自家高免血清防治羊痘病毒性疾病

程志鹏，卢晓丽，田孟芳，赵彦玲，孙 磊，任子利

（西藏农牧学院 动物科学学院，西藏 林芝 860000）

绵羊是我国重要的畜牧业经济来源，对于西藏自治区来说绵羊是牧民们的重要生活来源。羊的相关疾病也威胁着西藏同胞们的生命及财产安全，寻找有效的治疗手段可以减少牧民的经济损失。

早在公元前一世纪羊痘就被公之于众，它是一种古老的动物疫病，直到1902年Borrel成功鉴定出绵羊痘的病原是由病毒而引发，31年后将绵羊痘病毒在体外培养成功[1]。羊痘在羊群中是一种传染性强的疾病，通常患羊痘病的羊只从皮肤表面开始出现临床症状，首先皮肤产生化脓性的脓包，当脓包破裂病毒会在羊群中大量传播，其最显著特征为绵羊皮肤表面或粘膜处出现痘疹，同时患病羊只会发热，由于绵羊痘病是由绵阳痘病毒所引发的一类接触性、急性、热性的传染病，所以通常羊只发热会非常迅速[2]不仅影响着羊群的生命安全，由于降低羊群免疫力的特点羊痘病还会降低羊的生产力[3]。羊痘病也是一种人畜共患病，人如果接触到羊只身上破损的脓包或其污染物会被传染。目前我国采用固定时间对羊群进行羊痘疫苗注射，通常为春秋两季节无论成年羊还是幼年羊统一处理，但是每年依旧会有大量的羊群患羊痘病，其原因为：注射疫苗时出现漏针现象，注射疫苗治疗无法得到保证，牧民存在侥幸心理未对羊群进行疫苗注射等原因。羊痘病一旦在羊群中发现其发病速度很快，一般通过对其进行药物治疗治愈率不高，同时会增加经济成本。

目前，自家高免血清应用广泛，通常应用于对犬瘟、犬类细小病毒的治疗，细小在犬类中具有很高的致死率，常致其呕吐、腹泻最终导致病犬失水、器官功能衰竭造成死亡[4]。自家血能够高效的中和犬类体内的病毒，增强治愈能力并缩短疗程[5]。畜禽类的应用也颇为广泛，涂宜强[6]等人利用高免血清对猪的流行性腹泻进行治疗，芦俊鑫等人针对猪瘟利用猪瘟高免血清进行了防治[7]；谭毅[8]通过药物配合自家血的治疗对患病毒性肿头出血症的鸭子进行诊治。其在绵羊上的应用也早有先例，本次针对羊痘病毒的应用对患病羊只进行临床治疗，取得了很好的效果同时也降低了成本，为绵羊羊痘病的治疗提供参考依据。

1 自血疗法的操作方法

自血疗法一般是指直接抽取静脉血在不添加抗凝剂的情况下立即注射于穴位，常被用于治疗人类的皮肤性疾病，Hashida S等人也曾用其治疗人类免疫系统疾病[9]。在对患羊痘病的病羊进行自血疗法前，由于自愈个体有限，患病个体较多为了减少个体间的排异反应，所以要对血清进行灭活处理，选取好指定的家畜后对指定采血部位进行剪毛处理，对采血针头注射器等进行严格消毒，采集好静脉血后提取血清对其加入双抗保证无菌即可使用，以上过程均在无菌条件下操作，以免发生污染。由于牛血易凝固，可在注射器中加入抗凝剂减缓血液凝固。

2 绵羊发病情况

杜泊羊群，月龄3个月，共确诊患病8头平均体重为35 kg，雌性。毛管粗糙身体瘦弱，眼睛半闭，脸部、皮肤表皮、尾部有大面积丘疹，且有明显发热现象，停止采食及饮水，无活力。

3 治疗

3.1 采集血清用羊的选择

通过自然感染的方式被羊痘病毒感染，观察其症状明显经调查后确诊为羊痘病的绵羊，在未治疗的条件下出现自愈，采食、饮水、精神状态恢复正常后观察发现绵羊脸部及身体表面的水泡已经出现结痂现象，此时其体内的血清抗体有很高的效价。在对血清用羊进行选择时要优先考虑体温、大小便正常的羊只，同时未患其他疾病。

