比较用LSD-t检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较用χ2检验，绘制ROC曲线，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血清miR-155水平比较

对照组、心肌梗死组、心力衰竭组血清miR-155水 平 分 别 为（1.00±0.11）、（1.42±0.17）和（1.87±0.16），经方差分析，差异有统计学意义（F=682.162，P=0.000）；心力衰竭组患者血清miR-155水平高于对照组和心肌梗死组（P＜0.05），心肌梗死组患者血清miR-155水平高于对照组（P＜0.05）。

2.2 血清miR-155对心肌梗死后心力衰竭的诊断价值

血清miR-155诊断心肌梗死后心力衰竭的ROC曲线下面积为0.921（95% CI：0.842，0.963），临界值为1.670，敏感性为88.73%（95% CI：0.375，0.964），特异性为92.14%（95% CI：0.792，0.976）。以血清miR-155≥1.67（临界值）为高表达，＜1.67为低表达，则miR-155高表达51例，低表达29例。见图1。

2.3 血清miR-155与心肌梗死后心力衰竭患者一般情况和生物化学指标的关系

miR-155高表达组和miR-155低表达组患者年龄、性别、空腹血糖（fasting blood sugar,FPG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肌酐（Creatinine，Cr） 及甘油三酯（Triglyceride,TG）比较，经t或χ2检验，差异无统计学意义（P＞0.05）。miR-155高表达组和miR-155低表达组患者氨基N末端B型脑钠肽前体（N terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP）水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05）；miR-155高表达组高于miR-155低表达组。见表1。

图1 血清miR-155诊断心肌梗死后心力衰竭的ROC曲线

表1 两组患者一般情况和生物化学指标比较

2.4 两组患者超声心动图检查结果比较

miR-155高表达组和miR-155低表达组LVEF和LVEDD水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05）；miR-155高表达组LVEF低于miR-155低表达组，miR-155高表达组LVEDD高于miR-155低表达组。两组LVPW比较，经t检验，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

2.5 两组患者心功能分级构成比比较

miR-155高表达组与miR-155低表达组心功能分级构成比比较，经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=23.854，P=0.000）；miR-155高表达组Ⅲ、Ⅳ级患者比例高于miR-155低表达组。见表3。

表2 两组患者超声心动图检查结果比较（±s）

表2 两组患者超声心动图检查结果比较（±s）

组别 n LVEF/% LVPW/mm LVEDD/mm miR-155高表达组 51 28.78±1.87 11.53±1.67 71.24±8.57 miR-155低表达组 29 32.12±1.94 10.94±1.82 54.35±8.46 t值 7.577 1.470 8.513 P值 0.000 0.146 0.000

表3 两组患者心功能分级构成比比较 例（%）

3 讨论

冠心病是中老年人死亡的主要原因之一，其中急性心肌梗死病情危重，因此受到重视。心肌梗死指因冠状动脉痉挛或冠状动脉斑块破裂引起的冠状动脉血管急性持续闭塞而造成的心肌组织缺血缺氧，从而导致心肌坏死的疾病。随着血管成形术和新型药物的广泛应用，多数心肌梗死患者得到有效救治，但有部分患者经历心室的不良重构，增加心肌梗死后心力衰竭的发生[6]。因心肌梗死后心力衰竭住院率和病死率比较高，早期进行诊断和治疗具有重要意义。目前临床常用的评估心力衰竭严重程度的方法有超声、心电图、心室射血分数、步行实验及心脏耐力实验等，但由于心力衰竭的临床症状和体征不典型，常规方法不能很好的评估患者病情。

miRNA为内源性非编码小分子单链RNA，其机制为通过降解目标mRNA或抑制目标mRNA的翻译而发挥生物学作用[7]。miRNA可参与细胞的增殖、分化、凋亡及组织发育等多种病理生理过程的调节，在心血管疾病的发病过程中发挥重要作用[8]。miR-155是miRNA家族成员之一，其在B细胞、T细胞、单核细胞及内皮细胞等多种细胞中表达，参与细胞的增殖、分化、凋亡及组织发育等过程的调节[9]。miR-155为抑癌基因，在多种恶性肿瘤中表达异常[10-11]。miR-155在造血和免疫调节中也具有重要作用[12-13]，其还参与肺纤维化过程，对肺纤维化具有促进作用[14]。miR-155在冠心病的发病过程中也具有重要作用[15]，miR-155可调节巨噬细胞凋亡，通过巨噬细胞调节对冠心病的发生产生影响；miR-155与免疫炎症反应关系也比较密切，可参与天然免疫应答反应和获得性免疫应答反应，通过促进炎症反应促进冠心病的发展[16-17]。

血清miR-155诊断心肌梗死后心力衰竭的ROC曲线下面积结果表明，血清miR-155在心肌梗死后心力衰竭的诊断中具有重要价值，可作为心肌梗死后心力衰竭的潜在诊断指标。NT-proBNP在体外可稳定存在24 h，半衰期为60～120 min，具有较高的敏感性，是评估心力衰竭病情严重程度的生物标志物。NTproBNP水平越高表示心力衰竭的进展越快[18]。LVEF是诊断心力衰竭的重要指标，可敏感的反应患者的心室功能，为心脏收缩期和舒张期的比值。当LVEF＞50%时表示患者心功能较差[19]；LVEDD也是评估心脏功能的重要指标，LVEDD水平升高提示心脏功能减退[20]； 心功能分级也反映患者的心脏功能状态，心功能分级越高，表明心功能越差[21]。本研究结果表明，血清miR-155可作用心肌梗死后心力衰竭病情严重程度的标志物。miR-155低表达组和miR-155高表达组LVPW比较无差异，考虑可能与本文样本量有限有关，需后续增加样本量进一步研究。

综上所述，心肌梗死后心力衰竭患者血清miR-155水平升高，在心肌梗死后心力衰竭的诊断和病情评估中具有重要作用，有望成为心肌梗死后心力衰竭诊断和病情严重程度评估的标志物。