九香虫不同提取部位抗实验性胃溃疡作用对比研究

程生辉，祁晓鸣，李会芳，韩 瑞，黄伟静

（山西中医药大学，山西晋中030619）

九香虫为蝽科昆虫九香虫（Aspongopus Chinensis Dallas）的干燥体，始载于《本草纲目》，《中国药典》（2015年版）收载中药，具有理气止痛、温中助阳之功效，传统用于胃寒胀痛、肝胃气痛、肾虚阳痿、腰膝酸痛等证。20世纪90年代以来多篇文献报道其配伍应用治疗各种消化道溃疡性疾病，疗效确切，并经课题组成员证实其临床疗效［1-5］。现代药理研究表明，九香虫具有抗癌、抗凝、镇痛、抑菌等药理活性［6-7］，目前鲜见治疗消化性溃疡的实验研究相关报道。九香虫中主要含有脂肪油和蛋白质成分，还含甲壳质、微量元素、维生素、尿嘌呤、黄嘌呤、生物碱、黄酮等成分，其中脂肪油占九香虫药材干重的53.0%，不饱和脂肪酸的含量占总油脂的 57.1%。蛋白质占九香虫药材干重的44.3%，10种必需氨基酸含量占总氨基酸量可达42.38%［8］。本研究采用无水乙醇诱发型和应激性胃溃疡大鼠模型对九香虫不同提取部位的抗溃疡作用进行对比研究，以明确九香虫抗溃疡作用的物质基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 SD大鼠，雌雄各半，体质量为（200±20）g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号 SCXK（京）2012-0001。

1.1.2 实验药物 九香虫药材经山西中医药大学裴香萍副教授鉴定为昆虫纲半翅目蝽科九香虫（Aspongopus Chinensis Dallas）的干燥虫体。产地：湖北；生产加工地址：安徽盛海堂中药饮片有限公司；产品批号：20130701。九香虫脂肪油提取物由超临界CO2萃取得到（批号20140402），萃取条件为温度：萃取釜为45℃，分离柱为45℃，二解析为常温。压力：萃取釜为30 MPa，分离柱为10 MPa，二解析为6 MPa。九香虫氨基酸提取物由脂肪油提取残渣进行蒸馏水回流提取所得，提取工艺为10倍量水，回流提取3次，每次1 h。九香虫水煎液的制备：九香虫生药100 g，加入10倍量的水，回流提取2次（每次30 min），浓缩成800 mL。阳性药物西咪替丁片，广东恒健制药有限公司生产，批号：140507。

1.2 实验方法

1.2.1 九香虫不同提取部位对无水乙醇诱发大鼠胃溃疡的影响 72只SD大鼠分为9组，适应饲养3 d后，九香虫给药组按照高剂量组为2.10 g（生药）/kg，低剂量 1.05 g（生药）/kg的剂量给药，空白组和模型组大鼠灌胃等量的蒸馏水，阳性对照组给药剂量为35 mg/kg，连续灌胃4 d。第4天灌胃结束后，将每组大鼠放入代谢笼中饲养，禁食不禁水24 h，24 h后各组大鼠继续灌胃相应的药物。1 h后，除空白组外，各组大鼠按1 mL/只的量灌胃无水乙醇制备大鼠胃溃疡模型。继续禁食1.5 h。1.5 h后脱颈处死大鼠，剪开大鼠腹腔，用结扎线结扎幽门，从贲门注入1%甲醛溶液10 mL，结扎贲门，并放入1%甲醛溶液中固定10 min，之后沿着胃大弯将胃剪开，并用生理盐水清洗胃壁内测，观察并记录溃疡指数，溃疡指数用“分”来表示，瘀血点为1分，线状瘀血长度小于1 mm者为2分，1～2 mm者为3分，3～4 mm者为4分，大于5 mm者为5分。每只大鼠胃分数的总和为该鼠的溃疡指数。

