姜黄素联合顺铂对人胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

孙静汝 宁方玲

【摘要】目的：观察姜黄素（curcumin，CUlL）联合顺铂（cisplatin，DDP）对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响。方法：在体外培养的人胶质瘤细胞U251细胞，采用不同浓度的姜黄素联合顺铂处理24h，MTT法检测其对U251细胞生长的抑制作用，流式细胞仪检测其对细胞周期和凋亡的影响。结果：单用姜黄素处理24h可浓度依赖性抑制人脑胶质瘤细胞U251的增殖，5umol/L对U251细胞增殖无明显作用。姜黄素不同浓度与顺铂3ug/mL联合应用对U251细胞增殖抑制率明显高于姜黄素单用。20umol/L姜黄素将细胞聚结在G2/M期，3umol/L顺铂将细胞聚结在s期，并诱导细胞凋亡增加（P<0.01），两者联合应用具有相加或协同作用。结论：姜黄素联合顺铂抑制人脑胶质瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡，且两者联合应用具有相加或协同作用，可能通过调节细胞周期来实现的。

【关键词】姜黄素 顺铂 胶质瘤

顺铂是治疗胶质瘤最有效的化疗药物之一，但由于治疗过程中伴发的严重毒副作用如耳毒性、神经毒性等，使其应用受到很大限制。因而，如何减弱该类药物的毒副作用和增强其化疗敏感性备受关注。姜黄素是从姜黄根茎中提取的一种多酚类化合物。国内外研究发现姜黄素能够通过多种途径对多种肿瘤具有抑制作用，并且能够提高肿瘤对化疗药和放射治疗的敏感性。目前，对于姜黄素联合化疗药物顺铂诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡尚未见报道。本实验通过观察姜黄素联合顺铂用药治疗胶质瘤的效应和可能机制，为脑胶质瘤的综合治疗复方制剂的制备提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料人脑胶质瘤细胞株U251购自中国科学院上海细胞库。姜黄素购自美国Sigma公司，MTT购自美国Sigma公司。细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒购自上海索莱宝生物科技有限公司。

3讨论

近年来，体内外研究结果证实姜黄素具有很强的抗肿瘤活性，对乳腺癌、骨肉瘤、肺癌、胃癌等均有抗肿瘤效应。其毒副作用小，用于抗肿瘤治疗前景广阔。胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，其诊断和预后均不理想。单用DDP化疗，其療效并不满意且毒副作用高，复发风险大。因而，如何适当减少化疗药剂量，提高化疗药物的疗效并减少复发值得深入研究。

本研究发现姜黄素作用24h能够浓度依赖性抑制U251细胞的增殖，与顺铂联用，其对细胞增殖抑制效率明显提高，两者具有协同作用。并且联合应用细胞凋亡显著增加。姜黄素和顺铂联合应用对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡具有协同作用。 细胞周期失控在肿瘤的发生发展过程中发挥重要的作用，阻滞细胞周期可抑制细胞增殖并促进细胞凋亡|q。姜黄素可通过细胞周期的调控促进细胞凋亡，本实验结果表明，姜黄素与顺铂联用24 h，GO/G1和s期明显增加，而G2/M期明显减少，两者联合用药与单用姜黄素或顺铂比较，G2/M期细胞比例明显下降，表明姜黄素可增加胶质瘤细胞对顺铂的敏感性。 本研究证实姜黄素联合顺铂可通过调节细胞周期抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，两者联用具有一定的增效性。这些结果为姜黄素的抗肿瘤效应提供了新的研究证据，并为两种药物的联合使用及复合制剂的制备提供了实验依据。