金银花不同部位化学成分的比较研究

章艳玲

（新乡学院化学化工学院，河南新乡453003）

0 引言

金银花，又名忍冬、银花、双花等，自古被誉为清热解毒的良药。它味甘，性寒，具有清热泻火、燥湿、凉血、解毒及清虚热等功效。现代医学研究证明，金银花药理作用主要表现在抑菌、抗病毒、解热、抗炎、保肝、止血、抗氧化、免疫调节等方面。金银花对于伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠及绿脓杆菌、百日咳杆菌等杆菌和葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、脑膜炎球菌等球菌，都有比较强的抑制能力，所以对于流行性感冒和炎症均有一定治疗效果，且金银花的毒性低，副作用小。

金银花的主要活性成分有：有机酸类化合物、黄酮类化合物、挥发油成分、三萜类化合物等。对金银花有效成分的研究多是对花蕾中有效成分的研究，如王国亮等[1]对金银花的花蕾进行分析，从中鉴定出27种挥发油成分。刘家欣等[2]对湘西栽培的金银花干燥花蕾中的挥发油进行分析，共鉴定出40种成分，占精油总量的80%。高玉敏等[3]1995年首次从金银花中分离出4个黄酮类化合物。黄丽瑛等[4]从金银花花蕾的氯仿提取物中分离得到两种黄酮类物质。张英华等[5]对不同产地的金银花中绿原酸的含量进行比较，指出不同产地金银花中绿原酸含量有很大差异。也有少数人对金银花枝叶中化学成分进行研究，如景小琦等[6]采用紫外分光光度法测定不同时期的金银花修剪枝中各部位的粗黄酮含量。张雁冰等[7]对密县金银花及其茎、叶中绿原酸含量进行测定。笔者查阅了大量资料，发现很少有人对金银花茎，叶和花中化学成分进行比较研究，因此有必要进行更加深入的研究，拓宽其有效成分的研究范围，为扩大金银花的生药资源提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 研究对象 试验所用材料金银花购自河南封丘中药市场，经河南中医大学中药学院药用植物实验室鉴定为金银花(Lonicera japonica Thunb)。样品经晒干后粉碎使用。

1.1.2 仪器与设备 循环水式多用真空泵（SHB-Ⅲ郑州长城）、旋转蒸发仪（RE-52AA上海亚荣）、电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9070A上海精宏）、电子分析天平（AUW120日本岛津）、PDL-40B型离心机，722分光光度计（上海分析仪器厂）。恒温水浴锅，粉碎仪，电热炉，回流提取装置，过滤装置，干燥箱，常规玻璃仪器，Uvmini-1240紫外可见分光光度计（日本岛津有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 黄酮类化合物的测定

（1）标准曲线的制作。精密称取干燥至恒重的无水芦丁10.0 mg，置于50 mL的容量瓶中，加70%乙醇适量溶解，加70%乙醇定容至刻度。精密量取上述标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00 mL，分别放置于25 mL容量瓶，加纯净的蒸馏水至7.0 mL每个容量瓶，加5%亚硝酸钠溶液1 mL，混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加1 mol/L氢氧化钠试液10 mL，用水定容，摇匀，放置15 min。以加标准溶液0.00 mL的样品为空白，在510 nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线[8-10]。

（2）黄酮含量测定。准确称1.50 g待测样品粉末，加入60 mL 70%乙醇溶剂放于100 mL圆底烧瓶内，置于水浴锅上，70℃条件下回流提取60 min，过滤，重复提取两次；合并过滤液，用70%乙醇定容于100 mL容量瓶中，摇匀待用。精确量取1.0 mL，参照标准曲线制备，以加标准溶液0.0 mL的样品为空白，在510 nm波长处测定吸光度。

1.2.2 碳水化合物的测定 可溶性糖的含量测定采用硫酸-蒽酮法[11]、多糖的含量测定采用苯酚－硫酸法[12-13]。

1.2.3 绿原酸含量的测定

（1）标准曲线的制作。精密称取绿原酸标准品5.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用95%的乙醇溶解并定容。准确量取标准溶液 0.00、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50、2.00、2.50 mL分别放置于10 mL的容量瓶中，并用95%的乙醇定容，以加标准溶液0.0 mL的样品为空白，在330 nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线[14]。

（2）绿原酸含量的测定。将金银花茎、叶、花各样品在100℃时烘干至恒重，粉碎过80目筛，准确称取处理后的样品各1.0 g，置于150 mL锥形瓶中，量取50 mL 95%的乙醇加入，用电子天平称量总重量。于85℃的恒温水浴锅里回流4 h。放置，冷却至室温时，在电子天平上添加体积分数95%的乙醇至原重，过滤待用。精确吸取提取液的滤液1 mL，用95%的乙醇稀释50倍，以加标准溶液0.0 mL的样品为空白，在327 nm波长处测定吸光度[15]。