3.2 相关采集器材

塑胶手套、剪刀、口罩、防化服、鞋套、消毒液（75%酒精、5%碘酒）、消毒棉球、10 ml采血针、塑料瓶、低温冰箱、玻璃注射器、离心管、恒温箱。

3.3 自家高免血清的制作

对采血羊只进行颈部消毒后抽血，将采集好的血液装入低温冰箱中进行保存；将装有血液的针管静止倒放于准备好的塑料瓶中并放入恒温箱中，保持温度32℃静置6～8 h后让血液自然凝集后将上层清液推入离心管中，对上层清液进行离心后即得到血清，用消毒过的玻璃注射器将离心好的血清抽出，对血清进行灭活后将其分瓶装入无菌的玻璃瓶内100 ml后向玻璃瓶内注射10万单位的链霉素及青霉素，将玻璃瓶密封存好。

3.4 高免血清的检测

3.4.1 无菌测试 将做好的高免血清取1 ml分别滴于普通培养基中，放在恒温培养箱中温度控制在37℃，培养30 h后观察有无细菌生长，若无细菌则说明血清无菌。

3.4.2 血清安全检测 随机抽取同群健康羊只进行10 ml高免血清注射，观察其生理状况绵羊健康无异常则血清安全。

3.5 对患病羊群进行注射

根据患病个体的患病情况进行注射，一般来说患病羊只病情越重所注射血清量越多反之则越少，为了避免刺激过度造成个体病情恶化[10]，其次根据羊的体重注射，大羊注射10 ml血清，小羊注射3～5 ml血清，采取注射两天每天注射一次的办法进行治疗[11]。

3.6 观察血清作用

凡注射血清后的羊只在1～3 d出现明显好转，开始自然采食、饮水，皮肤及尾下丘疹变色结痂，此表现为血清起到很好的治疗作用，观察7～8 d后羊毛毛管开始变亮可认为痊愈。

4 体会与总结

4.1 自家血的免疫学依据

当高免血清注入到皮下或深入粘膜后单核-巨势细胞系统会受到被破坏的红细胞的刺激，从而增强自身的活性，活性增强其吞噬作用也得到了增强，使得对外免疫的能力得到了提升，将高免血清点射到化脓创口处周围能够在创伤附近快速产生屏障免疫外来病毒，不但可以在创口处产生抗毒屏障也能促进伤口肉芽的生长促进伤口愈合[12]。

4.2 治愈效果

临床治疗中有8头绵羊确诊为羊痘，治疗中有一头出现死亡现象，笔者认为错过了最佳治疗时间从而延误病情。

4.3 发现患病羊只应采取的措施

发现患病羊后应立即将病羊与羊群隔离，且隔离区应与羊群保持距离，确保羊群无法与病羊及其污染物接触，将病羊分离出后应立即对羊舍进行喷雾消毒并对未感染羊群进行羊痘苗注射，同时对羊舍进行生石灰铺洒和液体消毒喷雾[13]。

4.4 疫情高发原因

在羊群高发季节应保证羊圈的通风及其干湿度，对于温度的较低的季节，既要保证通风同时也应保障羊舍的温度在一定范围避免温湿度变化过快使羊群免疫力降低,患病羊群的相互密切接触和呼吸道的传播是导致疾病迅速传播的主要原因，气温变化过快、育肥不到位、羊群应激会对该疾病有促使作用[14]，增加患病几率。

4.5 注意事项

采集自家高免血清时每一道程序需经过严格消毒，确保采集样品无菌，对血清加入双抗前确保血液无菌灭活，发现患病羊只及时隔离。发现疫情要尽快利用高免血清进行治疗，时间要快不能拖延，最佳的治疗时间在发病的初期，由于自家高免学清具有较高的兼容性，所以它可与其它治疗性的药物配合使用[15]。