大连医科大学附属第一医院检验科(116011)
林 琳 朱 鸿 程艳杰 潘诗萌 赵 丹△
TORCH一词是1971年Nahmias 等学者1971年总结出的病原群[1],一组病原微生物的英文名称缩写,其中T指刚地弓形虫(toxo-plasma,TOX),O指其他微生物(others,如柯萨奇病毒、梅毒螺旋体、微小病毒、乙肝病毒),R指风疹病毒(rubella virus,RV),C指巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV),H指单纯疱疹病毒(herpes simplx virus,HSV)Ⅰ、Ⅱ型。患者感染这一组病原群中任何一种后,虽自身的症状不明显或症状轻微,但病原体将会通过产道或胎盘感染新生儿,导致早产、习惯性流产、死胎、死产及一些严重的先天性缺陷和发育异常,随着怀孕年龄增加胎儿感染率增加,在早期母体感染病例中有严重临床表现者比例较低。因此产前进行TORCH相关检查具有重要意义,是我们落实好优生优育政策的关键一步。研究主要对大连地区育龄女性感染TORCH病原体的情况进行分析,为指导妇女降低TORCH感染提供有效数据,降低胎儿畸形的概率。
选择2016年6月-2017年6月大连地区进行产前TORCH检查的育龄期妇女,年龄为20~55岁,中位年龄为37岁,按年龄将孕妇分为小于35岁的低龄组(1104例)和大于等于35岁的高龄组(939例),总计2043人。所有样本均来自大连医科大学附属第一医院检验科。
清晨空腹,采血前未做过剧烈运动。肘静脉抽取3.0 ml血液,注入含促凝剂及分离胶的采血管中,待血液完全凝固后,以3500r/min离心10min待检。所有测定样本均为血清,无溶血、乳糜及黄疸。
罗氏cobase601全自动电化学发光免疫分析仪配套试剂弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒IgM抗体检测试剂盒和弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、Ⅰ型单纯疱疹病毒、Ⅱ型单纯疱疹病毒IgG抗体检测试剂盒、高值和低值定标液、激发液和缓冲液。
电化学发光免疫系统中,磁性微粒为固相载体包被抗体(抗原),用三联吡啶钌标记抗体(抗原),在反应体系内发生免疫反应后,形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌标记抗体复合物,将反应液吸入测量池中,通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell/Procell M被除去,当磁性微粒流经电极表面时,未结合的标记抗体和标本被冲走。给电极加一定的电压,使复合物化学发光,并通过光电倍增器测量发光强度。黄疸、溶血、脂血和生物素等一般不会干扰检测结果,极少情况下极高滴度的免疫组分、链霉亲和素和钌抗体会产生干扰。有关HIV患者、接受免疫抑制剂资料的患者或有其他导致免疫抑制疾病的患者的检测结果的解释,需特别谨慎。
所有数据采用excel 2003和SPSS 17.0软件进行统计分析。计数资料以率表示,组间阳性率比较用卡方检验,组间多重比较采用卡方分割法,以P<0.05为差异有统计学意义。
在调查人群中,anti-CMVIgM的阳性检出率最高为3.23%,其次为anti-RVIgM2.50%,anti-TOXIgM阳性检出率最低为0.69%。结果见表1。
表1 Anti-TORCH IgM抗体检测结果
由表2可见,低龄组中与其他两种病原体比较anti-CMVIgM阳性检出率最高,为3.26%;anti-TOXIgM阳性检出率最低,为0.45%。在高龄组中,anti-CMVIgM在的阳性检出率最高,为3.19%;anti-TOXIgM阳性检出率最低,为0.96%。anti-TOXIgM、anti-RVIgM、anti-CMVIgM的阳性检出率在两年龄组间差异均无统计学意义(P>0.05)。
表2 不同年龄组anti-TORCH IgM阳性检出率[n﹙%﹚]
在低年龄组中,anti-CMVIgG阳性检出率最高,为95.10%;anti-TOXIgG阳性检出率最低,为3.80%。在高龄组中anti-CMVIgG的阳性检出率最高,为94.89%;anti-TOXIgG阳性检出率最低,为7.56%。由表3可知,anti-TOXIgG、anti-RVIgG、anti-HSVⅠIgG、anti-HSVⅡIgG在高年龄组阳性检出率高,且差异有统计学意义(P<0.05)。anti-CMVIgG阳性检出率在两年龄组间无差异(P>0.05)。
表3 不同年龄组anti-TORCH IgG阳性检出率[n﹙%﹚]
在被检测的2043人中,anti-CMVIgG阳性检出率最高,为95.01%;弓形虫抗体anti-TOXIgG阳性检出率最低,仅为5.53%。结果见表4。
表4 Anti-TORCH IgG抗体检测结果(n)
育龄期女性由于体内激素水平的改变和免疫水平的下降,尤其是T淋巴细胞的功能减弱,而易感TORCH病原体,其感染易多发且呈世界性分布[2-4]。弓形虫病感染通常通过检测抗弓形虫特异性IgG进行诊断,有时也对IgG抗体进行检测。弓形虫IgG抗体检测则用于评价弓形虫血清学状态,反映急性或潜伏性感染。弓形虫IgM抗体阳性反应急性、新近或复发感染。通过样本中血清转化或抗体IgG滴度明显上升诊断怀孕期间急性获得性感染[5]。风疹抗体检测可用于判断个体免疫状态,有助于诊断急性风疹感染。风疹病毒IgG抗体的存在提示以往暴露(接种疫苗免疫或既往风疹病毒感染)。巨细胞病毒IgM阳性结合其IgG的低亲和力指数即可证实近4个月的巨细胞病毒感染。HSV感染通常结合临床症状并通过其IgG抗体的检测进行评价。诊断TORCH感染的有效方法是检测血清中IgM抗体,IgM抗体在感染的最早期出现,故IgM抗体阳性表示正在发生感染[6]。
本次调研检测血清中IgM抗体和IgG抗体,主要采用捕获法和夹心法,其中捕获法能够提高反应的特异性,避免风湿性因子或自身抗体等的干扰。本研究结果提示,任何年龄的妊娠均需进行TORCH病原体的检测,防止孕妇不良妊娠的发生。比较两年龄组TORCH病原体IgG抗体的感染情况,除anti-CMVIgG外其它四类抗体高龄组均高于低龄组(P<0.05)。IgG类抗体通常被定义为既往感染,或可通过IgG滴度进行感染诊断。此结果提示高龄妇女的产前TORCH筛查很有必要。此次调查的2043例TORCH检查的育龄期妇女中,CMV的感染率最高,巨细胞病毒感染导致长期潜伏感染,对于任何年龄均有危险,个别可出现再次感染导致发病。CMV也是目前公认的宫内感染最常见的病毒。新生儿无症状CMV感染时,仅在尿中排出,部分患儿在数年后出现智力发育异常,听力或视力发育障碍等后遗症[7-8]。HSV-2感染是HIV传播的风险因素之一,可导致孕早期的流产、胎儿的先天性畸形、早产或低体重儿等[9]。因此孕早期应加强TORCH感染的筛查力度,并将CMV和HSV的感染作为防治重点。近年,TORCH感染已引起了广泛关注[10]。本文针对大连地区的2043例血清筛查进行分析,为本地区流行病分析、指导提供参考依据。
综上所述,TORCH检测与优生优育密切相关,应提高待孕夫妻对TORCH感染危害性的认识,避免或减少接触易感源,重视孕早期TORCH感染的血清学筛查,规范检测方法并加强实验室质控管理,指导优生优育从而降低不良妊娠的发生率,以提高我国整体初生人口素质,响应国家优生优育的号召。