1.2.4 其他成分测定 维生素C含量的测定采用2,6-二氯酚靛酚滴定法[16-18]，可溶性蛋白质含量的测定采用考马斯亮蓝法G-250染料结合法[19]，游离氨基酸含量的测定采用茚三酮呈色法[20]。

2 结果与分析

2.1 黄酮类化合物的含量及分析

经分光光度法测得金银花茎、叶和花各部位黄酮类化合物的含量分别为：14.26、96.52、40.72 mg/g。金银花茎、叶和花中黄酮类化合物含量由高到低为：叶＞花＞茎。且金银花叶中黄酮类化合物的含量96.52 mg/g是金银花花蕾中测定结果40.72 mg/g的2.37倍，叶子中的含量远远高于花中的含量（表1）。

表1 金银花茎、叶和花中的化学成分含量 mg/g

2.2 碳水化合物含量及分析

用硫酸-蒽酮法和苯酚－硫酸法分别测金银花茎、叶和花3种材料，测得可溶性糖含量分别为85.32、50.64、52.03 mg/g，多糖的含量为：67.53、46.96、43.45 mg/g。金银花茎、叶和花中可溶性糖、多糖的含量高低是：可溶性糖：茎＞花＞叶；多糖含量：茎＞叶＞花（表1）。

2.3 绿原酸含量及分析

从表1可以看出经紫外分光光度法测得金银花茎、叶和花中绿原酸含量分别为：15.25、23.05、32.35 mg/g。金银花茎、叶和花中绿原酸的含量由高到低是：花＞叶＞茎（表1）。

2.4 维生素C含量

从表1可以看出用2,6-二氯酚靛酚滴定法测得金银花茎、叶和花各部位维生素C的含量分别为：0.34、1.47、1.05 mg/g。金银花茎、叶和花中维生素C含量由高到低为：叶＞花＞茎（表1）。

2.5 可溶性蛋白质含量及分析

从表1可以看出：金银花茎、叶和花中可溶性蛋白质的含量分别为：2.16、2.82、4.14 mg/g。因此，可溶性蛋白质含量由高到低是：花＞叶＞茎。

2.6 游离氨基酸的含量及分析

从表1可以看出：金银花茎、叶和花中游离氨基酸的含量分别为：0.0447、0.16、0.269 mg/g。因此，游离氨基酸含量由高到低是：花＞叶＞茎。

3 讨论与结论

金银花是主要的中草药之一，其药用价值广泛，年使用量特别大，前人对金银花有效成分的研究多是对花蕾中有效成分的研究，如王国亮等[1]对金银花的花蕾进行分析，从中鉴定出27种挥发油成分。刘家欣等[2]对湘西栽培的金银花干燥花蕾中的挥发油进行分析，共鉴定出40种成分，占精油总量的80%。张英华等[5]对不同产地的金银花中绿原酸的含量进行比较，指出不同产地金银花中绿原酸含量有很大差异。也有少数人对金银花枝叶中化学成分进行研究，如景小琦等[6]采用紫外分光光度法测定不同时期的金银花修剪枝中各部位的粗黄酮含量。张雁冰等[7]对密县金银花及其茎、叶中绿原酸含量进行测定。笔者查阅了大量资料，发现很少有人对金银花茎，叶和花中化学成分进行系统地比较研究。

与金银花花蕾相比，金银花茎、叶采集更容易，价格更便宜。且近几年随着金银花种植规模的扩大，金银花修剪整形技术也得到大力推广，每年都可得到大量的枝叶，价格低廉，这些金银花枝叶尤其是金银花叶子应该得到充分的利用。

本研究对金银花茎、叶和花中的黄酮类物质、维生素C、绿原酸、可溶性蛋白质、游离氨基酸、可溶性糖和多糖的含量进行系统的比较研究，研究结果为：黄酮类化合物和维生素C含量均为叶＞花＞茎；绿原酸、可溶性蛋白质和游离氨基酸含量均为：花＞叶＞茎；可溶性糖：茎＞花＞叶；多糖含量：茎＞叶＞花。结果表明金银花茎、叶和花中的化学成分相似，具有较强的药理作用。本研究的不足之处在于所购试验材料均为同一生长期的材料，未对不同生长时期材料中的化学成分进行研究，未来可以考虑对不同生产时期金银花各部位的化学成分进行更深入的研究，以便为金银花茎、叶的有效利用提供更全面科学的理论依据。