80种农药原药急性毒性分析

谢 晶，李羡筠，郑艳艳，梁恒秋，梁丹玉

（广西壮族自治区职业病防治研究院，南宁 530021）

WHO首份预防自杀报告指出：农药中毒是全球最为常见的自杀方法之一[1]。全球每年至少有300万人发生严重的急性农药中毒，致死率较高，仅亚洲农村地区每年就有30万人死于农药中毒[2]。我国2008—2014年急性农药中毒共发生18 975例，年平均发生2 711例[3]。农药中毒已成为全球关注的公共卫生问题。急性毒性试验作为农药毒理学安全性评价的第一阶段，对农药的毒性评估起关键性作用。本试验采用农药毒理学急性毒性试验方法，对杀虫剂、除草剂、杀菌剂的急性毒性进行分析比较，为其他毒性试验提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 受试物

80种农药原药，包括杀虫剂（19种）、除草剂（41种）、杀菌剂（20种）。

1.2 实验动物

健康成年大鼠（SPF级），体重180～220 g，用于急性经口毒性试验、急性吸入毒性试验（简称“经口、吸入”）；体重200～300 g，用于急性经皮毒性试验（简称“经皮”）。新西兰大白兔（普通级），体重2.0～3.0 kg，用于眼刺激试验、急性皮肤刺激试验（简称“眼刺、皮刺”）。豚鼠（普通级），体重250～300g，用于皮肤变态反应（致敏）试验（简称“致敏”）。大鼠、兔检疫3 d，豚鼠检疫6 d，无异常即可用于试验，大鼠灌胃前禁食16 h左右。

1.3 方法

按照《农药登记毒理学试验方法》（GB 15670—1995）中急性毒性试验方法进行经口、经皮、吸入、眼刺、皮刺、致敏试验，数据分析采用SPSS 13.0软件。

1.4 判定标准

大鼠急性毒性判定标准按照《农药登记资料规定》（2007年版）中产品毒性分级标准，其他结果评定均参照《农药登记毒理学试验方法》。若大鼠出现雌、雄不同毒级时，以最高毒级为准。

2 结果与分析

2.1 急性毒性试验结果

经口、经皮、吸入试验结果赋值标准：1级，微毒；2级，低毒；3级，中等毒；4级，高毒；5级，剧毒。眼刺试验结果赋值标准：0级，无刺激性；1级，轻度刺激性；2级，轻度至中度刺激性；3级，中度刺激性；4级，中度至重度刺激性；5级，重度刺激性。皮刺试验结果赋值标准：0级，无刺激性；1级，轻度刺激性；2级，中度刺激性；3级，重度刺激性。致敏试验赋值标准：1级，弱致敏物；2级，轻度致敏物；3级，中度致敏物；4级，强致敏物；5级，极强致敏物。

各受试农药毒性试验结果见表1～表3。

表1 19种杀虫剂急性毒性试验结果

表2 41种除草剂急性毒性试验结果

表3 20种杀菌剂急性毒性试验结果

2.2 急性经口、经皮、吸入毒性试验结果分析

受试农药急性经口毒性以低毒为主，其次是微毒，少部分是中等毒；所测农药中，中等毒杀虫剂数量最多，其后依次为杀菌剂、除草剂。SPSS趋势检验结果为x2=6.816，P=0.010。说明3类农药经口毒性分布不同，杀虫剂随毒级增大数量增多；杀菌剂随毒级增大数量减少；除草剂以低毒为主，其次是微毒，仅炔草酯为中等毒，试验统计结果见表4。

表4 大鼠急性经口试验结果统计

大鼠急性经皮毒性除杀虫剂甲氨基阿维菌素苯甲酸盐为中等毒，其他试验农药均为低毒。SPSS趋势检验结果为x2=2.199，P=0.227。说明3类农药经皮毒性无统计学差别。各农药急性吸入毒性均为低毒。

