泰州地区鸭场大肠杆菌病的调查

刘玉华，吴桂银，陈光明，陈志国，陈佳欣

(江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300)

鸭大肠杆菌病又称鸭大肠杆菌败血症，是由大肠埃希菌的某些致病血清型菌株或条件致病性菌株引起鸭全身或局部感染的一种细菌性传染病[1]，严重危害养鸭业的发展[2]。随着泰州养鸭业的发展，大肠杆菌病趋于增多，给养鸭业带来巨大经济损失[3]。本研究对泰州鸭场大肠埃希菌感染情况进行调查，可补充泰州地区鸭大肠杆菌病流行病学资料，为鸭大肠杆菌病的防治提供流行病学依据。对鸭场大肠埃希菌耐药性情况调查，可指导临床合理用药，提高治疗效果，减少药物残留，减缓耐药性，提高养殖效益，在社会公共卫生等方面具有重要意义。

1 材料和方法

1.1 材料

疑似病鸭采自泰州地区鸭场。

1.2 方法

1.2.1 发病情况调查

在泰州地区鸭场发放调查问卷，并进行实地走访、查阅病历档案，了解当地鸭场大肠杆菌病的发生情况。

1.2.2 病料采集

通过现场观察，对流行病学、临床症状疑似大肠杆菌病的发病鸭、濒死鸭进行病理剖检，无菌采集病变明显病鸭的肝脏、心脏、血液等组织病料，4 ℃保存备用。

1.2.3 细菌分离培养

将采集病料划线接种于麦康凯琼脂培养基，37 ℃恒温箱中培养18 h，选取中等大小、表面光滑湿润的红色菌落，用麦康凯琼脂培养基进行纯化，观察平板上菌落特征，并挑取红色菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。

1.2.4 生化试验

将麦康凯琼脂纯化后的可疑菌落进行甲基红、V-P、吲哚、枸橼酸盐、葡萄糖、甘露糖、乳糖、麦芽糖、硫化氢、尿素酶等生化试验。

1.2.5 血清型鉴定

取高压抗原分别与大肠埃希菌单因子血清进行玻板凝集试验。分别取高压抗原和血清10 μL在玻板上混匀，0.5 min内出现明显凝集者判为阳性。同时用高压抗原与0.5%石炭酸生理盐水混合物作对照，观察有无自凝现象。

1.2.6 药敏试验

采用纸片扩散法检测大肠埃希菌分离株对氨卞西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻趺、头孢他啶、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、阿米卡星等12种抗菌药物的敏感程度，大肠埃希氏菌(ATCC25922)为标准菌株。用接种环取大肠埃希菌单菌落4～5个置于盛有灭菌生理盐水的试管中，调整菌悬液的浓度为0.5麦氏比浊单位(相当于1.5×108mL-1)。试验方法参考文献[4]，测量抑菌圈直径，判断大肠埃希菌对药物的敏感情况。

2 结果与分析

2.1 发病情况

泰州鸭场有规模化鸭场、专业合作社和养鸭专业户，饲养品种有樱桃谷鸭、番鸭、高邮鸭、麻鸭，饲养类型有肉鸭、蛋鸭、种鸭，饲养方式有散养、笼养及稻田养鸭。鸭大肠杆菌发病率在不同鸭场为2%～20%，不同鸭场大肠杆菌病发病率不同，专业合作社最高，其次为农村散养户，规模鸭场最低，原因可能与专业合作社饲养密度大、卫生条件差、防疫跟不上等有关。不同品种的鸭如麻鸭、番鸭、樱桃谷鸭等均有大肠杆菌病发生，品种间差异不显著。鸭大肠杆菌病一年四季均可发生，在秋、春季节发病率最高。不同日龄鸭均可发病，以10～30日龄多发。发病鸭排绿色稀粪、羽毛松乱、走路不稳；剖检典型病变为气囊、肝脏、心包膜表面有纤维素性渗出物覆盖，严重者与粘膜粘连，肝脏肿大，成年病死鸭出现腹水较多。

2.2 细菌分离

对采集的36份病料进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验，分离鉴定大肠埃希菌23株。

2.3 血清型

通过玻板凝集试验进行鸭大肠埃希菌分离株血清型的鉴定，结果显示(表1)，23株中有22株定型菌株。其中优势血清型为O78、O2、O76。

表1 鸭大肠埃希菌血清型鉴定结果

2.4 耐药性

对鸭大肠埃希菌的耐药性检测结果(表2)表明，23株鸭大肠埃希菌对头孢噻呋、头孢他啶、阿米卡星的耐药率较低，分别为4.3%、8.7%、21.7%，对庆大霉素、氨苄西林的耐药率较高，分别为73.9%、95.7%。

表2 大肠埃希菌分离株耐药性检测结果

3 讨论

本研究系统调查了泰州地区鸭场大肠埃希菌感染情况及耐药性情况，为泰州地区防治鸭大肠杆菌病提供了流行病学依据。根据耐药性情况指导临床合理用药，对于提高治疗效果，提高养殖效益具有重要意义。泰州地区鸭场大肠杆菌病发病率2%～20%，一年四季均有发生，不同品种的鸭均会发生，表明大肠杆菌病是泰州地区鸭场的一种常见病、多发病。为避免该病的发生，减少该病带来的损失，应采取以下综合防治措施：一是改善卫生条件，做好鸭场和水源的消毒工作。要按时清洁、消毒禽舍、用具，严格对鸭场和水源进行消毒，病鸭粪便要及时消毒并清除。二是加强幼龄鸭的饲养管理，如注意育雏期的保温及饲养密度，改善通风，降低灰尘，勤于除粪，合理搭配日粮等。三是加强免疫接种，最好选用本地流行血清型菌株制成的疫苗进行预防接种。四是选用敏感药物进行治疗，以提高治疗效果，降低大肠杆菌病病鸭的病死率。

从发病鸭或濒死鸭的组织病料中分离鉴定大肠埃希菌23株，血清型鉴定结果表明，优势血清型为O78、O2、O76，为选用优势血清型菌株制备疫苗提供参考。药敏试验结果表明，23株鸭大肠埃希菌对头孢噻呋、头孢他啶、阿米卡星的耐药率较低，对庆大霉素、氨苄西林的耐药率较高。当地兽医人员或养殖户在治疗鸭大肠杆菌病时，应尽量选用头孢噻呋、头孢他啶、阿米卡星等耐药率低的药物，避免选用耐药率高的药物如庆大霉素、氨苄西林等。本研究中23株鸭大肠埃希菌对氟苯尼考的耐药率为34.8%，而刘玉华等[3]对泰州地区分离的13株大肠埃希菌进行耐药性试验中，氟苯尼考的耐药率为15.4%。在治疗鸭大肠杆菌病之前，有条件的地方，尽量做药敏试验，筛选敏感药物进行治疗，提高治疗效果。