1.2.2 九香虫不同提取部位对应激性大鼠胃溃疡的影响 72只SD大鼠随机分为9组，按组灌胃药物，给药方法及剂量同上。连续给药5 d。采用水浸-束缚法诱发大鼠胃溃疡。第4天给药后，将各组大鼠放入代谢笼中禁食24 h（不禁水，严格控制大鼠吃自己的粪便和饲料）。第5天实验前2 h经口灌胃给药1次，2 h后将实验大鼠用适量乙醚麻醉后固定于鼠板浸入水中，液面与大鼠胸骨剑突保持水平，束缚7 h。其间要注意观察大鼠，防止其脱线掉入水中。整个过程水温保持在20℃左右。7 h后处死。迅速打开腹腔，暴露胃体，结扎贲门和幽门、剪断，取出全胃，用注射器以1%甲醛10 mL注入胃内，再将胃浸入1%甲醛内固定10 min，结束固定后，沿胃大弯将其剪开展平，可见局限于胃黏膜的点状或线状出血性损伤，记录损伤长度并打分，溃疡指数计分方法同上。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 九香虫不同提取部位对无水乙醇诱发胃溃疡大鼠溃疡指数的影响

结果见表1。

表1 九香虫不同提取部位对无水乙醇诱发胃溃疡大鼠溃疡指数的影响 （±s）

表1 九香虫不同提取部位对无水乙醇诱发胃溃疡大鼠溃疡指数的影响 （±s）

注：与模型组相比，1）P＜0.01

组别 n 溃疡指数（分）空白组 8 0模型组 8 5 6.6 3±1 2.3 7阳性对照组 8 4 5.4 3±2 9.8 3九香虫氨基酸高剂量组 8 4 4.5 0±2 2.9 1九香虫氨基酸低剂量组 8 5 2.2 5±1 5.6 2九香虫脂肪油高剂量组 8 2 5.5 0±1 7.0 8 1）九香虫脂肪油低剂量组 8 8.5 0±6.6 3 1）九香虫水煎液高剂量组 8 5 0.2 9±1 2.0 4九香虫水煎液低剂量组 8 5 1.5 0±1 5.5 8

由表1可以看出，与模型组相比，脂肪油高、低剂量组大鼠溃疡指数明显降低（P＜0.01），而阳性对照组、氨基酸高、低剂量组和水煎液高、低剂量组与模型组相比差异无统计学意义（P＞0.05），九香虫提取物中对无水乙醇诱发胃溃疡具有治疗作用的是脂肪油部位。

2.2 九香虫不同提取部位对应激性胃溃疡大鼠溃疡指数的影响

结果见表2。

表2 九香虫不同提取部位对应激性胃溃疡大鼠溃疡指数的影响 （±s）

表2 九香虫不同提取部位对应激性胃溃疡大鼠溃疡指数的影响 （±s）

注：与模型组相比，1）P＜0.05，2）P＜0.01

组别 n 溃疡指数（分）空白组 8 0模型组 8 2 8.1 2±1 1.2 2阳性对照组 8 1 2.3 3±1 0.7 6 1）九香虫氨基酸高剂量组 8 2 3.3 8±1 1.2 0九香虫氨基酸低剂量组 8 2 8.8 8±1 3.8 1九香虫脂肪油高剂量组 8 1 1.4 3±7.5 9 2）九香虫脂肪油低剂量组 8 7.8 3±6.7 9 2）九香虫水煎液高剂量组 8 2 8.7 5±9.3 9九香虫水煎液低剂量组 8 2 9.7 5±1 2.5 6

由表2可以看出，与模型组相比，阳性对照组、脂肪油高、低剂量组大鼠的溃疡指数显著降低（P＜0.05，P＜0.01）。而氨基酸高、低剂量组和水煎液高、低剂量组大鼠的溃疡指数与模型组相比无明显变化（P＞0.05），提示九香虫提取物中对应激性胃溃疡具有治疗作用的是脂肪油部位。

3 讨论

本次研究表明，九香虫脂肪油对应激性和无水乙醇诱发的溃疡大鼠具有抗实验性胃溃疡作用，氨基酸和水煎液部位未观察到抗溃疡作用。本次实验剂量折算至临床用量为10～20 g。临床上应用九香虫治疗各种胃脘痛主要是以煎剂形式与其他中药配伍应用，因此推测本次未观察到水煎液的抗溃疡作用，可能与其单用疗效降低有关，且水煎煮提取脂肪油不够充分有关。本实验提示临床应用九香虫治疗胃溃疡时，研末吞服可能会提高疗效。