鲍曼不动杆菌的耐药性检测及多重耐药菌株质粒图谱分析

吕婕，马玲

昌吉州人民医院检验科，新疆 昌吉 831100

鲍曼不动杆菌（Ab）是近年来在临床上出现频率越来越高的一种细菌，加上对患者进行多种抗生素治疗，这就导致鲍曼不动杆菌开始出现越来越强的耐药性，这一点引起许多临床医护人员和微生物研究工作者的广泛关注。鲍曼不动杆菌可以长期存活并广泛分布在医院的各类环境中，这就致使CCU以及ICU中的危重患者相对感染的机率增加，这类感染被称为ICU获得性感染[1]。目前发展最快，耐药性最强的是耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌，主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等[2]。这类细菌甚至已经变异出了“全耐药”的鲍曼不动杆菌(Pan drug resistantacinetobacter baumannii)，在临床上应引起高度警惕。

1 材料和方法

1.1 菌种采集 此次选取我院2018年7月-2019年6月入院治疗后院内感染鲍曼不动杆菌的患者作为菌种采集人群。对患者留取的100份培养标本进行分离培养工作。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：（1）选取鲍曼不动杆菌感染，有相关症状、体征的患者；（2）入院时未有细菌感染的人群。（3）同意参与此次研究并配合者。排除标准：（1）剔除社区获得性感染人群，防止对实验数据造成影响。（2）合并其他细菌感染者。（3）无法配合研究者。

2 研究方法

2.1 检测材料 法国梅里埃全自动鉴定药敏仪VITEK2-COMPACT与VITEK MS质谱仪。

2.2 标本检测 对分离培养到的鲍曼不动杆菌菌株进行VITEK2-COMPACT药敏分析，选取法国梅里埃GN16卡片，其包含临床常用的种抗生素头孢曲松，庆大霉素，妥布霉素，头孢吡肟，环丙沙星，左氧氟沙星，亚胺培南，替加环素，复方新诺明。除此之外，对阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、米诺环素、头孢他啶、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦这几种药物进行K-B法药敏试验。并且对分离培养到的鲍曼不动杆菌菌株进行VITEK MS质谱仪鉴定。VITEK MS鉴定过程是：首先将待鉴定菌涂在靶板的点位中，加1ul VITEK MS-CHCA基质 液，待干燥后放入VITEK MS仪器获取细菌全细胞蛋白(主要是核糖体蛋白）质谱。然后将待鉴定菌质谱与数据库中已知菌质谱进行比较、分析从而获得鉴定结果。

3 基本原理

VITEK MS质谱仪采用MALDI-T0F技术，用于临床微生物的快速鉴定。质谱仪主机由两部分组成：基质辅助激光解吸电离离子源（MALDI)和飞行时间质量检测器（TOF）。MALDI的原理是用激光照射标本与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给标本中的生物分子，并将质子转移到生物分子而使生物分子发生电离。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即待测离子的质荷比（M/Z）与离子的飞行时间成正比。VITEK MS由标本准备工作站、主机、数据采集工作站及Myla软件的服务器组成。VITEK MS可与VITEK2系统连接，实现快速鉴定和药敏试验。

表1 菌株耐药性

4 结果

4.1 统计学处理 使用SPSS 2.0软件进行数据处理后，发现鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素均有不同程度耐药，其中对第三代头孢菌素的耐药率最高，对头孢曲松的中介耐药率高达92.3%；对阿米卡星、头孢派酮/舒巴坦和替加环素、米诺环素的耐药率较低。其中替加环素耐药率为5.6%，所有菌株均对抗生素有1种或1种以上抗生素有很强的耐药性[3]。见表1。

4.2 质粒图谱 对多重耐药鲍曼不动杆菌菌株进行VITEK MS质粒图谱分析。可以发现多重耐药菌株与敏感菌株的质粒图谱点位有较大差异。

5 讨论

通过以上的实验可以发现，绝大多数抗生素对于治疗多重耐药鲍曼不动杆菌已没有较好的疗效，VITEK MS质粒图谱可以通过位点图的差异提示我们多重耐药的可能。虽然药敏实验结果提示临床在治疗时尽量使用敏感程度较高的抗生素，但也告诫我们合理使用抗生素治疗感染性疾病的重要性。当前抗生素的滥用已导致许多耐药菌的出现[4,5]，如果仍不加以重视，迟早会出现全耐药的超级细菌[6,7]。长此以往，对鲍曼不动杆菌的抗生素治疗效果就微乎其微，甚至是无药可救。除此之外，在临床治疗时还要注意不要重复感染[8]，这样极易产生新的耐药性菌种，就会加大疾病的治疗难度，而患者痊愈的希望也会进一步降低。所以合理使用抗生素在医疗各界仍是值得广泛关注的问题。