2.3 兔眼刺激、皮肤刺激，豚鼠致敏试验结果分析

兔眼刺激试验结果统计见表5。供试农药中，杀虫剂对兔眼的刺激性随刺激程度加强数量呈递减趋势；除草剂以无刺激性为主，其次是轻度刺激性、中度刺激性。杀菌剂以无刺激性居多，但杀菌剂克菌丹对兔眼具有重度刺激性，且21 d眼刺激症状未恢复。SPSS趋势检验结果为x2=0.181，P=0.681，说明3类农药对兔眼的刺激强度无统计学差别。

表5 兔眼刺激试验结果统计

各农药对兔皮肤刺激症状均在染毒后14 d消失，兔急性皮肤刺激试验结果见表6。供试农药中杀虫剂、杀菌剂对兔皮肤多无刺激性，少数为轻度刺激性；除草剂对兔皮肤均无刺激性。SPSS趋势检验结果为x2=0.850，P=0.421。说明所测3类农药对兔皮肤刺激强度无统计学差别。受检农药均为弱致敏物。

表6 兔急性皮肤刺激试验结果统计

3 讨论

本次研究显示：受试农药急性经口毒性以低毒为主，其次是微毒，少数是中等毒。受试农药中，经口毒性为中等毒的杀虫剂数量较多；除草剂以低毒为主，其次是微毒，仅1个品种为中等毒。除杀虫剂甲氨基阿维菌素苯甲酸盐急性经皮毒性为中等毒，其他受试农药均为低毒。受试农药的急性吸入毒性均为低毒。孙新友等[4]研究结果显示：91种农药制剂对家蚕急性毒性试验中，杀虫剂中等及以上毒性品种超过90%，且所有剧毒品种均为杀虫剂；供试的12种除草剂均对家蚕低毒。杀虫剂毒性最高，与本次试验结果一致。2011年1月至2015年12月间，宜宾市某医院收治的1 556例农药中毒病例中，死亡35例，病死率为2.25%。其中，引起中毒者死亡的农药多为杀虫剂和除草剂，分别致死17例和16例，两者死亡病例占总中毒死亡病例的94.29%[5]。本次试验中，中等毒农药杀虫剂数量高于杀菌剂，除草剂数量最少，涉及的品种包括杀虫剂二溴磷、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、杀螟丹、杀虫单、阿维菌素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、氟虫腈，杀菌剂三环唑、乙蒜素，除草剂炔草酯。以上农药毒性偏高的杀虫剂类别为有机磷类、拟除虫菊酯类、氨基甲酸酯类、抗生素类。其中，有机磷类杀虫剂是引起急性中毒数量最多的农药类别，其在动物体内与胆碱酯酶结合，使乙酰胆碱在体内过量堆积，激活胆碱能受体（毒蕈碱或烟碱受体），从而对哺乳动物产生毒性[6]。针对以上农药，接触者要注意自我安全防护。

本次研究还显示：受试农药对兔眼、皮肤以无刺激性为主，其次是轻度刺激性；受试农药对兔眼还存在轻度至中度、中度、重度刺激性，引起兔眼中度刺激的农药品种包括二溴磷、灭草松、2,4-滴、麦草畏、2甲4氯。除灭草松对兔眼和皮肤存在中等刺激性有明确报道外[7]，其他农药对兔眼的刺激性报道甚少。2,4-滴为具有苯氧羧酸结构的合成激素类除草剂，其较强的内吸传导性可能是导致兔眼刺激症状严重的原因。麦草畏是选择性内吸传导型苗后除草剂，其持效期长，会使试验动物体重减轻，肝脏受损，雌性容易流产，严重时还会造成失明[8]。2甲4氯属于有机氯类除草剂，为具有选择性的内吸传导型茎叶除草剂。急性、亚慢性试验结果显示，其对肝脏产生一定程度的损害[9]。

供试80种农药原药急性毒性以低毒为主，少数为中等毒。农药使用者要规范农药施用，妥善保管和存放农药，加强个体防护；农药生产者应研发高效、微毒、低残留农药，以降低农药对健康的损害。